Postępy w dermatologii przy użyciu aptameru DNA „Aptamina C” Innowacja: Zapobieganie stresowi oksydacyjnemu i efekt Maksymalizacja witaminy C poprzez antyoksydację

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Sooho Choi PhD1|dr Jeongmin Han Kandydat2|Ji Hyun Kim kandydat MS1|dr A-Ru Kim Kandydat3|dr Sang-Heon Kim Kandydat3|dr Weontae Lee, profesor2|Moon-Young Yoon, prof.3|Gyuyoup Kim PhD1|dr Yoon-Seong Kim, profesor 1

Abstrakcyjny

Tło:Witamina C(znany również jako kwas L-askorbinowy) odgrywa kluczową rolę w redukcji reaktywnych form tlenu (ROS) i regeneracji komórek poprzez ochronę komórek przed stresem oksydacyjnym. Chociaż witamina C jest szeroko stosowana na rynkach kosmetycznych i terapeutycznych, istnieją znaczne dowody na to, że witamina C łatwo ulegautlenianieprzez powietrze, pH, temperaturę i światło UV podczas przechowywania. Ten niedobór witaminy C zmniejsza jej siłę działania jako przeciwutleniacza i skraca okres przydatności do spożycia produktów zawierających witaminę C jako jej składnik. Aby przezwyciężyć niedobór witaminy C, opracowaliśmy Aptamin C, innowacyjny aptamer DNA, maksymalizujący skuteczność antyoksydacyjną witaminy C poprzez wiązanie się ze zredukowaną formą witaminy C i opóźnianie jejutlenianie.

Metody:Wiązanie aptaminy C z witaminą C określono za pomocą analizy ITC. Eksperyment ITC przeprowadzono z 0.2 mmol/Lwitamina Cktóry został wstrzyknięty 25 razy w porcjach 2 µl do 1,8 ml celi na próbkę zawierającej Aptaminę C w stężeniu 0.02 mmol/l. Dane zostały dopasowane do izotermy wiązania w jednym miejscu za pomocą programu pochodzenia dla ITC v.5.0.

Wyniki:Aby zbadać wpływ Aptamin C iwitamina Ckompleks w skórze ludzkiej, przeprowadzono zarówno badania in vitro, jak i badania kliniczne. Zaobserwowaliśmy, że kompleks aptaminy C i witaminy C był znacząco skuteczny w poprawie zmarszczek, działaniu wybielającym i zwiększeniu nawilżenia. W teście klinicznym osoby leczone kompleksem wykazały znaczną poprawę podrażnienia i swędzenia skóry. W teście nie wystąpiły żadne niepożądane reakcje kompleksu Aptamin C.

Wniosek:Podsumowując, wyniki te pokazały, że Aptamina C, innowacyjny, nowatorski związek, może potencjalnie służyć jako kluczowy składnik kosmeceutyczny w wielu schorzeniach skóry.

SŁOWA KLUCZOWEantyoksydacja, Aptamin C (Aptamer wiążący witaminę C),utlenianie, stres oksydacyjny,witamina C(Kwas L-askorbinowy)

cistancheposiadają silną zdolność antyoksydacyjną

1|WPROWADZANIE

Reaktywne formy tlenu (ROS) to chemicznie reaktywne formy chemiczne zawierające tlen, który odgrywa ważną rolę w sygnalizacji komórkowej i homeostazie.1-3 Obejmują one nie tylko pozytywne efekty, takie jak indukcja genów obronnych gospodarza i mobilizacja systemów transportu jonów, ale odgrywa również rolę w apoptozie (programowanej śmierci komórki). Poziom 4,5ROS może zostać zwiększony przez stres środowiskowy, co prowadzi do uszkodzenia struktur komórkowych.3 Zjawisko to nazywa się „stresem oksydacyjnym”. Stres oksydacyjny jest jedną z głównych przyczyn różnych chorób, w tym chorób neurodegeneracyjnych, choroby Lou Gehriga, autyzmu, stwardnienia rozsianego i chorób skóry.6-15 Ponadto stres oksydacyjny ma bezpośredni wpływ na proces starzenia się skóry16; białka, lipidy i DNA wrażliwie reagują na stres oksydacyjny wywoływany przez ROS.17 Przeciwutleniacze są bardzo skuteczne w ochronie skóry, ponieważ reagują bezpośrednio z ROS, uniemożliwiając im dotarcie do biologicznych cząsteczek docelowych.18,19 Przeciwutleniacze, takie jakwitamina C, witamina E, koenzym Q10 i związki polifenolowe chronią skórę przed uszkodzeniami powodowanymi przez ROS. W ten sposób przeciwutleniacze pomagają zapobiegać i leczyć różne choroby skóry oraz spowalniają proces starzenia się skóry.20 Zastosowanie witaminy C w przemyśle wynika przede wszystkim z jej właściwości przeciwutleniających, które są wynikiemwitamina Czdolność do neutralizowania wolnych rodników tlenowych w procesie zwanym wymiataniem rodników.21,22 Jednak ze względu na te same właściwości przeciwutleniające sama cząsteczka jest z natury podatna na degradację poprzezutlenianie. Aby rozwiązać ten problem, opracowaliśmy Aptamin C, aptamer DNA, który specyficznie wiąże się z witaminą C i hamuje utlenianie witaminy C. Aptamery to jednoniciowe oligonukleotydy oparte na DNA lub RNA, zdolne do selektywnego wiązania szerokiej gamy cząsteczek. Aptamery są powszechnie identyfikowane metodą selekcji in vitro, określaną jako Systematic Evolution of Ligands przez EXponential wzbogacenie lub „SELEX”. Zidentyfikowaliśmy, że Aptamina C hamujeutlenianiewitaminy C z kilku czynników utleniających i utrzymuje aktywność przeciwutleniającą podczas długotrwałego przechowywania. Aby potwierdzić ocenę bezpieczeństwa aptaminy C, przeprowadzono eksperymenty na poziomie komórkowym i bezpośrednio zastosowano u ludzi i nie zaobserwowano toksyczności. Choroby skóry, takie jak atopowe zapalenie skóry, łuszczyca i trądzik są związane z odpowiedzią immunologiczną i ROS.23Witamina Cma zdolność usuwania ROS i działa przeciwzapalnie.24 Aptamina C zapobiegautlenianiewitaminy c i maksymalizuje jej skuteczność poprzez powolne uwalnianie. Dlatego oczekujemy, że kompleks Aptamin C-witamina C będzie wykazywał efekt synergii.

2|MATERIAŁY I METODY

2.1|Badanie przesiewowe aptameru pod kątem witaminy C ze zredukowanym tlenkiem grafenu

Metoda ta została przeprowadzona poprzez modyfikację metody poprzednich badań.25 Kandydaci ssDNA, które mogą wiązać się specyficznie zwitamina Czostały opracowane z losowej biblioteki ssDNA składającej się z około 1X1018 różnych sekwencji. W przypadku biblioteki ssDNA użyliśmy sekwencji wykonanej na zamówienie o wielkości 60 merów i zawierającej 30 losowo wygenerowanych sekwencji nukleotydowych oraz miejsce startera do amplifikacji (5′-ATGCGGATCCCGCGC-(N)30-GCGCGAAGCTTGCGC-3′). Wykonaliśmy w sumie pięć rund, zmieniając warunki eksperymentalne, aby wybrać bardziej konkretną sekwencję. Całkowita objętość reakcji wynosiła 200 µl. Około 20 μl 10x buforu wiążącego (10x PBS dodano 10 mmol/L MgCl2), 80 μl rGO (5 mg/mL, rozcieńczony w wodzie) i 200 pikomoli biblioteki ssDNA (20 μl roztworu podstawowego 100 μmol/L ) dodano i przeniesiono dH2O do 200 µl. Reakcja przebiegała przez 30 minut w celu związania biblioteki ssDNA z rGO, a następnie mieszaninę wirowano przy 20 000 g przez 20 minut w celu usunięcia supernatantu. Osad rGO przemyto 1 raz 200 µl buforu wiążącego, który ma takie samo stężenie jak warunki wiązania celu w każdej rundzie. Aby eluować kandydatów, 200 nanomoliwitamina Crozcieńczono w 2{{11}0 μl buforu wiążącego do osadu rGO i etap elucji trwał 1 godzinę. Eluowany ssDNA podzielono przez odwirowanie, prowadzono przy 20 000 g przez 20 minut i amplifikowano. Wykonaliśmy precypitację EtOH w celu wyeliminowania zanieczyszczeń z wyjątkiem ssDNA przed amplifikacją. Przeprowadziliśmy asymetryczną reakcję PCR, aby uzyskać zamplifikowane ssDNA. Stosunek startera do przodu do startera do tyłu w asymetrycznej reakcji PCR wynosił 10:1. Przeprowadziliśmy elektroforezę na 2,5-procentowym żelu agarozowym, aby potwierdzić produkt PCR kilkoma mikrolitrami. Asymetryczny PCR nie może wytworzyć tylko ssDNA. Tak więc zrobiliśmy metodę zgniatania i namaczania, aby wyizolować kandydatów na ssDNA. W tej metodzie wykonaliśmy elektroforezę na 12% natywnym żelu poliakryloamidowym i wybarwiliśmy żel bromkiem etydyny (EtBr). Aby oddzielić dwuniciowy DNA (dsDNA) i ssDNA, część żelu barwionego ssDNA wycięto, sproszkowano i wyekstrahowano ssDNA buforem do rozdrabniania i namaczania (500 mmol/L NH4OAc, 0,1 procent SDS, 0,1 mmol/L EDTA) nocny. Sproszkowany żel oddzielono przez odwirowanie. Supernatant zawierający ssDNA zatęża się i oczyszcza przez wytrącanie EtOH. Wysuszone ssDNA zebrano ze sterylizowaną dH2O i wykorzystano w następnej rundzie jako bibliotekę.

naturalne składnikicistanche amazon

2.2|Eksperyment z kalorymetrią izotermiczną (ITC)

Doświadczenie kalorymetryczne z miareczkowaniem izotermicznym przeprowadzono przy użyciu systemu VP-ITC (MicroCal Inc Northampton) w temperaturze 25°C w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami składającej się z 1 mmol/L chlorku magnezu (pH 7,4). Przed każdym eksperymentem miareczkowania Aptamin C 2 ml iwitamina C600 µl próbek odgazowywano przez 30 minut pod próżnią, bez mieszania, w temperaturze o kilka stopni niższej od temperatury eksperymentu. Przygotowaliśmy 0,2 mmol/L witaminy C, którą wstrzykiwano 25 razy w porcjach 2 µL do 1,8 mL celi na próbkę zawierającej Aptaminę C w stężeniu 0,02 mmol/L. Dane dopasowano do izotermy wiązania w jednym miejscu przy użyciu programu pochodzenia dla ITC v.5.0 (MicroCal Inc).

2.3|Testy mikropłytkowe oparte na fluorescencji do utleniania witaminy C

Utlenianiezwitamina Czostał zmierzony poprzez detekcję utlenionego produktu dehydroaskorbinianu (DHA) przy użyciu zmodyfikowanej wersji metody opisanej przez Vislisela i wsp.7 W tej metodzie DHA jest wykrywany poprzez reakcję z o-fenylenodiaminą (OPDA) z wytworzeniem fluorescencyjnego produktu kondensacji 3-( dihydroksyetylo)furo[3,4-b]chinoksalina-1-on. Test przeprowadzono w następujący sposób na czarnych 384-dołkowych płytkach (Greiner Bio-One). Aptamery najpierw rozpuszczono w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami, pH 7,2, zawierającej 1 mM MgCl2, w stężeniu 200 µmol/L, a następnie zwinięto przez podgrzanie do 95 stopni i pozostawiono do powolnego ochłodzenia do temperatury pokojowej przez 15 minut. Złożone aptamery następnie rozcieńczono 1:1 (v:v) w świeżo przygotowanym roztworze 5 mmol/Lwitamina Cw buforze testowym [50 mmol/L octan sodu, 1 procent (wag./obj.) BSA, 0,05 procent (obj./obj.) Tween 20, 1 mM MgCl2 (Sigma, wszystkie składniki) doprowadzone do pH 5,5] oraz mieszaninę inkubowano przez 30 minut w temperaturze pokojowej, aby umożliwić związanie aptamerów przed dodaniem utleniacza. Następnie do roztworów witaminy C/aptameru w stężeniach (EM) H2O2 (Sigma) dodano utleniacze. Utleniacze wstępnie rozcieńczono do ich stężeń roboczych w buforze testowym. Próbki następnie inkubowano w temperaturze pokojowej przez 10 minut przed dodaniem OPDA (Sigma) w stężeniu 5,5 mmol/L w buforze testowym. Bezpośrednio po dodaniu OPDA, fluorescencję próbek przy 425 nm oznaczano za pomocą czytnika płytek SpectraMax® i3X (Molecular Devices) ze wzbudzeniem przy 345 nm, przez 45 minut z pomiarami co 60 sekund. Wszystkie próbki i naczynia zawierające odczynnik zostały owinięte folią, aby chronić je przed światłem podczas wszystkich inkubacji przeprowadzonych dla testów fluorescencyjnych.

2.4|Pomiar redukcji witaminy C za pomocą DCPIP (2,6-dichlorofenolindofenol)

Aby określić redukcjęwitamina C, przeprowadziliśmy eksperymenty z wykorzystaniem reakcji DCPIP. Witamina C reaguje z DCPIP zmieniając kolor z niebieskiego na bezbarwny. Przygotowaną witaminę C potraktowano 5% Aptamin CTM, a nietraktowaną witaminę C inkubowano w temperaturze pokojowej przez 8 tygodni. Próbkę mierzono po 2, 4 i 8 tygodniach. Około 2 ml DCPIP dodano do kolby stożkowej za pomocą pipety i dodawano pierwszą nietraktowaną witaminę C, aż roztwór stał się bezbarwny. Ilośćwitamina Cdodany został zmierzony i powtórzony z innymi próbkami. Stopień redukcji każdej próbki obliczono na podstawie tych danych.

2.5|Badanie in vitro działania przeciwzmarszczkowego w ludzkich fibroblastach skóry

Aby ocenić żywotność komórek w ludzkich fibroblastach skóry, komórki potraktowano różnymi końcowymi stężeniami aptaminy C zwitamina C(Aptamina C ug plus witamina C ug/ml) {{0}}.01 plus 00,5 ug/ml, 0,1 plus 5 ug/ml, 0,5 plus 25 ug /ml, 1 plus 50 µg/ml i 2 plus 100 µg/ml. Następnie komórki potraktowano w stężeniach aptaminy C z witaminą C w celu wykrycia aktywności kolagenu wewnątrzkomórkowego, kolagenazy wewnątrzkomórkowej (MMP-1) i elastazy.

Ludzkie fibroblasty skóry (HDF) wybrano na podstawie „Wytycznych oceny skuteczności kosmetyków funkcjonalnych (ΙI)” MFDS. HDF hodowano w mieszaninie DMEM/F12 3:1 o wysokiej zawartości glukozy z dodatkiem 10% FBS i 1% antybiotyku-przeciwgrzybiczego, w nawilżonej atmosferze 5% CO2 w temperaturze 37˚C.

HDF (5 × 104 komórek/studzienkę) wysiano na 24-studzienkowych płytkach i inkubowano przez 24 godziny i potraktowano różnymi stężeniami aptaminy C zwitamina Ci inkubowano przez 24 godziny. Po 24 godzinach zebrano supernatant i zmierzono ilość prokolagenu uwolnionego do pożywki przy długości fali 450 nm za pomocą zestawu Procollagen Type IC-Peptide (PIP) ELISA Kit. Stopień produkcji kolagenu kalibrowano na podstawie zawartości białka całkowitego i porównywano z TGF-1 jako kontrolą dodatnią. Jako kontrolę rozpuszczalnika zastosowano pożywkę bez materiałów testowych.

HDF (5 × 104 komórek/studzienkę) wysiano na 24-studzienkowych płytkach i inkubowano przez 24 godziny i potraktowano różnymi stężeniami aptaminy C zwitamina Ci inkubowano przez 48 godzin. Po 48 godzinach mierzono aktywność kolagenazy przy długości fali 450 nm za pomocą zestawu MMP-1 Human ELISA Kit. Aktywność MMP-1 oceniano na podstawie zawartości białka całkowitego i porównywano z TGF-1 jako kontrolą pozytywną. Jako kontrolę rozpuszczalnika zastosowano pożywkę bez materiałów testowych.

Wszystkie dane wyrażono jako średnią ± odchylenie standardowe i pochodziły z 3 niezależnych eksperymentów. Analizę statystyczną przeprowadzono za pomocą testu t dla niezależnych próbek przy użyciu oprogramowania SPSS® (IBM) na poziomie istotności P <>

2.6|Pomiar zmarszczek skóry za pomocą systemu analizy obrazu 3D

W badaniu wzięły udział 22 kobiety (średnia wieku 50,05 ± 2,94 lat). Zmarszczki skóry kurzych łapek oceniano za pomocą systemu analizy obrazu 3D na początku, 4 i 8 tygodni. Nawilżenie skóry oceniano metodą pojemnościową, a TEWL metodą dyfuzji wody powierzchniowej skóry oraz elastyczność skóry metodą ssania na początku badania, 2, 4 i 8 tygodni po zabiegu. Również kwestionariusze samooceny dotyczące skuteczności wypełniali badani w 2 i 4 i 8 tygodniu, a użyteczności w 8 tygodniu po leczeniu. Wszystkie uzyskane dane poddano analizie statystycznej za pomocą oprogramowania SPSS®. Parametry zmarszczek kurzych łapek oceniono za pomocą PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH). System ten pozwolił na ilościową analizę szorstkości, głębokości, obszaru i objętości wystającej na skórze zmarszczki. Obraz został przeanalizowany w tym samym obszarze pod kątem parametrów zmarszczek skóry (1, Średnia głębokość zmarszczek; 2, Średnia głębokość największej zmarszczki; 3, Maksymalna głębokość największej zmarszczki; 4, Całkowita powierzchnia zmarszczek; 5, Całkowita objętość zmarszczek; 6 , Całkowita długość zmarszczek; 7, Całkowita długość zmarszczek; 8, Ra; 9, Ry; i 10, Rz) na początku, 4 i 8 tygodni po leczeniu Primos 5,8 E ver. Oprogramowanie.

3|WYNIKI

3.1|Aby z powodzeniem przeprowadzić rGO-SELEX z niestabilnym celem, konieczne było rygorystyczne podejście do przygotowania buforu

Bibliotekę ssDNA, która była związana z rGO poprzez interakcje układania π-π między pierścieniami aromatycznymi powierzchni grafenu a zasadami DNA 26,27 i niezwiązanym ssDNA na rGO, została oddzielona i usunięta przez odwirowanie. ssDNA zaadsorbowany na powierzchni rGO eluowano przez traktowanie docelowym związkiem. Według doniesień literaturowych konformacja aptameru zmienia się po związaniu z celem i osłabieniu oddziaływań π-πstack z rGO.28-31 Proces ten powtarzano przez pięć rund. Każda kolejna runda przebiegała w ostrzejszych warunkach buforowych i krótszych czasach elucji. Ta wydajność pozwoliła nam utrzymać ssDNA o lepszej specyficzności wobec związków docelowych.

Dane NGS wzbogaconej biblioteki wytworzonej w procesie rGO-SELEX dały 404071 sekwencji. Z tych danych wybraliśmy 119 sekwencji, posortowaliśmy je na 11 grup na podstawie podobieństwa struktury i wybraliśmy sekwencje reprezentatywne dla kandydatów na aptamery (Figura 1A).

3.2|Wybór aptaminy C

Struktury drugorzędowe kandydatów na aptaminę C przewidziano za pomocą bezpłatnego oprogramowania M-Fold.32,33 Kandydaci zostali pogrupowani według ich pozycji, długości, kształtu oraz liczby rdzeni i pętli o najwyższym potencjale struktury (ryc. 1B). DHA, tlenekwitamina C, jest wykrywany przez jego reakcję z o-fenylenodiaminą (OPDA), która pełni rolę wskaźnika.34 Jeśli aptamer wiąże się i zapobiega jegoutlenianie, do witaminy C i zapobiega jej utlenianiu, sygnał fluorescencyjny z 3-(dihydroksyetylo)-furo-[3,4-b]chinoksaliny-1-onu, produktu kondensacji witaminy C i OPDA, będzie niższy niż w przypadku kontrola bez aptameru. Wykres każdego kandydata na aptamer zmieszany z witaminą C i utleniaczem, z kontrolami pozytywnymi,witamina Cplus utleniacz i sekwencje mieszające zmieszane z witaminą C i utleniaczem (Rysunek 1C). Wykazano, że pięć aptamerów, Aptamin Cb, Cc, Cf, Cg i Ck ma działanie przeciwutleniające.

3.3|Hamowanie utleniania witaminy C przez aptaminę C

Aptamina C ma wysokie powinowactwo wiązania dowitamina C. Wiązanie aptaminy C z witaminą C określono za pomocą analizy ITC. Z izotermy wiązania można otrzymać entalpię (ΔH), entropię (ΔS) i stechiometrię (n) reakcji wiązania. Egzotermiczne wiązanie aptaminy Cb wykryto na podstawie pomiaru ITC, a entalpię (ΔH) obliczono jako 302,5 ± 3,788, entropię (ΔS) obliczono jako 18,9, stechiometrię(n) obliczono jako 56,7 ± {21 }}.426, a stałe dysocjacji (Kd) obliczono jako 2,13 uM dla witaminy C. Egzotermiczne wiązanie aptaminy Cf wykryto na podstawie pomiaru ITC, a entalpię (ΔH) obliczono jako 279,2 ± 2,992, entropię (ΔS) obliczono jako 18,4, stechiometrię(n) obliczono jako 167 ± 1,15, a stałe dysocjacji (Kd) obliczono jako 0.89uM dla witaminy C. Egzotermiczne wiązanie aptaminy Ck wykryto na podstawie pomiaru ITC, a entalpię (ΔH ) obliczono jako 250.4 ± 3,742, entropię (ΔS) obliczono jako 19,8, stechiometrię (n) obliczono jako 82,2 ± 0,732, a stałe dysocjacji (Kd) obliczono jako 0,90 µmol/L dla witamina C (ryc. 2A). Pomiary ITC ujawniają, że zmiana entropii po skojarzeniu z aptaminą C jest główną siłą napędową dlawitamina C. Aby zapobiecutlenianiewitaminy C w stanie ciekłym, wszystkie roztwory sporządzono z użyciem wody dejonizowanej uzdatnionej azotem. Fluorescencję wyrażono i przeanalizowano ilościowo, gdy OPDA (o-fenylenodiamina) wiązała się z DHA wytworzonym przezutlenianiewitaminy C. Porównano stopień utlenienia witaminy C w zależności od stężenia aptaminy C (125, 250, 500 i 1000 nmol/L) i potwierdzono testem OPDA. Wyniki pokazały, żewitamina Ckonwersja do kwasu dehydroaskorbinowego była wolniejsza, gdy stężenie aptaminy C było wyższe. (Rysunek 2B). Dane te dowodzą, że Aptamina C jest zależnym od dawki inhibitorem utleniania witaminy C.

Przeprowadziliśmy eksperymenty, aby ustalić, czy Aptamina C może zapobiecutlenianiewitaminy C przez długi czas. Współleczony aptaminą Cwitamina Ci nietraktowaną witaminę C wystawiono na działanie światła i pozostawiono w temperaturze pokojowej na 8 tygodni. W rezultacie, gdy nie leczona witamina C została sama, stopień redukcji zmniejszył się do mniej niż połowy w ciągu 2 tygodni, a prawie wszystkie zostały utlenione po 4 tygodniach. W obecności aptaminy C zawartość witaminy C została zredukowana do około połowy czasu 8 tygodni (ryc. 2C). Sugeruje to, że Aptamina C zapobiega utlenianiu witaminy C przez długi czas.

kulturystyka cistanche

3.4|Analiza aktywności kolagenazy wewnątrzkomórkowej (MMP‐1) i kolagenu

Na podstawie analizy aktywności kolagenazy, produkcja metaloproteinazy macierzy-1 (MMP-1) została znacznie zmniejszona w sposób zależny od dawki, o 7,06%, 9,29% i 31,81% przy stężeniach {{1{ {12}}}}.01 plus 00,5 ug/ml, 0,1 plus 5 ug/ml i 00,5 plus 25 ug/ ml, odpowiednio (Rysunek 3A). W analizie syntezy kolagenu, poziom peptydu karboksylowego typu Ι (PIP) prokolagenu był znacząco zwiększony w sposób zależny od dawki, z 25.{{20}} procentowym wzrostem przy 0,01 plus 0,5 ug/ml , 41,99 procent przy 0,1 plus 5 ug/ml i 71,18 procent przy 0,5 plus 25 ug/ml (Figura 3B).

3.5|Kliniczne badanie wpływu poprawy zmarszczek skóry na ludzką skórę

Analizę statystyczną parametrów zmarszczek przeprowadzono za pomocą systemu analizy obrazu 3D, aby ocenić wpływ produktu testowego na poprawę stanu zmarszczek skóry na ludzkiej skórze. W porównaniu z grupą kontrolną parametr „Średnia głębokość zmarszczek” został obniżony o 4,77 procent po 4 tygodniach i 4,25 procent po 8 tygodniach, parametr „Średnia głębokość największej zmarszczki” zmniejszył się o 3,37 procent po 4 tygodniach i 4,53 procent po 8 tygodniach”. Parametr „Maksymalna głębokość największej zmarszczki” został zmniejszony o 4,36 procent po 4 tygodniach i 7,19 procent po 8 tygodniach, parametr „Całkowita długość zmarszczek” zmniejszył się o 1,61 procent po 4 tygodniach i 2,67 procent po 8 tygodniach, parametr „Ra” zmniejszył się o 4,22 procent po 4 tygodniach i 3,90% po 8 tygodniach, parametr „Ry” zmniejszył się o 2,66% po 4 tygodniach i 7,11% po 8 tygodniach, parametr „Rz” zmniejszył się o 3,69% po 4 tygodniach i 6,22% po 8 tygodniach, spadek wyniósł 3,69 procent ‐7,11 procent (Rysunek 4).

4|WNIOSEK

Witamina Cjest ważną komercyjnie, ale niestabilną cząsteczką, więc poprawa jej stabilności jest przedmiotem zainteresowania różnych sektorów rynku. Nasza praca pokazuje, że Aptamina C, aptamery DNA, potencjalnie wydłuża okres przydatności do spożycia i zwiększa siłę działania takich produktów poprzez opóźnieniewitamina C utlenianiew rozwiązaniu. Wykazaliśmy kliniczną skuteczność kompleksu Aptamin C w poprawie zmarszczek i nawilżeniu skóry. Kompleks aptaminy C może również pomóc złagodzić szorstkość skóry.

poprawić wybielanie skóry