Abstrakcyjny:Ekspozycja na promieniowanie ultrafioletowe (UV) powoduje fotostarzenie skóry, prowadząc do zmarszczek i wiotczenia skóry poprzez produkcję reaktywnych form tlenu (ROS). Z tego powodu ochrona przed fotostarzeniem jest ważną cechą produktów kosmeceutycznych i dermatologicznych. Biomateriały pochodzące z produktów naturalnych są wysoce pożądane jako przyszłe możliwe składniki, ponieważ te biomateriały są często bezpieczne i skuteczne. W tym badaniu naszym celem było scharakteryzowanie działania ochronnego na skórę preparatu Pradosia multisite, tradycyjnie stosowanego w leczeniu oparzeń słonecznych i rumienia. Określiliśmy działanie wychwytujące wolne rodniki, antymelanogenne i nawilżające metanolowego ekstraktu Pradosia multisite (Pm-ME) w keratynocytach (komórki HaCaT), melanocytach (komórki B16F10) i fibroblastach (fibroblasty ludzkiej skóry (HDF)) w stężenia niecytotoksyczne. Wielomiejscowy ekstrakt metanolowy Pradosia zawiera kwas kumarowy jako główny składnik, a ekstrakt wykazuje działanie ochronne przed cytotoksycznością wywołaną promieniowaniem UVB i H2O{8}}. Ekstrakt ten hamował również ekspresję metaloproteinaz (MMP) i cyklooksygenazy (COX)-2 w komórkach HaCaT. Zmniejszenie ekspresji Sirt{10}} w warunkach potraktowanych UVB i H2O{13}} odzyskano w komórkach HaCaT za pomocą Pm-ME. Ekstrakt ten wykazywał znaczącą aktywność wychwytywania wolnych rodników zgodnie z testem soli diamonowej 2,20 -kasyno-bis(3-etylobenzotiazolino-6-kwasu sulfonowego) (ABTS). Pm-ME zwiększyło również poziom ekspresji syntazy kwasu hialuronowego (HAS) i transglutaminazy -1 (TGM -1) w komórkach HaCaT, co wskazuje na domniemane działanie nawilżające. Co ciekawe, stwierdzono, że ekspresja genu kolagenu typu 1 (Col1A1) i aktywność jego promotora, oceniane za pomocą testu genu reporterowego, są zwiększone w komórkach HDF i HEK293. Podobnie Pm-ME pomogło przywrócić poziom kolagenu po leczeniu UVB i H2O2 w HDF, a także zmniejszyło syntezę i wydzielanie melaniny z komórek czerniaka B16F10, co może wskazywać na korzystne wybielające wartości kosmetyczne. Inhibitor p38 SB203580 i inhibitor JNK SP600125 hamowały ekspresję MMP{35}} i COX-2 w komórkach HaCaT traktowanych H2O{38}}. Podobnie, inhibitor ERK U0126 hamował HAS-2 w komórkach HaCaT traktowanych Pm-ME/H2O{43}}. Odkrycia te sugerują, że hamowanie JNK i p38 oraz aktywacja ERK może być celem Pm-ME. Dlatego Pm-ME może wykazywać właściwości przeciw fotostarzeniu i melanogenezie poprzez regulację kinazy białkowej aktywowanej mitogenem, co może być korzystne w przemyśle kosmeceutycznym.

Według odpowiednich badań,cistanchejest wspólnezieleznane jako „cudowne zioło przedłużające życie”. Jego głównym składnikiem jestcistanozyd, który ma różne efekty, takie jakprzeciwutleniacz, przeciwzapalny, Ipromocja funkcji odpornościowych. Mechanizm między cistanche aWybielanie skórypolega na działaniu przeciwutleniającym glikozydów cistanche. Melanina w ludzkiej skórze jest wytwarzana przezutlenianietyrozyny katalizowanej przeztyrozynaza, a reakcja utleniania wymaga udziału tlenu, więc wolne rodniki tlenowe w organizmie stają się ważnym czynnikiem wpływającymmelaninaprodukcja. Cistanche zawiera cistanoside, który jest przeciwutleniaczem i może zmniejszać powstawaniewolne rodnikiw organizmie, hamując w ten sposób produkcję melaniny.

Kliknij Suplement Cistanche Tubulosa do wybielania

Zapytaj o więcej:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Wstęp

Skóra jest największym narządem w organizmie, który stanowi barierę między organizmem a środowiskiem, odpowiada za utrzymanie homeostazy skóry iw ostatecznym rozrachunku decyduje o przetrwaniu organizmu [1]. Skóra jest zorganizowana z naskórkiem, skórą właściwą ze strukturami przydatków i tłuszczem podskórnym [2]. Ponadto skóra jest ważna dla ciągłej komunikacji z układami odpornościowym, nerwowym i hormonalnym [3], głównie zapewnia ochronę przed patogenami, chemikaliami, urazami fizycznymi i promieniowaniem ultrafioletowym (UV) [4]. Widma ultrafioletowe dzielą się na trzy strefy: UVC (200 do 280 nm), UVB (280 do 320 nm) i UVA (320 do 400 nm) [5]. Spośród nich promieniowanie UVB jest pochłaniane głównie przez górne warstwy naskórka oraz warstwę brodawkowatą skóry właściwej, podczas gdy promieniowanie UVA przenika przez warstwę siatkowatą skóry właściwej z 1000-krotnie mniejszą skutecznością wywoływania różnych efektów biologicznych w porównaniu z promieniowaniem UVB [5]. Chociaż promieniowanie UVC jest bardzo reaktywne i pochłaniane przez warstwę rogową naskórka, jest w większości usuwane przez warstwę ozonową i atmosferę. Jako główne źródło promieniowania UV, UVB może prowadzić do produkcji reaktywnych form tlenu (ROS), takich jak nadtlenek wodoru (H2O2), poprzez aktywację enzymów wytwarzających ROS, w tym oksydazy NADPH, oksydazy ksantynowej i oksydazy D-aminokwasowej [6– 8] oraz indukcję fotostarzenia się skóry, co prowadzi do powstawania zmarszczek i wiotczenia skóry [9,10]. Ponadto doniesiono, że reakcja na stres oksydacyjny wywołuje uszkodzenia różnych składników komórkowych, takich jak lipidy błony komórkowej, białka i kwasy nukleinowe [11]. Te uszkodzone komórki skóry mogą inicjować reakcje zapalne prowadzące do ewentualnych uszkodzeń objawiających się w chronicznie narażonej skórze [12].

Stres oksydacyjny indukuje aktywację zapalnych i wrażliwych na reakcje redoks czynników transkrypcyjnych, czynnika jądrowego (NF)-κB i białka aktywatora (AP)-1 oraz ich poprzedzających je enzymów sygnalizacyjnych, w tym kinaz białkowych aktywowanych mitogenami (MAPK), takich jak kinazy zewnątrzkomórkowe kinazy regulowanej sygnałem (ERK), p38 i kinazy c-Jun-N-końcowej (JNK) w szlaku AP-1 lub jako inhibitor kinazy κB (IκB ), kinazy IκB (IKK / ) oraz AKT w szlaku NF-κB związany z indukcją stanu zapalnego i powstawania zmarszczek [13]. Kinaza regulowana sygnałem zewnątrzkomórkowym zwykle pośredniczy w odpowiedziach komórkowych związanych z czynnikami wzrostu, JNK i odpowiedziami komórkowymi, w których pośredniczy p38-, związanych z cytokinami i stresem fizycznym [14]. Kinazy białkowe aktywowane mitogenami mogą również indukować produkcję metaloproteinaz macierzy proteolitycznej (MMP) [15], które indukują degradację kolagenu, zmniejszając w ten sposób elastyczność skóry [16]. Jeśli chodzi o te składniki, przeciwutleniające składniki lub ekstrakty, takie jak ginsenozyd, kurkumina, epikatechina, azjatykozyd, zyuglikozyd I, magnolol, kwas galusowy, hydroksychawikol, kwasy hydroksycynamonowe, kwas glicyryzynowy, mangiferyna, Mirko, kwas rozmarynowy, tektorigenina, tyrozol, BIOGF1K i wodno-alkoholowy ekstrakt z naśladowców Spartium junceum L. wykorzystano do opracowania produktów przeciwdziałających starzeniu się skóry [17–21]. Ponieważ stres oksydacyjny jest znany jako główna przyczyna chorób człowieka i procesu starzenia, który wpływa na długowieczność, wtórne bioaktywne metabolity w diecie człowieka zawłaściwości antyoksydacyjnesą uważane za wartościowe składniki [22,23].

Inne geny związane z fotostarzeniem obejmują cyklooksygenazę -2 (COX{2}}) i Sirt{3}}. Cyklooksygenaza -2 jest zwykle nadeksprymowana w przednowotworowych zmianach skórnych wywołanych promieniowaniem UV [24], a jej zahamowanie może zmniejszyć transformację złośliwą w naskórku [25]. Ekspresja Sirt{8}} może zapobiegać apoptozie komórek i zwiększać przeżywalność komórek [26]. Innym mechanizmem ochrony przed promieniowaniem UVB jest produkcja melaniny, barwnika syntetyzowanego w melanocytach i dalej wydzielanego do keratynocytów w warstwie naskórka [1]. Melanina powstaje w wyniku utleniania L-tyrozyny i jej późniejszej konwersji do L-dihydroksyfenyloalaniny (L-DOPA) [6] poprzez katalizowanie zależnym od miedzi enzymem tyrozynazą [27]. Pomimo swojej funkcji ochronnej, nadmierna produkcja melaniny może powodować powstawanie plam starczych [28], melizmatów i przebarwień [29]. W związku z panującym trendem uznawania jasnej karnacji za standard piękna, preparaty wybielające, które pozwalają na wybielenie zmian przebarwionych lub rozjaśnienie skóry, stały się bardzo pożądane w przemyśle farmaceutycznym i kosmeceutycznym [29]. W związku z tym wiele wysiłku poświęcono opracowaniu preparatów zmniejszających syntezę melaniny [30]. Ponieważ starzenie się skóry wiąże się z utratą nawilżenia skóry, ważnym czynnikiem dla utrzymania zdrowej skóry jest odpowiednie nawilżenie [31]. Kwas hialuronowy (HA), glikozaminoglikan o dużej masie cząsteczkowej i właściwościach hydrofilowych, przyczynia się do nawilżenia i właściwości plastycznych skóry poprzez regulację ekspresji syntaz kwasu hialuronowego (HAS) [32]. Kolejnym ważnym genem w skórze jest kolagen, który stanowi wsparcie dla struktur naskórka [33], a więc odpowiada za wytrzymałość i sprężystość skóry [34], a jego degradacja prowadzi zarówno do wiotczenia, jak i powstawania zmarszczek. Ponadto transglutaminaza -1 (TGM-1) jest konstytutywnie wyrażanym w naskórku enzymem, który katalizuje tworzenie zrogowaciałej otoczki komórkowej naskórka, pomagając zapobiegać utracie wody [35,36].

Rodzina Sapotaceae występuje głównie w tropikalnych i subtropikalnych regionach Azji i Mezoameryki. Wiele gatunków rodziny Sapotaceae wytwarza jadalne owoce o dużej wartości ekonomicznej. Owoce te były wykorzystywane do celów leczniczych. W szczególności nasiona są bogate w składniki odżywcze, tłuszcze roślinne, białka i inne korzystne związki. Na przykład olej mamey był tradycyjnie stosowany w pielęgnacji skóry, w leczeniu oparzeń słonecznych i rumienia [37]. Muzyka Pradosia należy do rodziny Sapotaceae, której olejek był tradycyjnie używany do leczenia blizn skórnych [38]. Jednak jego właściwości nie zostały jeszcze naukowo udowodnione. Celem tych badań było zatem określenie potencjalnej wartości P. mutisii w pielęgnacji skóry, kosmetologii i farmakologii.

2. Wyniki

2.1. Charakterystyka Pm-ME i jej wpływ na żywotność komórek

Pm-ME nie blokował żywotności do 100 µg/mL, ale nieznacznie zmniejszał żywotność przy 200 µg/mL w komórkach HaCaT, B16F10 i ludzkich fibroblastach skóry właściwej (HDF), zgodnie z 3-(4,{{ 7}} dimetylotiazol-2- yl) -2, 5- bromek difenylotetrazoliowy (MTT) (ryc. 1a – c). Stosując ultrawysokociśnieniową chromatografię cieczową (UHPLC) i chromatografię cieczową (LC) / spektrometrię mas, stwierdzono, że głównym związkiem w Pm-ME jest kwas kumarowy po 4, 27 min (ryc. 1d).

2.2. Działanie ochronne Pm-ME przed uszkodzeniami UVB i H2O2

Aby określić, czy Pm-ME chroni komórki HaCaT przed uszkodzeniami powodowanymi przez fotostarzenie wywołane promieniowaniem UVB i H2O{3}}, komórki wstępnie potraktowano różnymi stężeniami Pm-ME (0–100 µg/ml) przed ekspozycją na UVB lub H2O2. Rycina 2a pokazuje, że napromieniowanie UVB zmniejszyło liczbę przylegających komórek HaCaT, podczas gdy Pm-ME zwiększyło przyleganie komórek. Ponadto uszkodzenie komórek wywołane przez H2O2 zostało odzyskane przez Pm-ME przy 100 µg / ml (ryc. 2b). Aby wyjaśnić, czy Pm-ME osłabia powstawanie zmarszczek, w których pośredniczy UVB i H2O{19}}, zmierzono poziomy ekspresji MMP-1 i MMP{21}} po traktowaniu UVB lub H2O2 w obecności lub przy braku Pm-ME. Pm-ME hamował ekspresję MMP-1 i MMP-9 w obu warunkach (ryc. 2c, d). Następnie zbadaliśmy, czy Pm-ME hamuje reakcje zapalne wywołane przez wolne rodniki, mierząc poziomy mRNA COX-2. W warunkach działania UVB lub H2O{34}} poziomy mRNA COX{35}} były silnie tłumione przez Pm-ME w stężeniu 100 µg/ml (ryc. 2e, f). Następnie zmierzyliśmy poziomy mRNA genu przeciwdziałającego starzeniu, Sirt{40}}, aby określić jego wpływ na fotostarzenie. Zarówno UVB, jak i H2O2 obniżyły ekspresję Sirt-1, podczas gdy Pm-ME znacząco przywrócił jej ekspresję przy 50 i 100 µg/ml (Rysunek 2g, h). Ponieważ Pm-ME tłumił pewne odpowiedzi molekularne i komórkowe w komórkach HaCaT traktowanych UVB lub H2O2, następnie zbadaliśmy, czy ten ekstrakt ma bezpośrednie działanie przeciwutleniające przy użyciu 2,2′-casino-bis (3-etylobenzotiazoliny{{57 }}kwas sulfonowy) test ABTS, w którym Pm-ME wykazał zależną od dawki aktywność wychwytywania wolnych rodników (Figura 2i).

2.3. Nawilżające i wzmacniające kolagen działanie Pm-ME

Pm-ME wzmocnił ekspresję genów związanych z nawilżaniem, takich jak HAS-2 i TGM-1 w komórkach HaCaT (ryc. 3a). Aby określić, czy Pm-ME może zwiększyć ekspresję genu kolagenu (Col1A1), najpierw potraktowaliśmy komórki HDF Pm-ME (0–100 µg/ml), a następnie określiliśmy poziom ekspresji Col1A1. Jak pokazuje Figura 3b, zaobserwowano zależną od dawki zwiększoną ekspresję genu Col1A1 w warunkach traktowania Pm-ME. Wyniki te zostały dalej potwierdzone przy użyciu testu genu reporterowego z konstruktem Col1A{19}}Luc transfekowanym w komórkach HEK293 i komórkach HDF. Oczekiwano, że Pm-ME zwiększał aktywność promotora genu Col1A1 w sposób zależny od dawki w obu komórkach (ryc. 3c, d). Ponadto stwierdzono, że Pm-ME odzyskuje poziomy genów kolagenu, które zmniejszyły się zarówno w warunkach naświetlania UV, jak i traktowania H2O2 (ryc. 3e, f).

2.4. Antymelanogenne działanie Pm-ME

Ponieważ nasze docelowe stężenie odpowiadało 100 µg/mL, ustaliliśmy, czy Pm-ME jest w stanie zahamować wydzielanie melaniny i jej zawartości komórkowej. Aby to ustalić, komórki czerniaka B16F10 stymulowano hormonem stymulującym melanocyty (-MSH) w obecności lub nieobecności Pm-ME lub arbutyny (kontrola pozytywna). Następnie zmierzono poziomy melaniny. Pm-ME zmniejszył wydzielanie melaniny do 75 procent przy 100 µg/ml (ryc. 4a, b). Pm-ME zmniejszył również zawartość melaniny w komórkach B16F10 traktowanych MSH do 30 procent przy 100 µg/ml, podczas gdy zawartość melaniny przy 50 µg/ml nie była znacząco zmniejszona w porównaniu z kontrolą pozytywną (-MSH) (Rysunek 4c) . Na koniec, aby określić wpływ Pm-ME na aktywność enzymów wytwarzających melaninę, przeprowadziliśmy test enzymatyczny tyrozynazy. Co ciekawe, Pm-ME (0–400 µg / ml) znacznie zmniejszał aktywność tyrozynazy przy stężeniach wyższych niż 200 µg / ml, podczas gdy kwas kojowy (KA), kontrolowany lek, silnie zmniejszał aktywność tyrozynazy (ryc. 4d).

2.5. Mechanizmy molekularne efektów przeciwdziałających fotostarzeniu i nawilżających, w których pośredniczy Pm-ME

3. Dyskusja

Ze względu na bogactwo składników odżywczych i witamin różne gatunki z rodziny Sapotaceae znalazły zastosowanie w medycynie tradycyjnej [39]. Jednak potencjalne zastosowanie P. mutisii w przemyśle kosmetycznym i farmaceutycznym nie zostało jeszcze zbadane. Z tego powodu zbadaliśmy aktywność ochronną skóry P. mutisii w keratynocytach i fibroblastach w warunkach uszkadzających skórę. Oceniliśmy również jego przydatność do preparatów kosmetycznych. Ponieważ badanie toksyczności w celu zidentyfikowania potencjalnych zagrożeń u ludzi jest niezbędnym i krytycznym krokiem zarówno w przemyśle farmaceutycznym, jak i kosmetycznym [40], cytotoksyczność P. mutisii zbadano w komórkach HaCaT, B16F10 i HDF. Pradosia mutisii wykazywał niską toksyczność do 200 µg/ml i brak toksyczności przy 100 µg/ml w komórkach HaCaT, B16F10 (ryc. 1a, b) i HDF (ryc. 3c). Wykorzystując analizę UHPLC/MS (Rysunek 1c), wykazano, że Pm-ME ma wysokie stężenie kwasu kumarowego, kwasu fenolowego [41,42]. Polifenole są wtórnymi metabolitami roślin i generalnie biorą udział w obronie przed promieniowaniem UV lub infekcją patogenami. Wykazano, że w organizmie człowieka polifenole chronią przed rozwojem nowotworów, chorób układu krążenia, cukrzycy, osteoporozy i chorób neurodegeneracyjnych [1]. Wykazano, że kwas kumarowy ma właściwości przeciwutleniające i przeciwzapalne [43].

Promieniowanie ultrafioletowe jest jedną z głównych przyczyn produkcji wolnych rodników (np. ROS) w skórze. Wolne rodniki mogą prowadzić do starzenia się skóry i raka, jeśli gromadzą się przez długi czas [44]. Wiadomo, że stres oksydacyjny i uszkodzenia wywołane przez wolne rodniki mogą zagrozić przeżywalności, proliferacji, różnicowaniu i metabolizmowi komórek [45,46]. Zgodnie z wcześniejszymi doniesieniami [47,48] stwierdziliśmy również, że uszkodzenie komórek wywołane promieniowaniem UVB w komórkach HaCaT. Uszkodzenia obejmowały zmniejszoną proliferację, zwiększoną apoptozę i odpowiedzi molekularne, w tym ekspresję genów związanych ze stanem zapalnym, tworzeniem zmarszczek i starzeniem (ryc. 2 i 3). Ponieważ rodniki indukowane promieniowaniem UVB są głównymi czynnikami uszkadzającymi komórki, tkanki i narządy, stwierdzono, że niektóre związki endogenne, takie jak melatonina i jej metabolit [49-52] oraz bilirubina [53], biorą udział w wychwytywaniu toksycznych rodników, wykazując działanie antyoksydacyjne. , fotoochronne i przeciwstarzeniowe w naszym organizmie. Dotychczas związki te rozwijane są również jako bardzo wartościowe biomateriały, które mogą być stosowane w naszym organizmie przez przemysł farmaceutyczny [54]. Niemniej jednak witamina C, koenzym Q10 i -tokoferol stają się czołowymi produktami sprzedaży na świecie dla zdrowia ludzi ze względu na ich znaczące właściwości przeciwutleniające. Laboratoria badawcze firm farmaceutycznych i kosmetycznych nadal kładą duży nacisk na identyfikowanie i opracowywanie skutecznych leków przeciwutleniających i związków naturalnych. W naszym badaniu zaobserwowaliśmy, że Pm-ME ma silną aktywność przeciwutleniającą podczas testowania za pomocą testu ABTS (ryc. 2i). Podobnie, Pm-ME odwrócił indukowaną przez wolne rodniki supresję przylegania komórek, indukcję uszkodzenia jądra i zmienioną ekspresję genów, takich jak MMP-1, MMP-9 i COX{{27} } w warunkach UVB i H2O2 w sposób zależny od dawki (ryc. 2a – f). Warto zauważyć, że Pm-ME przywrócił poziomy genu Sirt-1 (ryc. 2g,h), który bierze udział w zapobieganiu apoptozie i zwiększaniu przeżywalności komórek w warunkach stresu oksydacyjnego [26]. Wyniki te silnie sugerują, że starzenie się komórek było związane ze stresem oksydacyjnym poprzez obniżenie ekspresji Sirt1. Właściwości przeciwutleniające Pm-ME pozwoliły na przywrócenie ekspresji Sirt1. Może to skutkować ochroną skóry przed uszkodzeniem i starzeniem się w naturalnych warunkach promieniowania UVB in vivo. Ponadto istnieje możliwość, że Pm-ME jest również w stanie chronić odpowiedzi komórkowe indukowane przez UVC, ponieważ nasze warunki naświetlania UV mogą być zanieczyszczone UVC, chociaż zastosowaliśmy system filtrów, aby usunąć wszystkie długości fal poniżej 290 nm. Koncepcja, że ​​biomateriały przeciwutleniające mogą łagodzić uszkodzenia komórkowe i molekularne w warunkach stresu oksydacyjnego, napędzała komercyjną produkcję różnych produktów, takich jak BIOGF1K, ginsenozyd Ro, EGCG, ekstrakt Fraxinus chinensis i niektóre syntetyczne przeciwutleniacze. Przeciwzmarszczkowe i przeciwfotostarzeniowe działanie biomateriałów w tych i innych produktach zostało szeroko opisane w przemyśle kosmetycznym [48,55,56].

Utrzymanie odpowiedniego nawilżenia skóry [31] i wytwarzanie nowego kolagenu [57] to ważne procesy dla zdrowej skóry. Ekspresja genów nawilżających (HAS2, TGM -1) (ryc. 3a) i kolagenu (Col1A1) została znacznie zwiększona przez Pm-ME (ryc. 3b – d) i pomogła odzyskać poziom kolagenu po ekspozycji na promieniowanie UVB i leczeniu H2O2 (Rysunek 3e, f). Sugeruje to zatem, że Pm-ME może być skutecznym składnikiem w utrzymaniu zdrowej skóry. Supresja melaniny przez Pm-ME jest również korzystna dla jej zastosowania w preparatach kosmetycznych. Chociaż melanina jest cenna w ochronie skóry przed promieniowaniem UV, ponieważ wiele kobiet woli rozjaśniać skórę, wybielanie poprzez działanie antymelanogenne jest przydatną cechą materiałów kosmetycznych [29]. Pm-ME (100 µg / ml) wykazywał silną aktywność hamującą podczas melanogenezy, co oceniono przez określenie poziomów melaniny z wydzielanej pożywki i zmniejszenie wykazanego poziomu wydzielania melaniny (ryc. 4a – c). Ponadto Pm-ME (200 µg/ml) znacząco hamowało aktywność enzymu tyrozynazy (Figura 4d), co sugeruje, że wyższe stężenie jest bezpośrednio skuteczne w hamowaniu aktywności enzymu, podczas gdy niższe stężenie bierze udział w regulacji wydzielania melaniny. Dlatego też, ze względu na swoje działanie przeciwutleniające, przeciw fotostarzeniu, przeciwzmarszczkowe, nawilżające i antymelanogenne, Pm-ME można uznać za dobrego kandydata na kosmeceutyk. Aby dokładniej zbadać tę możliwość, planujemy ocenić jej skuteczność kliniczną w przyszłych badaniach.

Przeprowadziliśmy badania w celu określenia mechanizmów molekularnych, dzięki którym Pm-ME wywiera swoje działanie przeciwutleniające i nawilżające w keratynocytach. Skupiliśmy się na enzymach związanych z MAPK (ERK, JNK i p38), ponieważ enzymy te odgrywają kluczową rolę w starzeniu się i melanogenezie keratynocytów i melanocytów skóry [58,59]. Na przykład szlak ERK pośredniczy w odpowiedziach komórkowych na transformujący czynnik wzrostu- 1 poprzez zwiększenie szlaków syntezy kolagenu [60] i HA w keratynocytach [61]. JNK odgrywa kluczową rolę w apoptozie keratynocytów wywołanej stresem oksydacyjnym [62]. Enzym p38 jest ważny w utrzymaniu homeostazy ludzkiej skóry [63]. Szlaki JNK i p38 pośredniczą w odpowiedziach komórkowych na cytokiny i stres fizyczny [14]. Szlaki te są aktywowane przez stres wywołany przez UVB i ROS. Szlaki te mogą zwiększać produkcję genów proteolitycznych MMP i COX-2 [15], które są związane odpowiednio z degradacją kolagenu i stanem zapalnym skóry [64]. Warto zauważyć, że stres oksydacyjny blokował fosforylację ERK, podczas gdy p38 i JNK były fosforylowane po potraktowaniu H2O2 (ryc. 5a). W przeciwieństwie do tego, Pm-ME zwiększył fosforylację ERK i zmniejszył fosforylację p38 i JNK (ryc. 5a), co sugeruje, że enzymy te mogą w różny sposób uczestniczyć w działaniach farmakologicznych, w których pośredniczy Pm-ME. Aby dokładniej zrozumieć funkcjonalną rolę MAPK w przeciwdziałaniu fotostarzeniu, melanogennym i przeciwzapalnym działaniu Pm-ME w keratynocytach napromieniowanych UVB i stymulowanych H2O{36}}, zastosowano specyficzne inhibitory MAPK. Wyniki z ryciny 5b silnie sugerują, że hamowanie p38 i JNK przez Pm-ME skutkowało działaniem przeciwzmarszczkowym i przeciwzapalnym, ponieważ inhibitor p38 (SB203580) i inhibitor JNK (SP600125) blokowały ekspresję MMP {{45 }} i COX{46}} odpowiednio. Co więcej, fosforylacja ERK wyzwalana przez Pm-ME indukowała ekspresję genów związanych z nawilżaniem, ponieważ traktowanie Pm-ME wyzwalało ekspresję HAS -2, podczas gdy U0126 ją tłumiło (ryc. 5c). Wyniki te sugerują, że enzymy związane z MAPK przyczyniły się do działania przeciwstarzeniowego, przeciwzmarszczkowego i przeciwzapalnego, w którym pośredniczy PM-ME. Wiadomo, że promieniowanie UVB zwiększa inne kaskady sygnalizacyjne, takie jak te związane z NF-κB i STAT3 [65,66]. Nadal należy zbadać, czy Pm-ME może regulować te szlaki sygnałowe.

Podsumowując, stwierdziliśmy, że bogaty w kwas kumarowy Pm-ME wykazywał działanie przeciwutleniające, przeciwzmarszczkowe, stymulujące nawilżanie i przeciw melanogenne w komórkach skóry napromieniowanych promieniowaniem UVB lub poddanych działaniu H2O2. Pm-ME zwiększał fosforylację ERK w sposób zależny od dawki, ale zmniejszał fosforylację p38 i JNK (ryc. 6). Nasze wyniki zdecydowanie sugerują, że Pm-ME może być skutecznym biomateriałem chroniącym skórę. Ponieważ Pm-ME wykazywał bardzo obiecujące działanie zarówno w komórkach nowotworowych skóry (komórki HaCaT i B16F10), jak iw normalnych ludzkich keratynocytach w warunkach stresu oksydacyjnego, proponujemy korzystne role zastosowania Pm-ME w preparatach kosmetycznych. Jednak komórki czerniaka mają nieprawidłowe cechy, takie jak zakłócona kontrola cyklu komórkowego, nieprawidłowe wzorce ekspresji genów i ograniczone zdolności różnicowania [67], a ponadto należy wykonać dodatkową pracę z pierwotnymi melanocytami, aby dokładnie zrozumieć działanie przeciwmelanogenne Pm-ME i jego mechanizm molekularny. Ponadto badane będą rośliny z tej samej rodziny (Sapotaceae) lub rodzaju (Pradosia spp.) pod kątem podobnych działań ochronnych dla skóry.

Zapytaj o więcej: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501