Przeciwnowotworowe i przeciwzapalne działanie oligosacharydów z ekstraktu z Cistanche Deserticola na uraz rdzenia kręgowego

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Hong Zhang i inni

Abstrakcyjny

W niniejszym badaniu farmakologiczne działanie oligosacharydów zCistanchedeserticolawyciągna zapalenie, stres oksydacyjny i apoptozę u samców szczurów albinosów z uszkodzeniem rdzenia kręgowego. Peroksydacja lipidów, GSH, katalaza, dysmutaza ponadtlenkowa, esteraza acetylocholinowa, GPx, ROS i kwas azotowy były znacząco zmienione u szczurów z uszkodzeniem rdzenia kręgowego. Poziomy ekspresji mRNA IL-6, TNF-, cyklooksygenazy-2, iNOS,p53, kaspazy-3, Bax i pro-NGF zostały obniżone o N20 procent po suplementacji ekstraktem. Poziomy ekspresji kaspazy-3 i pro-NGF również uległy obniżeniu o N20 procent. Liczba komórek dodatnich pod względem p53 wynosiła odpowiednio 1, 79, 54, 33 i 19 w grupach GI-GV, a odpowiednia liczba komórek dodatnich pod względem kaspazy-3 wynosiła 2, 87, 51, 23 i 14. W oparciu o obecne wyniki, zastosowanie oligosacharydów zCistanchedeserticolaekstrakt był skuteczny przeciwkozapalenie, stres oksydacyjny i apoptoza u samców albinosów po urazie rdzenia kręgowego.

Słowa kluczowe:Cistanche deserticola, Zapalenie Stres oksydacyjny, Apoptoza Szczury

1. Wstęp

Uraz rdzenia kręgowego obejmuje uszkodzenie rdzenia kręgowego, które prowadzi do zmian funkcjonalnych z utratą czucia, mięśni i funkcji autonomicznych [1]. Ponadto może dojść do indukcji apoptozy w oligodendrocytach i neuronach, co prowadzi do dysfunkcji rdzenia kręgowego na skutek demielinizacji i zwyrodnienia aksonów [2,3]. Uraz rdzenia kręgowego wywołuje znaczny stres oksydacyjny izapaleniepo wystąpieniu apoptozy w oligodendrocytach i neuronach [2,4]. Reaktywne formy tlenu (ROS) i cytokiny prozapalne są uwalniane podczas neurodegeneracji, a mikroglej jest niezbędny w procesach neurodegeneracyjnych i zapalnych [5–7]. Interleukiny (IL) są ważnymi cytokinami zaangażowanymi w różne procesy immunologiczne [8]. Yune i wsp. [9] donoszą, że uwalniany z mikrogleju pro-nerwowy czynnik wzrostu (pro-NGF) prowadzi do apoptotycznej śmierci komórek. Dlatego nowe i silne środki terapeutyczne przeciwko stresowi oksydacyjnemu izapaleniesą potrzebne.

RoślinaCistanchedeserticolajest powszechnie znany jako pustynna miotła i jest holopasożytniczym członkiem rodziny Orobanchaceae [10].Cistanche deserticolanie ma chlorofilu i pozyskuje wodę i składniki odżywcze w sposób pasożytniczy z saksolina białego (Haloxylon persicum) i saksoła czarnego (Haloxylon ammodendron). TheCistanchedeserticolaroślina wieloletnia, znana jako Rou Cong Rong, może osiągnąć rozmiar 160 cm i ma jasnożółte kwiaty. Powszechnie występuje w Chinach i Mongolii [11], a tradycyjna medycyna chińska jest doskonałym źródłem leczenia wielu chorób. Służy również jako podstawowa kuracja ziołowa, która ożywia Yang i tonizuje nerki [11]. Koo i in. [12] poinformował, że glikozydyCistanchedeserticoladziałają jako substancje skuteczne w ośrodkowym układzie nerwowym (OUN). Kilku badaczy zgłosiło właściwości przeciwapoptotyczne, przeciwzapalne i przeciwutleniająceCistanchedeserticola[13,14]. Antyoksydanty pochodzące z żywności i cząsteczki przeciwzapalne mogą służyć jako substancje chemoprewencyjne w chorobach przewlekłych [15]. Biorąc pod uwagę wyżej wymienione korzyści terapeutyczne, skuteczność terapeutyczna oligosacharydów z:Cistanchedeserticolaekstrakt przeciwzapalenie, stres oksydacyjny i apoptozę badano w niniejszym badaniu przy użyciu modelu szczura albinosa z uszkodzeniem rdzenia kręgowego.

2. Materiały i metody

2.1. Materiały

Startery czynnika martwicy nowotworu alfa (TNF- ), IL-6, cyklooksygenaza, indukowana syntaza tlenku azotu (iNOS), p53, Bax, kaspaza-3, BCL-2,pro-NGF i dehydrogenazę 3-fosforanu aldehydu glicerynowego (GAPDH) zakupiono od Thermo Fisher Scientific (Pekin, Chiny). Pierwotne przeciwciała przeciwko kaspazie-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), przeciwciała monoklonalne przeciwko kozie/owczej IgG–peroksydazie (A9452) i izotiocyjanian fluoresceiny przeciwko mysim IgG (FITC; F{{15}) }ML) zakupiono od Sigma-Aldrich China, Inc. (Szanghaj, PR Chiny).

2.2. Szczury

Samce szczurów rasy albinos Wistar (180-220 g) zakupiono z hodowli zwierząt w szpitalu West China Hospital, Sichuan University, Chiny. Szczurom dostarczano pożywienie i wodę ad libitum. Cykl 12-h światła:12-h ciemności utrzymywano w polipropylenowych klatkach szczurów w warunkach wilgotności względnej. Wszystkie eksperymenty na szczurach zostały zatwierdzone przez komisję etyczną Szpitala WestChina na Uniwersytecie Sichuan w Chinach. Przestrzegano wszystkich obowiązujących międzynarodowych, krajowych i instytucjonalnych wytycznych dotyczących opieki i wykorzystywania zwierząt.

2.3. Indukcja urazu rdzenia kręgowego

Uszkodzenie rdzenia kręgowego zostało wywołane przez podłużne nacięcie chirurgiczne po ekspozycji na halotan (1,5%). Cały zabieg chirurgiczny przeprowadzono w temperaturze pokojowej. Nacięcie wykonano od dolnego do środkowego kręgu piersiowego z tyłu zwierzęcia. Obciążnik 20–25 g umieszczano na odsłoniętej powierzchni Th12 na 30 minut w celu wywołania urazu. Skórę i mięśnie zszywano po odciążeniu powierzchni Th12 i indukowano czasowe, powtarzalne paraliż kończyn dolnych [16,17]. Szczury trzymano przez 24 godziny w odpowiednich warunkach i pod kontrolą weterynaryjną.

2.4. Przygotowanie ekstraktu z Cistanche deserticola i analiza ilościowa

RoślinaCistanchedeserticola(1 kg) zebrano z Gansuprovince w Chinach, suszono na powietrzu i sproszkowano za pomocą młynka elektrycznego. Proszek ekstrahowano w etanolu (70 procent) przez 60 min, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Koncentrat suszono próżniowo na proszek [18]. Analiza ilościowaCistanchedeserticolaekstrakt wykonano metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC), jak opisano wcześniej [11].

2.5. Leczenie

Grupy eksperymentalne były następujące: grupa I (GI), normalne szczury kontrolne; grupa II (GII), szczury z uszkodzeniem rdzenia kręgowego (kontrole pozorowane); i grupy III–V (GIII–V), szczury z uszkodzeniem rdzenia kręgowego otrzymujące 100, 200 lub 400 mg/kg oligosacharydów zCistanchedeserticolaekstrakt, odpowiednio. Każda grupa zawierała sześć szczurów iCistanchedeserticolaekstrakt podawano szczurom doustnie przez 6 kolejnych tygodni.

2.6. Pobieranie krwi

Pod koniec leczenia pobierano krew (5–6 ml) strzykawką o pojemności 5 ml z igłą 23G1 przez nakłucie serca, a szczury znieczulano chlorowodorkiem ketaminy (100 mg/kg masy ciała) i ksylazyną (10 mg/kg ciała). wagi) i uśmiercane przez dekapitację.

2.7. Przygotowanie homogenatu tkankowego

Pod koniec leczenia szczury znieczulono chlorowodorkiem ketaminy (100 mg/kg masy ciała) i ksylazyną (10 mg/kg masy ciała) i uśmiercono przez dekapitację. Z operowanego obszaru pobrano próbki rdzenia kręgowego (12 mm). Tkanki rdzenia kręgowego pocięto na małe kawałki i homogenizowano w buforze Tris-HCl (pH 7,4, 50 mM) przy 6000 rpm przez 5 min. Homogenat odwirowano i supernatant zebrano do dalszych eksperymentów. Wszystkie preparaty homogenatów i supernatantów przeprowadzono w 4 stopniach.

2.8. Biomarkery stresu oksydacyjnego

Peroksydację lipidów określono na podstawie zawartości dialdehydu malonowego (MDA) przez pomiar reaktywnych form kwasu tiobarbiturowego (TBARS). Produkt końcowy zmierzono przy 534 nm [19]. ROS oznaczano za pomocą testu dichlorofluoresceinowego [20]. Zredukowaną zawartość glutationu (GSH) oznaczono mierząc produkt końcowy przy 405 nm [21]. Za pomocą spektrofotometrii mierzono aktywność enzymów dysmutazy ponadtlenkowej (SOD), peroksydazy glutationowej (Gpx), katalazy i acetylocholinesterazy (AChE) [19].

2.9. Markery zapalne

We wszystkich grupach oznaczono poziomy TNF- i IL-6 w surowicy [22]. Zawartość azotynu mierzono jako wskaźnik poziomu tlenku azotu (NO) i wyrażono w mM [23,24]. Poziomy ekspresji mRNA TNF-, IL-6, iNOS, cyklooksygenazy-2 i GAPDH określono według Moona i in. [25]. Startery użyte w tym badaniu przedstawiono w Tabeli 1.

2.10. Biomarkery apoptozy

Poziomy ekspresji mRNA kaspazy-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF i GAPDH określono według Moona i in. [25]. Poziomy ekspresji białka kaspazy-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF i GAPDH określono według Lobos et al. [26]. Barwienie TUNEL kaspazy -3 i p53 przeprowadzono w skrawkach neuronalnych [25]. Startery stosowane do RT-PCR podano w Tabeli 1.

2.11. Analizy statystyczne

Wartości przedstawiono jako średnie z błędem standardowym średniej (SEM). Kontrola iCistanchedeserticolagrupy traktowane ekstraktem zostały porównane przy użyciu niesparowanego testu t-Studenta. Do porównań wielokrotnych zastosowano jednokierunkową analizę wariancji (ANOVA). Uznano, że wartości P ˂0,05 wskazują na istotność statystyczną.

3. Wyniki

W niniejszym badaniu skuteczność terapeutyczna oligosacharydów zCistanche deserticolaekstrakt przeciwzapalenie, utleniającystresi apoptozę w urazach rdzenia kręgowego samców szczurów albinosów.Cistanche deserticolaekstrakt (ryc. 1). Zawartość MDA, mierzona jako produkt końcowy peroksydacji lipidów, wynosiła 22,58 nmol/g u zdrowych szczurów kontrolnych (GI) i drastycznie wzrosła o 179,5% u szczurów kontrolnych pozorowanych (GII). Leczenie szczurów oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakt znacząco obniżył zawartość MDA o 50,1 procent w grupie GV (tabela 2, Pb 0,05). Zawartość GSH wynosiła 85,31 mg/g w grupie GI i drastycznie spadła o 61,1 procent w grupie GII. Leczenie zCistanchedeserticolaEkstrakt u szczurów z uszkodzeniem rdzenia kręgowego znacząco zwiększył zawartość GSH o 121,6 procent w grupie GV (Tabela 2, Pb0.05).

Aktywność SOD wynosiła 6,2 U/mg w grupie GI i była znacznie zmniejszona o 51,1 procent w grupie GII. Szczury z uszkodzeniem rdzenia kręgowego suplementowane oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakt wykazał znacznie zwiększoną aktywność SOD, o 91,4% w grupie GV (tabela 2, Pb0.05). Aktywność katalazy wynosiła 12,8 U/g w grupie GI i była znacznie zmniejszona o 59,3 procent w grupie GII. Szczury z uszkodzeniem rdzenia kręgowego uzupełnione oligosacharydami zCistanche deserticolaekstrakt wykazał znacznie zwiększoną aktywność katalazy, o 106,1% w grupie GV (Tabela 2, Pb 0.05). Aktywność GPx wynosiła 0,87 (mg/białko) w grupie GI i zmniejszyła się o 55,2% w grupie GII. Aktywność GPx wzrosła o 100% w grupie GV (Tabela 2, Pb 0,05). Aktywność AChE wynosiła 9,3 (μmol/min/mg białka) w grupie GI i zmniejszyła się o 54,8% w grupie GII. Szczury z uszkodzeniem rdzenia kręgowego uzupełnione oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakt wykazał znacząco zwiększoną aktywność AChE, o 26,2, 57,1 i 107,1% odpowiednio w grupach GIII, GIV i GV (Tabela 2, Pb 0,05).

ROS zmierzono i wyrażono we względnych jednostkach fluorescencji (RFU): wewnątrzkomórkowy ROS wynosił 44,23 w grupie GI, który wzrósł o 349 procent w grupie GII. Suplementacja oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakty znacząco zmniejszały wewnątrzkomórkowe poziomy ROS o 61,9% w grupie GV (ryc. 2A, Pb 0.05). Zawartość azotynu zmierzono jako wskaźnik poziomu NO i wyrażono w mM. Poziom NO wynosił 3,7 (mM) w grupie GI, a w grupie GI wzrósł o 349 procent. Suplementacja oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakt znacząco obniżył poziom NO o 63,6 procent w grupie GV (ryc. 2B, Pb 0.05).

Mierzono poziomy IL-6 i TNF i wyrażano je jako pg/mg białka. Poziomy IL-6 i TNF znacznie wzrosły, odpowiednio o 912,7 i 695,4% w grupie GII. Natomiast suplementacja oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakt znacząco obniżył poziom IL{{0}} i TNF o N60 procent w grupie GI w porównaniu z grupą GII (ryc. 3, Pb 0).{{16 }}5). Ekspresja mRNA markerów stanu zapalnego, takich jak IL-6, TNF-, cyklooksygenaza-2 i iNOS, została określona ilościowo i wyrażona jako krotność zmian. Poziomy ekspresji mRNA IL 6, TNF-, cyklooksygenazy-2 i iNOS wzrosły o 0.72-, 0.81-,0.54- i odpowiednio 0.67-krotnie w grupie GII. Suplementacja zCistanchedeserticolaekstrakt zmniejszył poziom ekspresji mRNA IL{{0}}, TNF-, cyklooksygenazy-2 i iNOS o N20 procent w grupie GV w porównaniu z grupą GII (ryc. 4, Pb 0,05).

Określono również ekspresję mRNA markerów apoptotycznych kaspazy {{0}}, p53,bcl-2, bax i pro-NGF. Poziomy ekspresji mRNA p53, kaspazy-3, bax i pro-NGF wzrosły o 0.97-,1.{{10}}, 1.{ {12}} i 0.76-krotnie w grupie GII odpowiednio, a poziom ekspresji mRNA bcl-2 został zmniejszony 0.67-krotnie . Traktowanie ekstraktem znacznie zmniejszyło poziomy ekspresji mRNA p53, kaspazy-3, bax i pro-NGF o N30 procent, podczas gdy poziom ekspresji mRNA bcl-2 wzrósł o 178 procent (Ryc. 5, Pb 0,05). W oparciu o analizę Western blotanalysis, poziomy kaspazy-3 i białka pro-NGF były znacząco zwiększone, odpowiednio 0.95-krotnie i 0.68-krotnie w grupie GII.Suplementacja oligosacharydami zCistanchedeserticolaekstrakt znacząco obniżył poziomy ekspresji kaspazy{{0}} i białka pro-NGF o N20 procent w grupie GI w porównaniu z grupą GII (ryc. 6, Pb 0,05). Test barwienia TUNEL zastosowano do wykrycia liczby komórek p53- i kaspazy-3-dodatnich. Liczba p53-komórek dodatnich wynosiła odpowiednio 1, 79, 54, 33 i 19 w grupach GI–GV. Liczba komórek dodatnich pod względem kaspazy-3- wynosiła odpowiednio 2, 87, 51, 23 i 14 w grupach GI–GV (ryc. 7–8, Pb 0,05).

4. Dyskusja

W niniejszym badaniu skuteczność terapeutyczna oligosacharydów zCistanchedeserticolaekstrakt przeciwzapalenie, stres oksydacyjny i apoptozę u samców szczurów albinosów po urazie rdzenia kręgowego. Liuet al. [27] stwierdzili, że suplementacja przeciwutleniaczem może być skuteczna przeciwko kilku chorobom neurodegeneracyjnym. Obecność echinakozydu (glikozydu fenyloetanoidowego) zgłoszono wCistanchedeserticolaekstrakt [10], a kilku badaczy wykazało właściwości przeciwzapalne i antynocyceptywneCistanche deserticola[28,29]. W niniejszym badaniu zaobserwowano, że głównymi składnikami ekstraktu z Cistanche deserticola są oligosacharydy, akteozyd, echinakozyd i kwas 8-epiloganowy.

W komórkach neuronalnych SH-SY5Y po ​​leczeniu echinakozydem zaobserwowano defekty behawioralne i apoptozę poprawione TNF [30, 31]. Nan i in. [32] donieśli o obniżeniu poziomów TNF-, T-tau i IL-1 u pacjentów z chorobą Alzheimera oraz poprawie powrotu atrofii hipokampa i zdolności poznawczych po suplementacji Cistanche herba. Efekty terapeutyczneCistanchedeserticolaekstrakt nazapalenie, stres oksydacyjny i apoptozy nie były wcześniej zgłaszane. Jest to pierwszy raport na temat farmakologicznych skutkówCistanchedeserticolaekstrakt w modelu urazu rdzenia kręgowego szczura.

Kilku badaczy poinformowało, że leczenie akteozydami znacznie zmniejszyło stres oksydacyjny i jelitowyzapaleniemyszy wywołane nieswoistymi zapaleniami jelit [33]. Nam i in. [34] donieśli, że przeciwzapalne działanie izoakteozydu z Abeliophyllum disticchum w ludzkich komórkach tucznych. W modelu myszy opisano przeciwzapalne glikozydy fenylopropanoidowe z liści Clerodendron trichotomum [35]. Zhou i in. [36] donieśli, że przeciwzapalne działanie oligosacharydów w komórkach makrofagów RAW 264,7. Donoszono o monomerach oligosacharydów do hamowaniazapaleniew makrofagach stymulowanych LPS poprzez supresję szlaków MAPK i NF-κB [37].

Fahnestock i in. [38] donieśli, że pro-NGF jest formą dominującą w mózgu i jest podwyższony u pacjentów z chorobą Alzheimera. Kilka ciętych białek, oprócz pro-NGF, aktywuje antyapoptotyczne odpowiedzi komórkowe [39]. Stosunek między dojrzałym NGF- i pro-NGF odgrywa kluczową rolę w równoważeniu przeżycia komórek i śmiertelności [40]. Ke Zhang i in. [18] donosili o zmniejszonej formacji guza i dłuższej żywotności myszy z suplementacjąCistanchedeserticolawyciąg. Neuroprotekcyjne działanieCistanchedeserticolaEkstrakt na uszkodzenia wywołane neurotoksyną zostały wcześniej opisane [41]. Xuan i Liu i in. [42] zgłosili poprawę funkcji odpornościowej, pamięci, uczenia się i antyoksydacji u myszy uzupełnionychCistanchedeserticolawyciąg. Suplementacja ekstraktem z Cistanche deserticola obniżyła poziom MDA i podwyższony poziom GPx i SOD w szczurzym modelu niedokrwienno-reperfuzyjnym. Ponadto zaobserwowano obniżenie poziomu kaspazy-3, przy jednoczesnym wzroście stosunku bax/BCL-2 [43], co jest zgodne z naszymi ustaleniami wykazującymi obniżony poziom markerów oksydacyjnych, zapalnych i apoptotycznych w rdzeniu kręgowym. szczury po urazach rdzenia uzupełnioneCistanchedeserticolawyciąg.

5. Wniosek

Podsumowując, analiza ilościowa wykazała obecność oligosacharydów, akteozydu, echinakozydu i kwasu 8-epiloganowego wCistanchedeserticolawyciąg.Zapalenie, stres oksydacyjny i markery apoptozy były znacznie zmniejszone u szczurów z uszkodzeniem rdzenia kręgowego, którym podawano oligosacharydy z ekstraktu z Cistanche deserticola.

Ograniczenia badania

To badanie, chociaż ujawnia działanie przeciwnowotworowe i przeciwzapalne,Cistanchedeserticolaekstrakt ma pewne ograniczenia. Zwróciliśmy uwagę na ostry efektCistanchedeserticolaekstrakt na guzie izapaleniew urazie rdzenia kręgowego.

Finansowanie

Badanie to jest wspierane przez Chińską Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych (nr grantu 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219), Departament Nauki i Technologii Prowincji Syczuan (nr 2015HH004) Projekt Badań Naukowych Komisji Zdrowia i Planowania Rodziny prowincji Sichuan (nr 100097).

Konkurujące interesy

Wszyscy autorzy deklarują brak sprzecznych interesów.

Wkład autorów

Hong Zhang, Zhou Xiang, Xin Duan i Juan li Jiang przeprowadzili eksperymenty i przygotowali szkic rękopisu. Yi Ming Xing, Cheng Zhu i Qiang Song zebrali przeglądy literatury, przeprowadzili analizę surowych danych i interpretację danych. Qin Rong Yu zrewidował intelektualną zawartość rękopisu.

Od: ' przeciwnowotworowe ianty-zapalnydziałanie oligosacharydów zCistanchedeserticolawyciąg na uraz rdzenia kręgowego” byHong Zhang i inni

---H. Zhang i in. / International Journal of Biological Macromolecules 124 (2019) 360–367

Bibliografia

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, Wzmacnianie regeneracji układu nerwowego poprzez neurobiologię, trening interfejsów neuronowych i neurorehabilitację, Front. Neurosci. 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, Systemowe podawanie białka fuzyjnego PEP-1-SOD1 poprawia funkcjonalną regenerację poprzez hamowanie śmierci komórek nerwowych po uszkodzeniu rdzenia kręgowego, wolny rodnik. Biol. Med. 45 (2008) 1190–1200.

[3] SM Lee, TY Yune, SJ Kim, DW Park, YK Lee, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocyklina zmniejsza śmierć komórek i poprawia regenerację funkcjonalną po urazowym uszkodzeniu rdzenia kręgowego u szczura, J. Neurotrauma 20 (2003) 1017-1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Peroxynitrite wytworzony w rdzeniu kręgowym szczura indukuje śmierć neuronów i deficyty neurologiczne, Neuroscience 115 (2002) 839-849.

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei, ML Block, B. Wilson, B. Liu, JS Hong, Oksydaza NADPH pośredniczy w neurotoksyczności indukowanej lipopolisacharydami i ekspresji genów prozapalnych w aktywowanym mikrogleju, J. Biol . Chem. 279 (2004) 1415-1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia izapalenieneurodegeneracja pośredniczona: wiele wyzwalaczy o wspólnym mechanizmie, Prog. Neurobiol. 76 (2005) 77-98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Gangliozydy aktywują mikroglej poprzez kinazę białkową C i oksydazę NADPH, Glia 48 (2004) 197-206.
[8] J. Hussein, M. El-Banna, TA Razik, ME El-Naggar, Biokompatybilne nanokryształy tlenku cynku stabilizowane hydroksyetylocelulozą w celu łagodzenia powikłań cukrzycowych, Int. J. Biol. Makromol. 107 (Pt A) (2018) 748-754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocyklina łagodzi śmierć oligodendrocytów poprzez hamowanie wytwarzania pronerwowego czynnika wzrostu w mikrogleju po uszkodzeniu rdzenia kręgowego, J. Neurosci. 27 (2007) 7751-7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, Ochronne działanie werbaskozydu na neurotoksyczność indukowaną jonem 1-metylo-4-fenylopirydyniowym w komórkach PC12, Eur. J. Pharmacol. 451 (2002) 119-124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, Analiza składników chemicznych gatunków Cistanche, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970-1979.
[12] KA Koo, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, YC Kim, Neuroprotekcyjne działanie glikozydów fenyloetanoidowych in vitro z Callicarpa dichotoma, Planta Med. 71 (2005) 778-780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, Charakterystyka strukturalna i aktywność immunologiczna dwóch ekstrahowanych zimną wodą polisacharydów zCistanchedeserticolaYC Ma, Carbohydr. Res. 342 (2007) 1343-1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, Działanie antynocyceptywne i przeciwzapalne wywołane przezCistanchedeserticolau gryzoni, J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177-182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, Synteza nanoemulsji na bazie karwakrolu do leczenia zaburzeń neurodegeneracyjnych w eksperymentalnej cukrzycy, J. Funct. Żywność 37 (2017) 441–448.
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, Intravenous infuzja dihydro-ginsenozydu Rb1 zapobiega uciskowemu uszkodzeniu rdzenia kręgowego i niedokrwiennemu uszkodzeniu mózgu poprzez regulację w górę VEGF i Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037–1054.
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Prostaglandyna E1 zmniejsza uraz rdzenia kręgowego spowodowany kompresją u szczurów głównie poprzez hamowanie aktywacji neutrofili, J Neurotrauma 20 (2) (2003) 221-228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , P. Tu, Wyciągi zCistanchedeserticolamoże antagonizować immunostarzenie i wydłużać czas życia u myszy z akceleracją starzenia się podatną na 8 (SAM-P8), Evid. Uzupełnienie oparte. Alternat. Med. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, Ostra neurotoksyczność indukowana aluminium u szczurów: leczenie wodnym ekstraktem z Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] TV Arutyunyan, AF Korystova, LN Kublik, MKh Levitman, VV Shaposhnikova, YN Korystov, Taxifolin i fucoidan znoszą wywołany napromienianiem wzrost produkcji reaktywnych form tlenu w aorcie szczura, Bull. Do potęgi. Biol. Med. 160 (2016) 635-638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, Wpływ egzogennego glutationu na obniżony poziom glutationu, aktywność peroksydazy glutationowej i reduktazy glutationowej u szczurów w różnym wieku i płci po napromieniowaniu Γ całego ciała, J. Am . Starzenie się dr hab. 26 (2003) 55-58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, Oznaczanie interleukiny-6 i stężenia czynnika martwicy nowotworu alfa w Pacjenci irańsko-chorasaniańscy ze stanem przedrzucawkowym, BMC Pregnancy Childbirth 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Attia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Khayat, Wpływ Au-dekstranu NPS jako środek przeciwnowotworowy przeciwko EAC i guzom litym u myszy na podstawie ocen biochemicznych i badań histopatologicznych, Biomed. Farmakotera. 91 (2017) 1006-1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Khayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, Ocena przeciwcukrzycowa; badanie in vivo nanocząstek złota i rdzeń-powłoka srebro-złoto na szczurach z cukrzycą indukowaną streptozotocyną, Biomed. Farmakotera. 83 (2016) 865-875.
[25] YJ Moon, JY Lee, MS Oh, YK Pak, KS Park, TH Oh, TY Yune, Inhibition ofzapaleniea stres oksydacyjny wywołany przez ekstrakt z Angelica dahuricae radix zmniejsza apoptotyczną śmierć komórek i poprawia funkcjonalną regenerację po uszkodzeniu rdzenia kręgowego, J. Neurosci. Res. 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt, A. Kluge, K. Spanel-Borowski, Ekspresja izoform czynnika wzrostu nerwów (NGF) w macicy szczura podczas ciąży: akumulacja prekursora proNGF, Endocrinology 146 (4) (2005) 1922-1929.
[27] J. Liu, E. Head, AM Gharib, W. Yuan, RT Ingersoll, TM Hagen, CW Cotman, BN Ames, Utrata pamięci u starych szczurów jest związana z rozpadem mitochondriów mózgu i utlenianiem RNA/DNA: częściowe odwrócenie przez zasilanie acetylo-L-karnityną i/lub kwasem R-_-liponowym, Proc. Natl. Acad. Nauka. USA 99 (2002) 2356-2361.
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Glikozydy fenyloetanoidowe o działaniu przeciwzapalnym z łodygCistanchedeserticolahodowane na pustyni Tarim, Fitoterapia 89 (2013) 167–174.
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, Arabinogalaktan wyizolowany z łodygCistanchedeserticolaindukuje proliferację hodowanych limfocytów, Int. J. Biol. Makromol. 37 (2005) 278–282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinakozyd ratuje komórki neuronalne SHSY5Y przed apoptozą indukowaną TNF-alfa, Eur. J. Pharmacol. 505 (2004) 11-18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, Neuroprotekcyjne działanie echinakozydu w mysim modelu MPTP choroby Parkinsona, Eur. J. Pharmacol. 564 (2007) 66-74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, Neuroprotekcyjne działanie terapii cistanches herba u pacjentów z umiarkowaną chorobą Alzheimera, Evid. Uzupełnienie oparte. Alternat. Med. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, Leczenie in vivo ziołowym akteozydem fenyloetanoidu łagodzi jelitazapaleniew zapaleniu okrężnicy wywołanym siarczanem dekstranu, Clin. Do potęgi. Immunol. 148 (2) (2007) 373-381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS You, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, Przeciwzapalne działanie izoakteozydu z Abeliophyllum disticchum, Immunopharmacol. Immunotoksykol. 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, Przeciwzapalne glikozydy fenylopropanoidowe z liści Clerodendron trichotomum, Arch. Farmacja Res. 32 (1) (2009) 7–13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, Aktywność przeciwzapalna oligosacharydów guluronianowych otrzymanych przez oksydacyjną degradację z alginianu w mysich makrofagach aktywowanych lipopolisacharydami RAW 264,7, J. Rolnictwo. Chemia Spożywcza 14;63 (1) (2015) 160–168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, Monomery neoagaro-oligosacharydów hamujązapaleniew makrofagach stymulowanych LPS poprzez supresję szlaków MAPK i NF-κB, Sci. Rep. 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, Prekursorowy czynnik wzrostu układu nerwowego jest dominującą postacią czynnika wzrostu nerwów w mózgu i jest zwiększony w chorobie Alzheimera, Mol. Komórka. Neurosci. 18 (2001) 210–220.
[39] R. Lee, P. Kermani, KK Teng, BL Hempstead, Regulacja przeżycia komórek przez wydzielane proneurotrofiny, Science 294 (2001) 1945-1948.
[40] MV Chao, M. Bothwell, Neurotrophins: to cleave or not to cleave, Neuron 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Hepatoprotekcyjne działanie fenyloetanoidów zCistanchedeserticola, Planta Med. 64 (2) (1998) 120-125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, Badania nad wpływem glikozydów fenyloetanoidowych (PEG)Cistanchedeserticolaw sprawie przeciwdziałania starzeniu się starszych myszy wywołanych przez D-galaktozę, J. Chin. Med. Matko. 31 (9) (2008) 1385-1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, Kardioprotekcyjne działanie ekstraktu bogatego w glikozydy fenyloetanoidowe zCistanchedeserticolaw zawale mięśnia sercowego wywołanym niedokrwieniem-reperfuzją u szczurów, Ann. Vasc. Chirurg. 34 (2016) 234-242.