Postęp badań i zastosowanie technologii odcisków palców na chińskim Materia Medica Ⅱ

1.2 Elektrochemiczny odcisk palca

Elektrochemia jest prostą metodą analityczną opartą na właściwościach elektrochemicznych i zasadach badanej substancji, która jest tania, bardzo czuła i wymaga niewielu materiałów eksploatacyjnych [19]. Metoda ta ma jednak pewne ograniczenia i obecnie ma zastosowanie głównie do analizy chińskich leków zawierających składniki chemiczne, takie jak terpeny (takie jak Angelica sinensis), flawonoidy (takie jak Scutellaria baicalensis), alkaloidy (takie jak Aconite) i antrachinony (takie jak Aconite). takie jak rabarbar), które mogą ulegać reakcjom elektrochemicznym.

Wu Di i in. [20] wykorzystali elektrochemiczny odcisk palca w celu ustalenia optymalnego procesu ekstrakcji Scutellaria baicalensis Georgi, zapewniając dobrą metodę racjonalnego wykorzystania chińskich materiałów leczniczych. Shi Huihui i in. [21] wykorzystali technologię oscylacji chemicznych w reakcji Belousova-Chabotinsky'ego (BZ) w celu zbadania wpływu temperatury, prędkości obrotowej i liczby materiałów leczniczych dodanych na wyniki eksperymentów oraz ustalili rozsądne warunki eksperymentalne w celu uzyskania elektrochemicznego odcisku palca Magnolia biondii Pamp ., dostarczając nową metodę kontroli jakości Magnolia biondii. Zou Guihua i in. [22] ustalili nieliniowy elektrochemiczny odcisk palca Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. I Gentiana makrophylla Pall. Odciski elektrochemiczne obu materiałów leczniczych różnią się wizualnie, co można zastosować jako prostą i skuteczną metodę odróżnienia Codonopsis pilosula od Gentiana makrophylla. Dai Hongxia i in. [23] przeprowadzili analizę elektrochemiczną 20 partii Angelica sinensis (Oliv.) Diels o okresie wzrostu 1, 2 i 3 lata. W połączeniu z analizą głównych składowych stwierdzono, że elektrochemiczne ślady i parametry oscylacji (w tym czas indukcji oscylacji, maksymalny potencjał, trwałość oscylacji, maksymalna amplituda, potencjał zatrzymania i liczba cykli) Angelica sinensis w różnych okresach wzrostu były znacząco różne, które mogą służyć jako podstawa do identyfikacji Angelica sinensis w różnych okresach.

CHIŃSKI MATERIAŁ ZIOŁ MEDYCZNY CISTANCHE HPLC ODCISK PALCA

1.3 Odcisk chromatograficzny

1.3.1 Chromatografia cienkowarstwowa

Chromatografia cienkowarstwowa to metoda chromatograficzna, w której osiąga się rozdział w oparciu o różne zdolności adsorpcji tego samego adsorbentu dla różnych składników chemicznych. Jest to najczęściej stosowana metoda identyfikacji tradycyjnych chińskich leków, charakteryzująca się łatwą obsługą, prostym wyposażeniem, dobrą czułością, wysoką porównywalnością, dużą swoistością i łatwym wywoływaniem kolorów. Autentyczność materiału leczniczego można określić na podstawie obecności lub braku plam na płytce cienkowarstwowej. Głębia i wielkość koloru plam może w pewnym stopniu odzwierciedlać jakość materiału leczniczego[24]. Obecnie wysokosprawna chromatografia cienkowarstwowa(HPTLC) jest często stosowana w celu zastąpienia wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) w celu jakościowej i ilościowej identyfikacji produktów tradycyjnej medycyny chińskiej ze względu na jej prostotę, dokładność, niski koszt, wysoką wydajność i szybkość. Odciski palców HPTLC mają lepszą rozdzielczość i pozwalają rozsądnie i dokładnie oszacować zawartość aktywnych składników leku w krótszym czasie [25]. Jednak ze względu na dużą liczbę czynników wpływających (wilgotność, temperatura itp.) powtarzalność wyników jest słaba w porównaniu z HPLC. Loescher i in. [26] wykorzystali HPLC i HPTLC do analizy ekstraktu z nagietka lekarskiego i odkryli, że HPLC jest bardziej odpowiednia do analizy ilościowej niż HPTLC.

W odpowiedzi na ten efekt Li Xiangjun i in. [27] zastosowali szereg odpowiednich rozwiązań, obejmujących przeprowadzenie eksperymentu wywołującego w lodówce lub szczelnym urządzeniu o kontrolowanej temperaturze w celu zmniejszenia wpływu temperatury i dodanie różnych proporcji kwasu siarkowego na jednym końcu cylindra wywołującego w celu kontrolowania wilgotności.

CHIŃSKI MATERIAŁ MEDYCZNY ZIOŁA CISTANCHE ETYKIETA HPLC

Patil i in. [28] ustalili odcisk palca HPTLC ekstraktu eteru naftowego Catsia tora Linn. Wyniki wykazały, że liście, nasiona i kwiaty zawierały odpowiednio 10, 7 i 11 rodzajów składników. Metodę tę można wykorzystać do sprawdzenia autentyczności Catsia tora Linn. Xiao Honghua i in. [29] wykorzystali chromatografię cienkowarstwową połączoną ze spektrometrią mas w celu ustalenia cienkowarstwowego chromatograficznego „odcisku palca” chromonów, kwasów organicznych i saponin triterpenoidowych w Cimicifuga foetida L. oraz przeprowadzili analizę podobieństwa, analizę skupień i analizę głównych składników 16 partii roślin. Próbki Cimicifuga z pięciu źródeł stanowią podstawę kontroli jakości Cimicifuga.

Guzelmeric i in. [30] użyli octanu etylu, kwasu mrówkowego, kwasu octowego i wody (30:1,5:1,5:3) jako rozpuszczalnika rozwijającego do opracowania odcisku palca HPTLC apigeniny-7-glukozydu, aktywnego markera Matricaria chamomilla L., które można wykorzystać jako główny przewodnik przy ocenie jakości rumianku. Bazylko i in. [31] ustalili ślad HPTLC pięciu związków flawonoidowych, mianowicie tagetoidów, kwercetyny, flawonoidów, kwasu kawowego i kwasu chlorogenowego, z Galinsoga parviflora Cav. Metodę tę można zastosować do identyfikacji Galinsoga parviflora. Etanol i in. [32] ustalili odcisk palca ekstraktu etanolowego z Acacia catechu (L. f.) Willd. Za pomocą HPTLC przeprowadzono prostą i szybką ocenę ilościową rutyny i kwercetyny w ekstrakcie. Agatonovic-Kustrin i in. [33] wykorzystali HPTLC do ilościowej analizy apigeniny, Matricaria i bisabololu w ekstraktach z liści i kwiatów Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. i Calendula officinalis L., połączyli ją z metodą DPPH w celu porównania przeciwutleniacza pojemność tych elementów. Metoda ta jest prosta, szybka, niezawodna i niedroga i może być również stosowana do badania aktywności przeciwutleniającej ekstraktów roślinnych.

1.3.2 Metoda HPLC HPLC jest uniwersalną metodą analityczną służącą do wykrywania różnych składników chemicznych w tradycyjnej medycynie chińskiej.

Jest szeroko stosowany w wykrywaniu składników chemicznych w tradycyjnej medycynie chińskiej ze względu na jego zalety, takie jak wysokie ciśnienie, wysoka czułość, wysoka wydajność i automatyzacja [34]. Detektor UV, detektor diodowy (DAD), detektor elektrochemiczny, detektor światła parującego itp., które można do nich podłączyć, wykazują niezastąpioną wyższość.

Qiao i in. [35] zastosowali kompleksową dwuwymiarową chromatografię cieczową z odwróconą fazą × odwróconą fazą (RP × RP 2DLC) do rozdzielenia związków fenolowych otrzymanych w wyniku ekstrakcji lukrecji Glycyrrhiza uralensis Fisch octanem etylu.

W ciągu 40 minut wykryto 311 związków, a za pomocą spektrometrii mas wstępnie scharakteryzowano strukturę 21 nieznanych związków, a 8 z nich odkryto w lukrecji po raz pierwszy. Wyniki wykazały, że system RP×RP2DLC/MS dobrze wpływa na separację złożonych ekstraktów tradycyjnej medycyny chińskiej oraz analizę jakościową produktów naturalnych. Peng Liang i in. [36] przeanalizowali składniki flawonoidowe w 10 partiach Gynostemma pentaphyllum (Thunb.). Makino ustalił odcisk palca HPLC Gynostemma pentaphyllum i skalibrował 11 wspólnych charakterystycznych pików. Wyniki analizy podobieństwa wykazały, że największe podobieństwo 10 partii odcisków palców Gynostemma pentaphyllum w stosunku do widma referencyjnego wyniosło 0,989, a najniższe 0,128, co wskazuje, że składniki flawonoidowe Gynostemma pentaphyllum różnego pochodzenia były podobne pod względem typu, ale różniły się znacząco treścią. Sun i in. [37] wykorzystali metodę HPLC-DAD do analizy podobieństwa składników chemicznych Bupleurum chinense DC. i B. scorzonerifolium Willd. Po raz pierwszy odkrył, że oba miały odpowiednio 12 wspólnych pików flawonoidów i 4 piki saponin, a jednocześnie każdy miał odpowiednio 6 unikalnych pików flawonoidów i 5 pików saponin. Wyniki wykazały, że metoda ta może w sposób rozsądny i skuteczny odzwierciedlać różnicę w składnikach chemicznych pomiędzy Bupleurum i Bupleurum chinense. Korelacja między nimi jest słaba. Dlatego w praktyce klinicznej Bupleurum chinense należy stosować ostrożnie. On i in. [38] przeanalizowali ilościowo 10 rodzajów bioaktywnego kwasu galusowego, kwasu chlorogenowego, kofeiny i katechin zawartych w 10 partiach zielonej herbaty Ziyang. Opracowany odcisk palca HPLC był prosty i niezawodny. Li i in. [39] ustalili odcisk palca HPLC skórki granatu. Wybrali 15 charakterystycznych pików i ocenili podobieństwo 10 partii skórki granatu na 0,968. Oddzielili także i poddali analizie ilościowej zawarte w niej punikalaginę, kwas galusowy, katechinę, kwas chlorogenowy, kwas kawowy, epikatechinę, rutynę i kwas elagowy, zapewniając wiarygodną i skuteczną metodę identyfikacji autentyczności i kontroli jakości skórki granatu. Sumathy i in. [1] wykorzystali HPLC w połączeniu z HPTLC i chromatografią gazową ze spektrometrią mas (GC-MS) do określenia składu chemicznego ekstraktu metanolowego Ixora chinensis Lam. Analiza HPLC wykazała obecność biochiny A, mirycetyny, kwercetyny, rutyny, daidzeiny i formononetyny; w odcisku palca HPTLC wykryto kwas ursolowy; Za pomocą GC-MS wykryto 24 składniki fitochemiczne; dzięki tej połączonej metodzie jakościowej i ilościowej można z łatwością ocenić jakość i stabilność Ixora chinensis Lam. Ge i in. [40] ustalili odcisk palca UHPLC-DAD Radix Angelicae Pubescentis, przeanalizowali ilościowo kumaryny i kwasy fenolowe zawarte w Radix Angelicae Pubescentis i jakościowo zidentyfikowali jego składniki aktywne za pomocą spektrometrii mas z kwadrupolowym czasem przelotu (Q-TOF-MS). Znaleźli 9 kwasów fenolowych, 30 kumaryn i 41 związków mirry i adenozyny. Połączyli metodę analizy dyskryminacyjnej, aby skutecznie i szybko rozróżnić 32 partie Radix Angelicae Pubescentis z różnych prowincji. Metoda ta stanowi nowy pomysł na kontrolę jakości Radix Angelicae Pubescentis.

LISTA SPECYFIKACJI CISTANCHE

Yang i in. [41] wykorzystali detektor ultrawysokosprawnej chromatografii cieczowej (UPLC)-DAD i technologię ESI-MS do uzyskania odpowiednio odcisku palca HPLC i spektrometrii mas tabletek Xiaoyanlidan. Przeanalizowali 113 próbek tabletek Xiaoyanlidan i uzyskali 39 pików, z których 26 pochodziło z Quassia, 9 z Andrographis paniculata i 4 z Rhizoma Cynoglossi. Korzystając z chemometrycznych metod podobieństwa i PCA, ustalili, że pięć istotnych składników to 4-metoksy-5-hydroksyferrocefalostomon, andrografolid, dehydroandrografolid, neoandrografolid i kwas rozmarynowy. Ustalili systematyczny i kompleksowy „odcisk palca” w celu poprawy i oceny jakości tabletek Xiaoyanlidan. Fan i in. [42] ustalili odciski palców HPLC i UPLC glikozydów flawonoidowych w Lophatherum gracile Brongn. i wyizolowali nowy flawonoid C-glikozyd luteolinowy 6-C- -kwas D-glukuronowy-(1 → 2){{19 }}D-piranoglukozyd po raz pierwszy. Po raz pierwszy odkryli także izomery optyczne dwóch związków, flawonoidu flawonoidowego i hydroksyflawonoidu flawonoidowego. Wykorzystali jednowymiarowy i dwuwymiarowy jądrowy rezonans magnetyczny oraz spektrometrię mas, aby rozróżnić i określić ich struktury, zapewniając nową metodę kontroli jakości Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu i in. [43] wykorzystali HPLC-DAD w połączeniu z chromatografią cienkowarstwową, jądrowym rezonansem magnetycznym i spektrometrią mas, aby skutecznie oddzielić główne związki biflawonoidowe GB1, GB2, GB-1a i flawonoidy z Garcinia kola Linn. i potwierdzili ich strukturę , która może być stosowana jako rutynowa metoda analizy preparatów farmaceutycznych. Zhao i in. [44] ustalili za pomocą HPLC-UV-MS odcisk palca Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, ilościowo oznaczone andrografolid i dehydroandrografolid zawarte w Andrographis paniculata i ocenili różnice między 10 partiami Andrographis paniculata poprzez połączenie analizy podobieństwa i PCA. Metoda ta stanowi podstawę kontroli jakości Andrographis paniculata.

Ahmeda i in. [45] za pomocą HPLC uzyskali odcisk palca żywicy Commiphora wightii (Arn.) Bhandari i poddali analizie ilościowej zawarty w niej trans- i cis-sterolon. Jednocześnie metodą tą można skutecznie rozróżnić 22 partie żywicy Commiphora wightii i 9 partii żywicy zafałszowanej, co można wykorzystać jako metodę identyfikacji autentyczności żywicy Commiphora wightii.

2 Biologiczne odciski palców

Biologiczne odciski palców to wykorzystanie metod analizy sekwencji genów na poziomie molekularnym w celu rozróżnienia i klasyfikacji rozmieszczenia geograficznego oraz zmian w chińskich materiałach leczniczych, w tym odcisków palców genomowych, odcisków proteomicznych[60] i odcisków palców DNA[61]. Obecnie prowadzonych jest mniej badań dotyczących biologicznych odcisków palców chińskich leków niż chemicznych. Do najczęściej stosowanych metod należą elektroforeza w żelu poliakryloamidowym (PAGE), technologia losowo amplifikowanego polimorficznego markera molekularnego DNA (RAPD), reakcja łańcuchowa polimerazy.

(PCR) i inne metody.

Liu Li i wsp. [62] wykorzystał markery RAPD w połączeniu z PCR i analizą skupień, aby skutecznie zidentyfikować Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey. i amerykański żeń-szeń Panaxquinquefolium L. Fan Wei i in. [63] jako pierwsi ustalili białkowy odcisk palca SDS-PAGE Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus i Scolopendra subsidies mutilans L. Koch, zapewniając niezawodną i skuteczną metodę identyfikacji tych trzech materiałów leczniczych. Wei Yicong i in. [64] zaprojektowali startery specyficzne dla podwójnego miejsca i skonstruowali multipleksową reakcję PCR. Szybka identyfikacja dwóch materiałów leczniczych, Houttuynia cordata Thunb. Natomiast Gymnotheca chinensis Decne. może jednocześnie pozytywnie zidentyfikować oba gatunki i określić, czy są one mieszane. Wang Fu i in. [65] wykorzystali sekwencję ITS2 (wewnętrznie transkrybowany odstępnik 2) jako kod kreskowy DNA w celu dokładnej identyfikacji leku chińskiego Zanthoxylumbungeanum Maxim. Oraz jego przyprawa Zanthoxylumbungeanum Maxim., stanowiąca podstawę do identyfikacji medycyny chińskiej Zanthoxylumbungeanum i jej przyprawy Zanthoxylumbungeanum.