Cistanche Deserticola Polisacharydy osłabiają nefropatię cukrzycową u myszy, wpływając na florę jelitową i hamując szlak sygnałowy receptora 4/czynnika jądrowego κ κB ⅱ

2.5 Wpływ CDP na patologię okrężnicy u myszy C57BL/6J

Cistanche Deserticola Ekstrakt proszek z wysokiej jakości surowców

Kliknij, aby uzyskać więcej szczegółów

Jak pokazano na rycinie 2, barwienie H&E ujawniło, że struktura tkanki okrężnicy normalnych myszy była normalna, krypty były starannie i ściśle ułożone, liczba była duża, a komórki nabłonkowe nie miały oczywistej zwyrodnienia i zrzucania. Przeciwnie, myszy DN wykazywały oczywiste zrzucanie komórek nabłonka okrężnicy, infiltrację komórek zapalnych, uszkodzenie komórek kryptowych, zniknięcie struktury gruczołowej jelit i zwiększona przepuszczalność. Po 4 tygodniach interwencji CDPS powyższe warunki patologiczne odzyskały w różnym stopniu.

Wyniki barwienia AB-PA wykazały, że w porównaniu z grupą kontrolną liczba niezwiązanych komórek kubków u okrężnicy myszy z grupy modelowej była znacznie zmniejszona, a wydzielanie kwaśnego białka śluzu było znacznie zwiększone; Liczba niezwiązanych komórek kubek w okrężnicy grupy kontrolnej była największa; W porównaniu z grupą modelową wydzielanie białka śluzu kwaśnego w grupie CDPS było zmniejszone.

Ryc. 2 Wpływ CDP na zmiany histopatologiczne okrężnicy u myszy DN badanych przez H&E i barwienie AB-PAS

2.6 Wpływ CDP na florę jelit myszy C57BL/6J

Wpływ CDP na wskaźniki biochemiczne i patologiczne wyniki myszy DN zostały kompleksowo przeanalizowane, a zawartość okrężnicy myszy w grupie CDPS-H o najlepszej ogólnej skuteczności wybrano do badań flory jelitowej.

2.6.1 Wariant sekwencji amplikonu (ASV) Diagram Venna, jak pokazano na rycinie 3, w porównaniu z grupą kontrolną, względną obfitość gatunków flory jelitowej u myszy grupowych myszy, a względna obfitość poprawiła się po leczeniu CDPS.

Cistanche

2.6.2 Analiza różnorodności alfa, jak pokazano w tabeli 6, w porównaniu z grupą kontrolną, wskaźnik ChaO1 flory jelitowej myszy z grupy modelowej zmniejszył się. Po interwencji CDPS wskaźnik ChAO1 wzrósł, ale nie było istotności statystycznej, co wskazuje, że CDP mogą zmienić strukturę flory jelitowej poprzez zwiększenie całkowitej liczby gatunków. Wskaźnik pokrycia jest bliski 1, co wskazuje, że wyniki sekwencjonowania mogą zasadniczo odzwierciedlać prawdziwą sytuację próbki. Nie było statystycznie istotnej różnicy w indeksie Shannon, Simpson, pokrycia i Pielou _ wśród grup, co wskazuje, że bogactwo gatunków i różnorodność społeczności środowiskowych w każdej grupie były dobre, a pokrycie kolonii było spójne i równo rozpowszechnione.

Ryc. 3 Diagram Venna rozkładu ASV

Tabela 6 Wskaźniki różnorodności alfa mikroflory jelitowej u myszy w grupach kontrolnych, modelu i CDPS (n=6)

2.6.3 Analiza różnorodności beta

Jak pokazano na rycinie 4, poprzez analizę różnorodności beta, analiza głównych składników (PCA) może rozróżnić trzy grupy próbek w przestrzeni trójwymiarowej, co wskazuje, że istnieją znaczące różnice we flory jelitowej tych trzech grup próbek. Grupa modelowa i grupa kontrolna są oddzielone wzdłuż osi PC2, a grupa CDPS-H znajduje się między grupą modelu a grupą kontrolną, w pobliżu grupy kontrolnej.

Ryc. 4 Różnorodność beta flory jelit u myszy w grupach kontrolnych, modelu i CDPS (n=6))

2.6.4 Wpływ CDP na florę jelit myszy C57BL/6J

2.6.4.1 Poziom filolum

Jak pokazano na rycinie 5, w porównaniu z grupą kontrolną, względna liczebność Firmicut w grupie modelowej znacznie wzrosła, względna obfitość bakterii i werrucomikrobii znacznie spadła, a względny stosunek obfitości (B/F) bakteriokoidetów do firmy. W porównaniu z grupą modelową CDP znacznie zwiększył względną obfitość bakterioidety i verrucoMicrobia, zmniejszyły względną obfitość Firmicutes i zwiększyła wartość B/F, która była bliższa wartości B/F grupy kontrolnej.

Ryc. 5 Wykres słupkowy względnej liczebności flory jelitowej na poziomie filum (n=6))

2.6.4.2 Poziom rodzaju

Histogram składu obfitości gatunków na 30 najlepszych poziomach rodzajów (ryc. 6) pokazuje, że istnieją różnice we florze jelitowej myszy w grupie modelowej i grupie CDPS-H. Istnieje 16 różnych rodzajów bakterii między grupą modelu a grupą kontrolną; Istnieje 8 różnych rodzajów bakteryjnych między grupą CDPS-H a grupą modelową; 5 rodzajów bakteryjnych w obszarze nakładającego się może być rodzajami bakterii, które CDP mogą poprawić nefropatię cukrzycową (ryc. 7). Jak widać z tabeli 7, na poziomie rodzaju na mysie flory jelitowej, w porównaniu z grupą kontrolną, względna obfitość allobaculum w grupie modelowej była znacznie zmniejszona, a względna obfitość roseburii, romboutia, Ruminococcus _ Despy _}<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

Ryc. 6 Wykres słupkowy względnej liczebności flory jelitowej na poziomie rodzaju (n=6))

Ryc. 7 Schemat Venna flory jelitowej na poziomie rodzaju (n=6)

Tabela 7 Wpływ CDP na względną obfitość różnicowych rodzajów mikrobiologicznych jelit między grupami kontroli, modelu i CDPS (n=6)

2.6.4.3 Wpływ CDP na ekspresję ZO ZO -1

Jak pokazano na rycinie 8 i tabeli 8, w porównaniu z grupą kontrolną, względne poziomy ekspresji ZO -1 i białek okludinowych w tkance okrężnicy myszy w grupie modelowej zostały znacznie zmniejszone (p <{3}}. 01); W porównaniu z grupą modelową interwencja CDPS w każdej dawce może znacznie zwiększyć względne poziomy ekspresji zo -1 i białek okludinowych w tkance okrężnicy (p<0.01).

Ryc. 8 Wyrażenie ZO -1 i okludin w tkance okrężnicy myszy z każdej grupy (n=3))

Tabela 8 Względne poziomy ekspresji ZO -1 i okludyny w tkance okrężnicy myszy z każdej grupy (n=3)

Surowce Cistanche

2.7 Wpływ CDP na nerkową ekspresję białka sygnalizacyjnego TLR4/NF-κB

Jak pokazano na rycinie 9 i tabeli 9, w porównaniu z grupą kontrolną, względna ekspresja białka TLR4 w tkance nerkowej myszy w grupie modelowej i stosunki p-NF-κBP65/NF-κB p65 i Pi κBα/I κBα. Wysoki (str<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

Ryc. 9 Analiza Western blot ekspresji białka związana z szlakiem sygnałowym TLR4/ NF-κB w tkance nerkowej myszy z każdej grupy (n=3))

Tabela 9 względne poziomy ekspresji białek związanych z sygnałem sygnałowym TLR4/NF-κB w tkance nerkowej myszy z każdej grupy (n=3))