Składnik dopełniający C1q jako potencjalne narzędzie diagnostyczne dla zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego / zespołu przewlekłego zmęczenia Podtypowanie

Abstrakcyjny:Wstęp: Rutynowe analizy krwi są systematycznie wykorzystywane w klinice do diagnozowaniachoroby lub potwierdzić stan zdrowia osób. Na mialgiczne zapalenie mózgu i rdzenia/przewlekłe zmęczeniezespół (ME/CFS), choroba, której rozpoznanie opiera się wyłącznie na objawach klinicznych, krwianalityka służy jedynie do wykluczenia podstawowych warunków prowadzących do:wywieranie zmęczenia. Jednak studiaocena kompletnych i dużych zbiorów danych krwi za pomocą kombinatorycznych metod dowodowych ME/CFSwarunków lub wykrywanie/identyfikowanie podgrup przypadków są nadal rzadkie.

Metody:W tym badaniu wykorzystano bezstronnośćhierarchiczna analiza skupień dużej kohorty 250 starannie fenotypowych przypadków ME/CFS kobiet

w kierunku zbadania tej możliwości. Wyniki: Wyniki pokazują trzy klastry oparte na objawach, sklasyfikowanejako ciężka, umiarkowana i łagodna, wykazując znaczące różnice (p < 0.05)="" in="" five="" blood="">

Nieoczekiwanie badanie wykazało również wysoki poziom krążącego czynnika C1q dopełniacza w 107/250(43%) uczestników, umieszczając C1q jako kluczową cząsteczkę do identyfikacji podtypu/podgrupy ME/CFSz bardziej widocznymi objawami bólu.

Wnioski:Uzyskane wyniki mają ważne implikacjedo badań etiologii ME/CFS i najprawdopodobniej do realizacji przyszłej diagnozymetody i leczenie ME/CFS w klinice.

Słowa kluczowe:mialgiczne zapalenie mózgu i rdzenia;zespół chronicznego zmęczenia; C1q; układ dopełniacza; krewanalityka; diagnoza; objawy; analiza skupień

Kliknij tutaj, aby dowiedzieć się więcej o CFS i funkcji przeciwdziałającej zmęczeniu

1. WstępMialgiczne zapalenie mózgu i rdzenia/zespół przewlekłego zmęczenia (ME/CFS) stanowi poważnyproblem zdrowotny, który skraca życie milionów ludzi i ich rodzin na całym świecieświat. ME/CFS to przewlekła choroba charakteryzująca się głębokim zmęczeniem, którenasila aktywność fizyczna/psychiczna i emocjonalna (znana również jako PEM; powysiłkowazłe samopoczucie), brak odświeżającego snu i dysautonomia oraz wielokrotne dodatkowechoroby współistniejące; jego diagnoza nadal opiera się wyłącznie na ocenie objawów klinicznychpowykluczenie potencjalnej podległej choroby, która mogłaby wyjaśnić pacjenta´objawy.Pomimo szeregu badań mających na celu potwierdzenie rutynowych parametrów klinicznych, które mogą:być przydatne, przynajmniej w przypadku podejrzenia sprawy ME/CFS, niewiele różnic mazostały zgłoszone. Na przykład Nacul i in. stwierdzili znacząco niższe mediany wartościkinaza kreatynowa w surowicy (CK) u ciężko chorych pacjentów w porównaniu ze zdrowymi kontrolami (HC)i nieciężkie ME/CFS (odpowiednio mediana=54, 101,5 i 84 U/L) [9], znaleziskopotwierdzone dwoma dodatkowymi badaniami. Chociaż różnice CK można wyprowadzić zsam siedzący tryb życia pacjenta, pewne potencjalne różnice, w tym poziom zasadowościfosfataza, poziomy wolnej T4 lub liczba eozynofili wykryto przy niższym poziomie istotności (p < 0.1)="" in="">małe kohorty (n = 15/grupa)zasługują na dalszą eksplorację w większych kohortach, indywidualnielub w połączeniu z innymi.Wartościowe mogą być czynniki krwi odmiennie zmienione w podgrupach ME/CFSnarzędzia w klinice do poprawy leczenia pacjentów, w szczególności dla precyzjicelów medycznych, chociaż mogą również służyć minimalizowaniu heterogeniczności pacjentów w badaniachstudia. W rzeczywistości ujawnienie natury ME/CFS może zależeć od jednorodnościocena podzbioru pacjentów, zwiększająca statystyczną odporność danych.Dlatego w obecnym badaniu staraliśmy się zidentyfikować parametry kliniczne, które:różnicować podgrupy przypadków ME/CFS samodzielnie lub w zależności od nasilenia objawów,w dużej kohorcie kobiet z ME/CFS (n = 250), o potencjalnym działaniu terapeutycznym i/lubcelów badawczych.

2. Materiały i metody

2.1. Uczestnicy

W tym obserwacyjnym, jednoośrodkowym, przekrojowym badaniu kohortowym łącznie 250 kobietz ME/CFS byli kolejno kierowani do ośrodka skierowań III stopnia w celu oceny klinicznejprzez lekarza specjalisty ME/CFS (Szpital Uniwersytecki Val d'Hebron, Barcelona,Hiszpania) od marca 2017 r. do grudnia 2019 r. Uczestnicy zostali zaproszeni po zakwalifikowaniu sięzostało potwierdzone. Kryteria włączenia obejmowały dorosłe osobniki płci żeńskiej spełniające kryteria 1994Definicja CDC/Fukudaoraz kanadyjskie kryteria konsensusu z 2003 r. dotyczące ME/CFS. 

Uczestnicyzostały wykluczone, jeśli wcześniej zdiagnozowano u nich jakiekolwiek poważne choroby lubchoroby współistniejące, które mogą być związane z ich objawami. Uczestnicy przekazali apróbka krwi do rutynowych badań krwi, wypełnione zwalidowane standaryzowane kwestionariusze,oraz dostarczyły dane demograficzne i charakterystykę kliniczną w momencie ich włączenia dobadania.Procedury badawcze zostały zweryfikowane i zatwierdzone zgodnie z zaleceniamiod lokalnego Komitetu ds. Etyki Badań Klinicznych (Uniwersytet Val d'Hebron)Szpital, Barcelona, ​​Hiszpania; Numer protokołu IRB: CEIC/PR-AG-VITAE-2015, zatwierdzonyw czerwcu 2015 r.).

Wszyscy badani dobrowolnie przekazali pisemną podpisaną świadomą zgodę przeduczestnictwo w studiach, zgodnie z wytycznymi Deklaracji Helsińskiej i inzgodność z obowiązującymi hiszpańskimi przepisami dotyczącymi badań klinicznych oraz normami UEdobra praktyka kliniczna.

2.2. Środki

Uczestników poproszono o wypełnienie potwierdzonych, zgłaszanych przez siebie mierników wyników jako objawnarzędzia oceny. Opisane poniżej miary posłużyły do ​​oceny wszystkich uczestnikówpod nadzorem dwóch przeszkolonych śledczych (JC-M. i JA), którzy nadzorowali uczestnikazgodność.

2.2.1. Skala wpływu zmęczenia

Skala wpływu zmęczenia (FIS-40) to 40-kwestionariusz pozycji zaprojektowany do oceny zmęczeniaobjawy jako część podstawowej choroby przewlekłej. Obejmuje trzy domeny odzwierciedlająceodczuwane uczucie zmęczenia: fizyczne (10 pozycji), poznawcze (10 pozycji) i psychospołecznefunkcje (20 pozycji). Każda pozycja jest punktowana od zera (brak zmęczenia) do czterech (poważne zmęczenie). Theogólny wynik jest obliczany poprzez zsumowanie odpowiedzi na 40 pytań (zakresod 0 do 160 punktów). Wyższe wyniki wskazują na większe ograniczenia funkcjonalne spowodowane zmęczeniem.

2.2.2. Złożona ocena objawów autonomicznych

W celu pomiaru dysfunkcji autonomicznej wszyscy uczestnicy zostali przebadani za pomocą CompositeAutonomic Symptom Score (COMPASS-31), 31-pozycja doprecyzowana i skróconakwestionariusz przeznaczony do oceny częstości i nasilenia funkcji autonomicznejobjawy, pogrupowane w sześć domen: nietolerancja ortostatyczna (cztery pozycje), naczynioruchowe (trzyPozycje), Secretomotor (cztery pozycje), przewód pokarmowy (12 pozycji), pęcherz (trzy przedmioty) iobjawy źrenicowo-ruchowe (pięć pozycji). Zsumowane, sześć ocen domen zapewnia:całkowity wynik COMPASS{{0}} w zakresie od 0 do 100 punktów. Wyższe wyniki wskazują na bardziej dotkliweskargi autonomiczne.

2.2.3. Wskaźnik Jakości Snu w Pittsburghu

Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) to 19-element do samodzielnego wypełnianiapowszechnie używany do oceny zaburzeń snu w ciągu 1-miesiąca. Wyniki sąnabyte w każdej z siedmiu domen jakości snu: subiektywna jakość snu, senlatencja, czas trwania snu, nawykowa wydajność snu, zaburzenia snu, stosowanie leków nasennychi dysfunkcja w ciągu dnia. Każda domena jest oceniana od zera do trzech (zero=nieproblemy i trzy {{0}} poważne problemy). Ogólny wynik PSQI waha się od 0 do 21 punktów,z wynikamiWiększe bądź równe5 wskazuje na gorszą jakość snu.

2.2.4. Skrócona forma-36 Ankieta dotycząca zdrowia

Kwestionariusz ankiety zdrowotnej SF-36, ogólna skala określająca stan zdrowiaprofil, wykorzystano do oceny jakości życia. SF-36 składa się z 36 pytań, które badają:osiem wymiarów stanu zdrowia (funkcja fizyczna, ograniczenia ról ze względu na zdrowie fizyczne,ból ciała, ogólny stan zdrowia, witalność, funkcjonowanie społeczne, rola emocjonalna i zdrowie psychiczne),a także dwie ogólne podskale obejmujące domenę zdrowia fizycznego i psychicznego. 

2.3. Pobieranie i przetwarzanie krwi

Próbki krwi pobrano przez nakłucie żyły po 12 godzinach nocnego postu do natychmiastowegorutynowe badania laboratoryjne wykonywane przez doświadczoną pielęgniarkę badawczą w przychodni ME/CFS(Szpital Uniwersytecki Val d'Hebron, Barcelona, ​​Hiszpania). Próbki krwi zostały dostarczone dolokalne laboratorium podstawowe w szpitalu w ciągu 2 godzin od pobrania i kolejno analizowane.Standardowe laboratorium HUVH (Vall d'Hebron University Hospital Core Lab, Barcelona, ​​Hiszpania)do pobierania, transportu i przetwarzania oraz rutynowych badań krwi zastosowano protokołyzgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi (SOP).

2.4. Analiza krwi

Wyjściowe testy laboratoryjne były stosowane głównie w celu wykluczenia pierwotnych objawów ME/CFSinnych stanów zmęczeniowych. Te badania krwi na czczo obejmowały pełną morfologię krwi,szybkość sedymentacji erytrocytów (OB), płytki krwi, parametry biochemiczne krwi, kreatynina,glukoza na czczo, mocznik, kwas moczowy, bilirubina, test elektrolitowy (sodowy, potasowy, wapniowy),testy czynnościowe wątroby (AST, ALT, ALP, GGT), profil lipidowy (cholesterol, triglicerydy, LDL,HDL), testy czynności tarczycy, witamina D, immunoglobuliny (IgA, IgM, IgG i ich izotypy), białka dopełniacza (inhibitor C1, C1q, C3, C4) oraz przeciwciała antyfosfolipidowe(kardiolipina, beta-2-glikoproteina I). Poziomy dopełniacza mierzono za pomocą nefelometriiprzy użyciu systemu BN II (siedziba Siemens Healthcare, Erlangen, Niemcy). Normalnapoziomy odniesienia zakresów zapewniane przez Szpital Uniwersytecki Vall d'Hebron, Barcelona, ​​Hiszpaniadla każdej badanej zmiennej przedstawiono w Tabeli Uzupełniającej S1.

2.5. Analiza skupień

Hierarchiczną analizę skupień przeprowadzono początkowo metodą Wardadookreślić liczbę klastrów wybranych na podstawie interpretowalności i użyteczności. ANastępnie przeprowadzono analizę skupień metodą k-średnich w celu przypisania uczestników do klastrów. WelchaANOVA została wykorzystana dla zmiennych będących przedmiotem zainteresowania w celu przeanalizowania różnic między skupieniami, a następnie:przez porównania parami między skupieniami, gdy analizy jednowymiarowe były istotne(p <>

2.6. Analiza statystyczna i kreślenie

Dane ciągłe są pokazane jako średnie± SD (odchylenie standardowe). Różnice statystycznezostały określone za pomocą dwustronnego niesparowanego Welchat-testy. Oceniono rozkład normalnytestem normalności Shapiro–Wilka. Zmienne kategoryczne są przedstawione jakon (procent), normalniezmienne rozproszone przedstawiane są jako średnie± SD i zmienne o nienormalnym rozkładziesą przedstawiane jako mediana (rozstęp międzykwartylowy). Uwzględniono różnice między grupamiznaczące wp Mniejszy lub równy0.05. Korelacje zmienne oceniano metodą prostej regresji liniowejmetoda (metoda najmniejszych kwadratów). Analizy statystyczne przeprowadzono z R 3.6.3, orazfigury zostały utworzone przy użyciu pakietu ggplot2. 

3. Wyniki

3.1. Demografia i charakterystyka kliniczna uczestników

To prospektywne badanie obserwacyjne obejmowało 250 dorosłych kobiet, u których zdiagnozowanoME/CFS od 1994 CDC/Fukuda i 2003 CCC, analiza 69 laboratoryjnej krwitesty, zmienne demograficzne i cztery zweryfikowane kwestionariusze samoopisowe do ocenynasilenie choroby i choroby współistniejące. Ponadto zmienne sercowe i lekiZapisano również recepty (tabela uzupełniająca S1). Stół1 pokazuje opisoweparametry uczestników badania. Średnia wieku uczestników to 45,9± 7,02 lat,11,6 procent (29/250) wykazało otyłość (BMIWiększe bądź równe30), pasujący do 13 procent ocenianych za generałapopulacja, średnie tętno wyniosło 78,5± 10,3 uderzeń na minutę oraz krew skurczowa i rozkurczowaciśnienie wyniosło 125,8± 2,5 i 76,3± 1,6 odpowiednio wśród uczestników. OgólnyZakres punktacji FIS-40 odzwierciedlał obecność uczestników o różnym stopniu zmęczeniasurowość. Zdecydowana większość uczestników miała wynik silnego zmęczenia (98,8%), podczas gdy tylko1,2 procent miało łagodne/umiarkowane zmęczenie, co oceniono na podstawie kwestionariusza FIS-40 dostarczonego douczestników badania. Ponadto ponad 50 procent badanych brało co najmniej więcej niż jedenleki jak zwykle/rutynowe leczenie pielęgnacyjne (Tabela1). 

Tabela 1.Dane demograficzne i charakterystyka kliniczna uczestników na początku badania. Dane są wyrażonejako średnia± odchylenie standardowe (SD) dla zmiennych ciągłych i porównane przez Studentat-test,natomiast zmienne kategoryczne są podane jako liczby z procentami ( procent ) i porównywane przez Fisheradokładny test.

Skróty:BMI, wskaźnik masy ciała; DPB, rozkurczowe ciśnienie krwi; SBP, skurczowe ciśnienie krwi; FIS-40, 40-elementSkala wpływu zmęczenia; COMPASS-31, 31-item Composite Autonomic Symptom Score; PSQI, Pittsburgh SenWskaźnik jakości; SF-36, 36-item krótka ankieta dotycząca zdrowia; NLPZ, niesteroidowe leki przeciwzapalne.Thewskaźnik masy ciała (BMI) to waga w kilogramach podzielona przez kwadrat wzrostu w metrach.

3.2. Eksploracyjna analiza skupień przypadków na podstawie objawów

Po zastosowaniu bezstronnego grupowania hierarchicznego i optymalnego grupowania na podstawie koznacza badania przesiewowe w celu zidentyfikowania skupisk przypadków, jak wyszczególniono w Rozdziale2, zestaw trzech klastrówwykazujące znaczące różnice w ich całkowitym FIS-40, całkowitym KOMPASIE-31, całkowitym PSQI, fizycznymfunkcjonowania i uzyskano wyniki oceny bólu ciała (Tabela2). Wykreślanie wyszczególnionychróżnice w wynikach standardowych wyraźnie ilustrowały odwrotny rozkład między skalamicałkowity FIS-40, całkowity KOMPAS-31 i całkowity PSQI, które przypisują wyższe wyniki bardziej dotkliwemuobjawy i podskale SF-36, które działają odwrotnie. W rezultacie nasza kohorta 250 przypadkówpodzielono na klaster 1, obejmujący przypadki wykazujące cięższe objawy we wszystkich pięciuwybrane parametry (n = 94), klaster 2 ze sprawami prezentującymi umiarkowane uczucia (n = 107), oraz mniejszą grupę liczącą zaledwie 49 osób z łagodniejszymi objawami (skupienie 3) (ryc1). Pokazuje to, że badana kohorta zawierała głównie przypadki ciężkie do umiarkowanych, z<20%>łagodnie dotkniętych przypadkach. Definicja ciężkiego w skupieniu 1 obejmuje łączne wyniki FIS powyżejśrednio 145, wynik powyżej 65 dla całkowitego COMPASS-31, wynik powyżej 15 dla PSQI,oraz najniższe oceny w zakresie sprawności fizycznej i bólu ciała, co może przekładać się na:silniejszy fenotyp zmęczenia, któremu towarzyszy dysautonomia i problemy ze snem podczasdoświadczają wyższego poziomu bólu i upośledzonego funkcjonowania fizycznego niż innidwa klastry (tabela2, Rysunek1). 

Tabela 2.Grupowanie przypadków ME/CFS według różnic w objawach, poparte k-średnimianaliza. Dane są prezentowane jako średnia± SD dla każdej pozycji. Funkcjonowanie fizyczne i ból ciałazostały ocenione przez dwie pozycje z 36-item Short-Form Health Survey (SF-36)

3.3. Analiza różnicowa parametrów krwi oparta na klastrachNastępnie oceniliśmy potencjalne różnice w zmiennych analitycznych krwi tych trzechskupienia przypadków (skupienia 1, 2 i 3, jak zdefiniowano powyżej) przy użyciu analiz jednowymiarowych (patrzSekcja2 dla szczegółów). Analizy mające na celu wykrycie parametrów krwi w normiewartości zakresów referencyjnych przedstawiały istotne różnice między grupami przypadków (klastrami) orazmoże zatem być związany z objawami przypadku. Analiza statystyczna wykryła pięćparametry krwi spełniające wymagania, zp-wartości < 0.05 (Tabela3).

Tabela 3.Różnice w analizie krwi między skupieniami przypadków na podstawie objawów. Dane są prezentowane jakooznaczać± (SD) dla każdej zmiennej biochemicznej.

Jednak patrząc na różnice statystyczne między poszczególnymi zestawami par, mystwierdzili, że żaden z tych pięciu parametrów nie może indywidualnie różnicować klastrów 1, 2 i3. W przypadku poziomów hemoglobiny (Hb) tylko grupa umiarkowana (skupienie 2) różniła się odpozostałe dwa, obserwacja z niejasną interpretacją fizjologiczną. Dla neutrofililiczebności (NT), stwierdzono różnice między przypadkami ciężkimi (skupienie 1) i łagodnymi (skupienie 3),ale nie wykryto żadnego w grupie umiarkowanej. Poziom cholesterolu (COL), ciężkisprawy (klaster 1) przedstawił różnice z umiarkowanymi i łagodnymi (skupienie 2 i 3), przy czym nieróżnice między tymi dwoma ostatnimi, podczas gdy różnice w lipoproteinach o dużej gęstości (HDL)pojawił się między skupieniami 1 i 2, ale nie ze skupieniem 3. Wreszcie poziomy dopełnieniawspółczynnik 3(C3) przedstawił różnice między skupieniami ciężkimi i łagodnymi, a także międzyłagodny i umiarkowany, ale nie wykryto żadnych różnic między ciężkim a łagodnymumiarkowane skupienia, wskazujące potencjalną wartość jako marker do odróżnienia łagodnych przypadków odreszta (rysunek2). 

Wykresy pudełkowe różnic w analizie krwi między skupieniami opartymi na objawach ME/CFS. Skróty: Hb, hemoglobina;NT, liczba neutrofili; COL, cholesterol; HDL, lipoproteina o dużej gęstości; C3, uzupełnienie 3. Ustalono poziom istotnościwp< 0.05.="" dane="" przekraczające="" 1,5="" wartości="" przedziału="" międzykwartylowego,="" reprezentujące="" potencjalne="" wartości="" odstające,="" są="" wykreślane="" jako="" pojedyncze="">

Podsumowując, grupowanie przypadków na podstawie objawów, a następnie analiza różnicowa krwiics był nieskuteczny w wykrywaniu solidnych zmiennych pojedynczej krwi skorelowanych ze zdrowiem przypadkudotkliwość zdefiniowana w tych trzech klastrach. Ciekawe jednak, że niektóre z nichparametry krwi mogą w pewnym stopniu różnicować klastry, znaczenieco nie jest obecnie zrozumiałe.

3.4.1. Znakomite parametry krwi z nieprawidłowymi wartościamiNajwyższe wartości zmiennych analitycznych odbiegające od ustalonej zdrowej populacji referencyjnejzakresy obejmowały wit. D (60,4 proc.) reprezentowany głównie przez niedobór, LDL (55,6 proc.), dopełniaczczynnik C1q (42,8%) i cholesterol (26,4%), wszystkie wykazują ogólnie zwiększone wartości. Płytka krwioznacza, że ​​wartości objętości wydawały się zarówno zwiększone, jak i zmniejszone (Tabela4 i uzupełniająceRysunek S1).

Tabela 4.Najwyższe zmienne analizy krwi wykazały nieprawidłowe wartości w stosunku do wartości referencyjnych wnasza kohorta (n = 250). Liczba przypadków z nieprawidłowymi wartościami w stosunku do wartości referencyjnych orazwyświetlane są procenty ( procent ).

Kombinacje tych pięciu zmiennych analitycznych krwi, które obejmowały co najmniej 20 procentprzypadki w naszej kohorcie wykazały, że zarówno witamina D, jak i LDL były nieprawidłowe w 32,4 procentachuczestnicy. Inne kombinacje, takie jak niedobór witaminy D i wzrost C1q,or increased LDL with C1q or cholesterol involved over 20% of the participants (>50 przypadków).Ponieważ na wartości referencyjne witaminy D duży wpływ mają czynniki genetyczne i środowiskoweczynników, a testy służące do ilościowego określenia jego poziomów zazwyczaj wykazują zmienność ponad±10 procent, prowadzące do braku konsensusu co do globalnych wartości referencyjnych, postanowiliśmy to wykluczyćzmienna z naszej stratyfikowanej analizy niższego szczebla.Podobnie, ponieważ różnice stwierdzone w LDL i cholesterolu są niespecyficznie powiązanez chorobą, czasami pojawiającą się wraz z niedoborem witaminy D, bylinie były dalej realizowane, co oznacza, że ​​nie zostały wykorzystane do ustalenia warunków stratyfikacji naszegokohorta. Nieoczekiwane odkrycie dość znacznej części przypadków ME/CFS wykazującychzwiększone poziomy C1q i zmniejszone inhibitory C1 (odpowiednio 42,8% i 8,8%) (uzupełniająceTabela S1), wraz z niedoborem C1q związanym z autoimmunizacjąchoroby, takie jak toczeń rumieniowaty układowy, zmotywowało nas do postawienia hipotezyC1q jako potencjalny biomarker podtypowania ME/CFS.

3.4.2. Objawy Różnice między skupieniami przypadków C1q

Analiza dalsza po konserwatywnym 5-procentowym odcięciu powyżej maksymalnej normy C1qstratyfikacja wartości (próbki z C1q > 26,05 mg/dl, klaster 1, zn = 90; próbki zC1q < 26,05 mg/dl, klaster 2, zn = 160), jednak nie wykazały znaczących różnicw każdej skali objawów, z wyjątkiem tendencji do bólu ciała (p = 0.09), sugerując być może zwiększony ból w grupie z wysokimi poziomami C1q (średnie wartości były14,24 i 17,33, odpowiednio) (Tabela5)

3.4.3. Różnice w analizie krwi w grupach przypadków C1qOcena, czy grupa przypadków wykazujących podwyższony poziom C1q (skupienie 1,n = 90) może w tym samym czasie wykazywać dodatkowe różnice parametrów krwi, nawetgdy mieści się w normalnych wartościach referencyjnych dla grupy wykazującej normalne wartości C1q(klaster 2,n = 160), zastosowaliśmy test statystyczny po stratyfikacji kohorty, jak opisano wSekcja2. Wyniki wykazały istotne różnice w siedmiu parametrach krwi (p < 0.05),="">jak pokazano w tabeli6. 

Tabela 6.Różnice w analizie krwi między skupieniami przypadków C1q. Średnie grupowe i odchylenia standardowesą pokazane.

Ogólnie rzecz biorąc, klaster ze zwiększonymi poziomami C1q prezentował wyższą liczbę czerwonych krwinekliczebność, a także poziomy białka całkowitego, C3 i C4 oraz niższe IgG3, IgG4 i C1niestężenia, wskazujące na szlaki potencjalnie związane z podwyższonym poziomem C1q oraz,zatem potencjalnie istotne w leczeniu klinicznym ważnej podgrupy przypadków ME/CFS.

4. Dyskusja

Jak wcześniej wspomniano, stosowanie standardowych badań krwi przynajmniej w celu potwierdzenia potencjałuprzypadek ME/CFS (metoda diagnozy „triage”) i/lub zróżnicować podgrupy przypadków dlacele terapeutyczne i badawcze przyniosłyby wyraźne korzyści. W rzeczywistości może dobrzestanowią klucz do ujawnienia etiologii i ewolucji podgrupy ME/CFS.Chociaż metody grupowania oparte na objawach przypadku były przydatne w identyfikacjifenotypy autonomiczne w CFS [25], nie udało im się wykryć silnych korelacji krwimiędzy objawami a indywidualnymi parametrami krwi w naszej kohorcie (rysunek2). Podejściewykazywał jednak potencjał do różnicowania przypadków o ciężkim, umiarkowanym lub łagodnym przebieguuczucie zdefiniowane przez pięć punktów oceny objawów użytych do grupowania (tabele2 oraz3). Thefizjologiczne znaczenie wyników, w tym zwiększone poziomy C3 w ciężkich iumiarkowane w odniesieniu do łagodnie dotkniętych przypadków lub zwiększona liczba neutrofili w ciężkichME/CFS samodzielnie lub w połączeniu z LDL i cholesterolem, a także ich zaangażowaniew rozwoju lub utrzymaniu objawów, pozostaje do wyjaśnienia.Niemniej jednak obecność dużego odsetka przypadków ME/CFS (42,8% lub 107/250)ze zwiększoną ekspresją C1q, po raz pierwszy, może istotnie stanowić podstawę dla przyszłościPodtypowanie ME/CFS.

C1q działa jako pierwszy składnik klasycznego szlaku dopełniacza. Uzupełnieniesystem jest centralną częścią odporności wrodzonej z dwiema ważnymi funkcjami: służeniemjako system obronny przed atakującymi patogenami i usuwaniem martwych komórek lub szczątków. C1q rozpoznaje PAMP (wzorce molekularne związane z patogenami), w tymLPS (lipopolisacharyd) i poryny bakteryjne, oprócz rozpoznawania cząsteczektakie jak fosfatydyloseryna i dsDNA eksponowane na powierzchni umierających komórek. Zatem wykryte podwyższone poziomy C1q i innych składników dopełniacza w apodgrupa przypadków ME/CFS może wskazywać na stan aktywnej eferocytozy w kierunku walkiw przypadku infekcji lub podczas usuwania uszkodzonej tkanki. Ponadto przypadki z przewlekłymiaktywacja szlaku dopełniacza może z tego powodu stać się szczególnie wrażliwado PEM, możliwość, którą warto zbadać.Jest dobrze udokumentowane, że zarówno nieskuteczne, jak i nadmierna stymulacja dopełniaczasystem może być szkodliwy dla gospodarza i wiąże się ze zwiększoną podatnością na:infekcje, autoimmunizacja, przewlekłe stany zapalne i mikroangiopatia zakrzepowa, między innymiinni. Niektóre z tych procesów zostały powiązane z ME/CFS. Jednak w 10-teście . znaleźliśmy tylko kilka przypadków pozytywnej odporności na autoantygenyrun zastosowany do 250 uczestniczących spraw (tabela uzupełniająca S1).Obserwacja, że ​​wśród wielu mierzonych parametrów krwi te, o których wiadomo, że są:związane z funkcją C1q, tj. inhibitory C1 C3 i C4 wykazały istotne różnice międzygrupy (Tabela6) dodatkowo wspiera w tym funkcjonalny problem układu dopełniaczapodgrupa przypadków, być może z konsekwencjami w procesie krzepnięcia. Perspektywaistotne wydaje się zatem monitorowanie koagulopatii w tej podgrupie pacjentów.Niedawno Benavente i in. wykazali, że C1q działa jak ligand, który może bezpośrednio wiązaćszereg receptorów wcześniej niezidentyfikowanych jako partnerzy tej cząsteczki, w tymnastępujące białka: CD44, GPR62, BAI1, c-MET i ADCY5, które wyzwalają aktywacjędalsze ścieżki sygnalizacyjnea tym samym wpływają na różne aspekty neuroepitelialnebiologia komórek macierzystych. Odkrycie tych autorów, że C1q jest podwyższone po uszkodzeniu nerwu oraz pojawiające się powiązania C1q z chorobą neurodegeneracyjnąotwiera sięekscytująca możliwość, że zwiększone poziomy C1q mogą leżeć u podstaw funkcji poznawczych ME/CFSproblemy. C1q zmienia progresję choroby prionowej, reguluje przycinanie neuronów imoduluje proces fagocytozy przez mikroglej, jednocześnie reagując na płytkę amyloidowątworzenie. Niestety brak konkretnych instrumentów do szczegółowej oceny poznawczejuczestników lub narzędzia neuroobrazowania zostały użyte w tym badaniu.Wreszcie, fakt, że dwie warstwy prezentujące normalny vs. podwyższony poziom C1q wykazały:różnice w bólu mogą wskazywać na bezpośredni udział C1q w przypadku objawów. Możebyć istotne, aby uwzględnić bardziej szczegółową ocenę tego objawu za pomocą skoncentrowanego na bólukwestionariusze, takie jak FIQ (Fibromyalgia Impact Questionnaire) i/lub inne, w przyszłych badaniach nad rolą C1q w ME/CFS. Chociaż niepowodzenie ankiet innychniż SF-36 w celu wykrycia związanych z objawami różnic z poziomami C1q (Tabela5) prowadzą do naszakładając brak większego zaangażowania C1q w tym aspekcie choroby, wydaje się ciekawe, żewykres dwóch skupień wykazał przeciwne tendencje we wszystkich pięciu symptomach wybranych przezmetoda przesiewowa k-średnich w celu ustalenia skupień kohorty opartych na objawach (rysunki1 oraz3). Ponadto w 94 przypadkach w grupie „ciężkie” (skupienie 1) naszego opartego na objawachanaliza skupień (tabela2), około 39 procent (37/94) wykazało podwyższony poziom C1q, podczas gdy 61 procent(57/94) wykazali normalny poziom; w 107 przypadkach z grupy „umiarkowanej” (skupienie 2),35 procent (37/107) miało podwyższony C1q i 65 procent (70/107) normalny poziom C1q; w 49 przypadkachz grupy „łagodnej” (skupienie 3) 33 proc. (16/49) wykazało podwyższony poziom C1q, a 67 proc. (33/49)miał poziomy C1q w normalnych wartościach referencyjnych. Wskazuje to na ogólny stosunek 1:2 wynoszącyprzypadki ze zwiększonym poziomem C1q w grupie „łagodnej”, z niewielkim wzrostem tego wskaźnikaw „umiarkowanym” i jeszcze wyższym stosunku (1:1,5) w „ciężkim” klastrze, co sugerujezwiększona częstość występowania wysokich poziomów C1q z nasileniem choroby, pomimo brakuistotne korelacje między indywidualnymi wynikami objawów a poziomami C1q. Korelacjanie udało się również ustalić poziomów C1q o przewlekłości przypadków.

Dodatkowe parametry krwi, które wykazały nieprawidłowe wartości w dużej częściosoby z naszej kohorty, takie jak niedobór witaminy D, poziom LDL, cholesterol, poziom C3,lub średnia wartość płytek krwi, może dostarczyć istotnych informacji dotyczących opcji leczenia, aspektobecnie słabo rozumiane, co wymaga dalszego monitorowania w przyszłości.Należy wspomnieć, że chociaż ustalono różne wartości referencyjnena niedobór witaminy D, na przykład zalecenia amerykańskiego Instytutu z 2011 r.Medycyna (IOM) odnotowała minimalne stężenie wynoszące 52 nmol/L, podczas gdy US EndocrineWytyczne towarzystwa podały minimalne stężenie 78 nmol/L, zastosowany zakresw tym badaniu było tuż poniżej najniższego zakresu (50 nmol/l, tabela uzupełniająca S1), orazyet a large proportion of cases (>60 procent) wykazało niedobór witaminy D (tabela4). Dodatkowe ograniczeniaChociaż badana kohorta obejmowała znaczną liczbę osób(n = 250), ważność zewnętrzna danych pozostaje ograniczona do kobiet. Losowy wybór uczestnikówmoże prowadzić do bardziej reprezentatywnych wyników z punktu widzenia populacji; jednak niejednorodność podmiotuprzekłada się na zwiększoną zmienność, zagrażającą tworzeniu solidnościróżnice, być może istotne dla diagnozy ME/CFS. Brak dodatkowych istotnychżmudna, ale dyskretna analiza nie może wykluczyć różnic między przypadkami ME/CFStutaj wykonywane.

5. WnioskiPodsumowując, badanie to zidentyfikowało potencjalnego nowego gracza w patologii ME/CFS,składnik C1q układu dopełniacza, mający wpływ na ponad 40 procent przypadków. To odkrycietoruje drogę do zbadania standardowego testu laboratoryjnego opartego na C1q do wykrywania podtypów ME/CFSz istotnymi implikacjami klinicznymi i badawczymi. Zrozumienie podstawpatomechanizmy stojące za tym odkryciem są obecnie ograniczone, co pozwala na dalszą eksploracjęobserwacja.

Materiały uzupełniające:Rycina S1: Wykresy pudełkowe głównych zmiennych analitycznych krwi pokazujących odbiegające od normywartości referencyjne w naszej kohorcie (n = 250). Czerwone linie oznaczają normalne wartości zakresu. Czarna linia w obrębiepole to mediana w wartościach kwartyla. Normalne wartości są wyświetlane na zielono, podczas gdy wartości nieprawidłowesą pokazane na czerwono. Tabela S1: Zbiór danych kohorty.

Autorskie Wkłady:Konceptualizacja, JC-M. i EO; gromadzenie danych, JC-M. i JA-M.;analiza i interpretacja danych, JC-M., MZ, EA-P. i EO; pisanie – przygotowanie oryginalnego projektu,JC-M., MZ i EO; pisanie — recenzja i redakcja, wszyscy autorzy; pozyskiwanie finansowania, JC-M., JA-M.i EO Wszyscy autorzy przeczytali i zgodzili się na opublikowaną wersję rękopisu.

Finansowanie:Badanie to zostało częściowo sfinansowane przez Stowarzyszenie Pacjentów z ME/CFS iFibromialgia w Katalonii, Hiszpania (ACAF;(dostęp 23 marca 2019 r.) doJC-M. i JA-M. oraz przez UCV 2020-270-001 grant na rzecz EO

Oświadczenie instytucjonalnej komisji rewizyjnej:Protokół badania został przeprowadzony zgodnie z wytycznymiDeklaracji Helsińskiej i zatwierdzony przez lokalną Komisję Etyki Badań Klinicznych (VallSzpital Uniwersytecki d'Hebron, Barcelona, ​​Hiszpania; numer referencyjny IRB: CEIC/PR-AG-VITAE-2015,zatwierdzone w czerwcu 2015 r.).

Oświadczenie o świadomej zgodzie:Uzyskano pisemną świadomą zgodę od wszystkich podmiotów zaangażowanych w:badania.

Oświadczenie o dostępności danych:Zestawy danych znajdują się w tabeli uzupełniającej S1.

Podziękowanie:Autorzy dziękują wszystkim pacjentom ME/CFS (Association of ME/CFS and Fibromyalgiaw Katalonii w Hiszpanii), którzy wzięli udział we wspieraniu tego badania. Autorzy są równieższczególnie wdzięczny Ramonowi Sanmartinowi i Marcie Musté za wsparcie administracyjne i technicznew ułatwieniu pozyskiwania danych od uczestników badania. Instytut Badawczy Szpitala Vall d'Hebron(VHIR) jest członkiem programu CERCA (Network of Excellence Research Centres of Catalonia,Hiszpania).

Konflikt interesów:Autorzy deklarują brak konfliktu interesów. Fundator nie miał żadnej roli w projekciebadania; w gromadzeniu, analizie lub interpretacji danych, w pisaniu manuskryptu, lubw decyzji o opublikowaniu wyników.

ZNAJDŹ NAJLEPSZĄ BOTANICZNĄ OPIEKĘ HOLISTYCZNĄ W CELU ODŻYWANIA ZMĘCZENIA FIZYCZNEGO W ŻYCIU DZIENNYM

Nasza starannie opracowana ręcznie formuła Neuro Regen zawiera najlepiej przebadane zioła. Każdy z nich wykazuje niesamowity potencjał łagodzenia zespołu przewlekłego zmęczenia, a także ogólne wsparcie nerwów i neuronów.

Zawiera:

Wyciąg z Cistanche #5-

Cistanchejest najczęściej stosowanym ziołem na receptę tradycyjnej medycyny chińskiej w celu łagodzenia zmęczenia fizycznego. Faktycznie,Cistanchejest rodzajem materiału spożywczego. Na teoretycznych podstawach medycyny tradycyjnej, współczesna medycyna przeprowadziła również wiele badań nadprzeciwzmęczeniowyEfektCistanche. Eksperymenty wykazały, żeprzeciwzmęczeniowyEfektCistanchewynika z poprawy narządów ciała Cistanche. Cistanche może poprawić funkcje nerek i wątroby, osiągając w ten sposóbprzeciwzmęczeniowyefekt. Poniżej znajduje się przegląd tego, w jaki sposób Cistanche może złagodzić zmęczenie.