Wpływ cukrzycy na funkcję seksualną, histomorfologię i ekspresję aktyny mięśniowej w jamistym ciele penisa u szczurów
Mar 05, 2025
Abstrakcyjny:
Cel:ObserwowaćFunkcja seksualna cukrzycyModel szczury i badaj możliwy mechanizm wtórnej dysfunkcji seksualnej spowodowany hiperglikemią.
MetodyEksperymentalne szczury zostały losowo podzielone na grupę pustą (n =5) iGrupa cukrzycy(n =15). Po pomyślnym skonstruowaniu modelu zwierząt cukrzycy oceniono funkcję seksualną dwóch grup. Zaobserwowano charakterystykę histologiczną jąder w dwóch grupach. Zmierzono ekspresję aktyny mięśniowej (-SMA) w tkance prącia dwóch grup. Wyniki poziomy hormonów płciowych w surowicy były znacznie zmniejszone (str<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
WniosekZmniejszone poziomy hormonów płciowych, zmniejszona liczba komórek mięśni gładkich w jamistym ciele penisa, zmniejszona ekspresja -SMA w jamistym ciele penisa, nieuporządkowana struktura tkanki śródmiąższowej jądra, morfologiczne zmiany komórek mięśni gładkich i pogorszenie zwłóknienia u cukrzycy szczurów są ważnymi fenotypowymi cechami tej choroby. Badanie diagnozy i leczenia tej choroby za pomocą tych cech fenotypowych będzie miało ogromne znaczenie.
Słowa kluczowe:cukrzyca;zaburzenie erekcji; funkcja seksualna; hormon seksualny; - ekspresja aktyny mięśni gładkich
Ziołowe suplementy cistanche do zaburzeń erekcji spowodowane cukrzycą
Cukrzyca (DM)od dawna jest centralnym punktem uwagi zarówno w kraju, jak i za granicą ze względu na wysoką częstość występowania i rozpowszechnienia [1]. Różne powikłania wywołane przez DM znacząco wpływają na jakość życia pacjentów. Wśród nich występowaniezaburzenia erekcji (red.)u mężczyznPacjenci z DMjest wyraźnie podniesiony. Obecnie DM stał się grupą wysokiego ryzyka dla ED [2–3]. Dlatego prowadzenie dogłębnych badań nadED indukowane przez DM (DMed)ma ogromne znaczenie. Badanie to ma na celu obserwowanie wpływu DM na funkcję erekcji, hormony płciowe, poziomy ekspresji -gładki aktyny mięśni (-SMA) w ciele jamistej prącia oraz morfologii śródmiąższowych i śródmiąższowych jąderprąski przepastny mięsień gładkiTkanki u szczurów, wstępnie badając potencjalne patologiczne podstawy ED indukowane przez DM.
1 Materiały i metody
1.1 Zwierzęta eksperymentalne i odczynniki
Wybrano dwudziestu dorosłych samców SD w klasie SPF o jednolitym masie ciała. Główne odczynniki eksperymentalne obejmowały streptozotocynę (STZ) i apomorfinę (APO), a także przeciwciała wymagane do wykrywania ekspresji -SMA. Badanie zostało zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki Zwierząt i Etyki Szpitala Dongzhimen, Pekin University of Chinese Medicine (nr 17-04).
1.2 Metody eksperymentalne
1.2.1 Ustanowienie modelu szczura cukrzycowego
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/l w dowolnym momencie po 5 dniach odstraszania dootrzewnowego STZ uznano za standard dla pomyślnego ustanowienia modelu DM [4].
1.2.2 Test funkcji erekcji u szczurów
Po potwierdzeniu udanego modelowania DM szczury zważono i umieszczono w przezroczystym szklanym pudełku. Rozpuszczalnik APO (100 ug/kg) wstrzyknięto podskórnie z tyłu szyi w oparciu o masę ciała. Otaczające środowisko było milcze, a oświetlenie wewnętrzne dostosowano do poziomu wystarczającego do obserwacji erekcji prącia u szczurów. Zaobserwowano liczbę erekcji prącia w ciągu 30 minut po wstrzyknięciu podskórnym i zarejestrowano. Kryteria erekcji prącia: powiększenie prącia, wycofanie napletka, narażenie łobuzów, które towarzyszą przekrwienie i zaczerwienienie oraz widoczność środkowych i dolnych segmentów penisa.
1.2.3 Pomiar hormonów płciowych u szczurów
Poziomy hormonów płciowych w surowicy w dwóch grupach mierzono metodą oceny radiowej, zgodnie z konkretnymi procedurami opisanymi w instrukcjach zestawu radioimmunologicznego.
1.2.4 Obserwacja histopatologiczna tkanki śródmiąższowej jąder
Po zebraniu krwi z aorty brzusznej szczurów prawe jądro było równomiernie ekstrahowane. Testka przemyto buforem PBS i całkowicie utrwalono paraformaldehydem przez 72 godziny. Tkankę osadzono w parafinie, podzielono na sekcję, zabarwioną hematoksyliną-eozyną (H&E) i obserwowano dla właściwości histologicznych.
1.2.5 Obserwacja zwłóknienia jamistego prącia u szczurów
Po zebraniu krwi z aorty brzucha tkanka prącia wycięto i przemyto buforem PBS. Tkankę w pełni utrwalono w paraformaldehydzie przez 72 godziny, osadzone w parafinie, sekcji i wybarwiono trichromem Massona. W względnej zawartości włókien mięśni gładkich/kolagenów w przepastnej tkance prącia każdej grupy zaobserwowano pod mikroskopem.
1.2.6 Pomiar poziomów ekspresji -SMA w przepastnej tkance prącia
Tkanka jamistej prącia była poddawana rutynowej deparafinizacji do wody, przemywano buforem PBS przez 5 minut i poddawany naprawa ciepła mikrofalowego w buforze cytrynianowym (pH 6. 0) przez 20 minut. Po schłodzeniu do temperatury pokojowej tkanka przemyto trzy razy PBS, 3 minuty za każdym razem. 3% roztwór nadtlenku wodoru zastosowano w ciemnym pomieszczeniu w temperaturze pokojowej przez 15 minut, a następnie mycie PBS. Następnie dodano przeciwciało SMA, a tkankę inkubowano przez noc w 4 stopnie. Po powrocie do temperatury pokojowej tkanka przemyto PBS, inkubowano z wtórnym przeciwciałem w temperaturze 37 stopni przez 30 minut i ponownie przemyto PBS. DAB zastosowano do rozwoju kolorów w ciemności, a reakcję zakończono wodą. PBS zastosowano jako zastępcę pierwotnego przeciwciała jako kontroli negatywnej, a analizę ilościową przeprowadzono analizatorem obrazu.
1.3 Metody statystyczne
Dane zebrane w tym badaniu zorganizowano przy użyciu Microsoft Excel, a następnie przeanalizowano za pomocą SPSS 25. 0 do testowania statystycznego. Dane każdej grupy wyrażono jako średnią ± odchylenie standardowe (X̄ ± S). Wartość p mniejszą niż 0. 0 5 (p <0,05) uznano za statystycznie istotną.
2 wyniki
2.1 Porównanie masy ciała i zmian glukozy we krwi między dwiema grupami
Patrz Tabela 1.
2.2 Porównanie wskaźników erekcji prącia między dwiema grupami
Patrz Tabela 2.
2.3 Porównanie poziomów hormonów płciowych w surowicy między dwiema grupami
Patrz Tabela 3.
2.4 Patologiczna obserwacja tkanki śródmiąższowej jąder między dwiema grupami
Tkanka śródmiąższowa jąder grupy kontrolnej wydawała się normalna. Komórki śródmiąższowe były okrągłe lub owalne w kształcie, z regularną morfologią, normalnym odstępem międzykomórkowym, uporządkowanym układem i bez znacznego zmniejszenia liczby komórek. Natomiast grupa cukrzycowa wykazała obrzęk śródmiąższowy jąder, nieregularną morfologię komórek, luźne przestrzenie międzykomórkowe, nieuporządkowane układ, zakłócone struktury wewnątrzkomórkowe i oznaki odróżnicowania w niektórych komórkach, tracąc cechy strukturalne. Patrz rysunek 1.
| Grupa | Rozmiar próbki (N) | Wyjściowa masa ciała (g) | Masa ciała 5 dni po modelowaniu (G) | Glukoza we krwi 5 dni po modelowaniu (MMOL/L) | Masa ciała przed poświęceniem (g) | Glukoza we krwi przed poświęceniem (MMOL/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Grupa cukrzycy | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Grupa kontrolna | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Notatka: W porównaniu do grupy kontrolnej,P <0. 01.
Tabela 2: Porównanie współczynników erekcji prącia między dwiema grupami
| Grupa | Rozmiar próbki (N) | Pozytywne przypadki w teście erekcji (N) | Wskaźnik erekcji (%) |
|---|---|---|---|
| Grupa cukrzycy | 15 | 5 | 33.3** |
| Grupa kontrolna | 5 | 4 | 80.0 |
Notatka: W porównaniu do grupy kontrolnej,P <0. 01.
Tabela 3: Porównanie poziomów hormonów płciowych w surowicy między dwiema grupami (X̄ ± S)
| Grupa | Rozmiar próbki (N) | T (nmol·l⁻¹) | Fsh (iu · l⁻ czy) | LH (ng · l⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Grupa cukrzycy | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Grupa kontrolna | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Notatka: W porównaniu do grupy kontrolnej,P <0. 01.
2.4 Patologiczna obserwacja tkanki śródmiąższowej jąder między dwiema grupami
W grupie kontrolnej tkanka śródmiąższowa jąder wydawała się normalna, przy czym komórki śródmiąższowe były okrągłe lub owalne, wykazując regularną morfologię, normalne przestrzenie międzykomórkowe i uporządkowane rozmieszczenie. Liczba komórek nie wykazywała znaczącej redukcji. W porównaniu z grupą kontrolną grupa cukrzycowa wykazywała obrzęk śródmiąższowy jąder, nieregularnie ukształtowane komórki, luźne przestrzenie międzykomórkowe, nieuporządkowane układ, zaburzone struktury wewnątrzkomórkowe i oznaki dedyferentowania w niektórych komórkach, tracąc cechy strukturalne. Patrz rysunek 1.
2.5 Obserwacja przepastnej zwłóknienia prącia między dwiema grupami
Barwienie Massona zastosowano do obserwowania różnic w stopniu zwłóknienia w tkance jamistej prącia między dwiema grupami. W grupie cukrzycowej odsetek włókien kolagenowych był znacznie wyższy, ze wzrostem zawartości względnej, podczas gdy odsetek komórek mięśni gładkich był mniejszy, ze spadkiem zawartości względnej. Patrz rysunek 2.
Ryc. 1 Zabarwienie wyników jąder w dwóch grupach (× 10, n=3)
Ryc. 2 Wyniki barwienia Masson Corpora cavernosa w dwóch grupach (× 4, N=3))
2.6 Ekspresja -SMA w Corpus Cavernosum Gromca Cells w dwóch grupach
Immunohistochemię zastosowano do wykrycia ekspresji -SMA w dwóch grupach. W porównaniu z grupą pustą, pomarszczona brązowo -żółta część w grupie cukrzycowej została znacznie zmniejszona, to znaczy dodatnia ekspresja komórek -SMA w grupie cukrzycowej została znacznie zmniejszona. Patrz rysunek 3.
Ryc. 3 Wyniki immunohistochemii Corpus cavernosum w dwóch grupach (× 10, N=3))
