plJęzyk
Strona główna / Wiedza / Treści

Wiedza

Wrodzone i nabyte zaburzenia odporności leżące u podstaw chorób autoimmunologicznych: powiązania genetyczne (2)

Dec 29, 2023


Choroby limfocytów T i autoimmunologiczne

Ekspansja samoreaktywnych limfocytów T jest biomarkerem wielu chorób autoimmunologicznych, niezbędnym do organizowania zarówno wrodzonych, jak i nabytych odpowiedzi immunologicznych oraz wywoływania uszkodzeń tkanek. Wśród nich głównym czynnikiem przyczyniającym się do wydzielania limfocytów T CD4+ jest wydzielanie kilku cytokin, chemokin i interakcja komórka-komórka. Jak omówiliśmy powyżej, GWAS są szeroko stosowane do identyfikacji genów podatności na choroby autoimmunologiczne i zidentyfikowano kilka powiązanych mutacji w limfocytach T, w tym SNP w IL23R, IL17A/F, IL21, JAK2, STAT2, CARD9, CCR6 itp. (Kochi, 2016). Po aktywacji przez komórki prezentujące antygen (APC) limfocyty T CD4+ różnicują się w odrębne linie rodowe w sposób zależny od kontekstu, posiadające unikalne funkcje, w tym pomocnik T (Th) 1, Th2, Th17, Th9, pomocnik pęcherzykowy T (Tfh) i regulatorowe komórki T (Treg).

Desert ginseng-Improve immunity (19)

Cistanche korzyści dla mężczyzn-wzmocnienie układu odpornościowego

Podzbiory limfocytów T i choroby autoimmunologiczne

Komórki Th1/Th2

Trzy dekady temu Mosmann i Coffman podzielili komórki T pomocnicze na dwie grupy: komórki T Th1 i Th2. Komórki Th1 wyrażają IFN- i są ważne w odporności komórkowej i chorobach autoimmunologicznych, podczas gdy komórki Th2 wyrażają IL-4, IL-5 i IL-13 i są powiązane z odpornością humoralną i chorobami alergicznymi (Mosmann i Coffman, 1989). Paradygmat binarny Th1/Th2 dominował przez prawie dwie dekady, aż do odkrycia na początku tego stulecia kolejnych nowych mechanizmów w mysich modelach chorób autoimmunologicznych. Komórki Th1 odgrywają ważną rolę patogenną w chorobach autoimmunologicznych. Rozwój komórek Th1 jest indukowany przez IL-12 i IFN- i jest ściśle regulowany przez główny czynnik transkrypcyjny T-bet. Jedną z głównych funkcji komórek Th1 jest wydzielanie IFN-, ważnej cytokiny prozapalnej, która aktywuje makrofagi i zwiększa ekspresję MHC-II na APC. Podwyższoną ekspresję IFN- stwierdzono w kilku chorobach autoimmunologicznych, w tym u pacjentów z IBD, stwardnieniem rozsianym, RZS, SLE itp. Limfocyty T naciekające ośrodkowy układ nerwowy podczas eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia (EAE), mysiego modelu stwardnienia rozsianego, wykazały podwyższony poziom IFN- i wydzielanie limfotoksyny, ale nie IL-4, co wskazuje, że w tym modelu niezbędne są komórki Th1 zamiast Th2 (Ando i in., 1989). Jednakże myszy z niedoborem IFN są nadal podatne na EAE. Późniejsze badania wykazały, że IL-23 zamiast IL-12, która ma wspólny łańcuch p40 z IL-23, jest niezbędna dla patogeniczności EAE (Cua i in., 2003), co prowadzi do identyfikacja komórek Th17 o podłożu autoimmunologicznym i badanie funkcji komórek Th1 w chorobach autoimmunologicznych. Poniższe badania wykazały, że IL-12 i IL-23, a także modulowane komórki Th1 i Th17, indukują różne typy EAE o różnych fenotypach patologicznych i zmianach chorobowych (Kroenke i in., 2008). Co więcej, komórki Th1 ułatwiają komórkom Th17 wejście do ośrodkowego układu nerwowego (O'Connor i in., 2008). Podobnie patogenną funkcję komórek Th1, w tym ich cząsteczki efektorowej IFN- lub czynników regulatorowych T-bet i STAT4, stwierdzono w przypadku innych chorób autoimmunologicznych, w tym eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka (EAU), zapalenia stawów wywołanego kolagenem (CIA) i zapalenia jelita grubego (Raphael i in., 2015).

Rozwój komórek Th2 jest indukowany głównie przez IL-4 i IL-2 i wykorzystuje GATA3 jako główny czynnik transkrypcyjny. W porównaniu z komórkami Th1 i Th17, funkcja komórek Th2 w regulacji chorób autoimmunologicznych jest ograniczona i słabiej zbadana. Patogenna rola komórek Th2 w astmie była szeroko badana i zatwierdzono kilka leków ukierunkowanych na cytokiny związane z Th2-, które są skuteczne u pacjentów z ciężką astmą (Lee i in., 2021; León i Ballesteros-Tato, 2021 ). U myszy z niedoborem Lyn, ważnego negatywnego regulatora Th2, rozwija się silna odpowiedź Th2 w przypadku ciężkiej astmy (Beavitt i in., 2005). Co ciekawe, u tych myszy rozwija się spontaniczna choroba autoimmunologiczna, która naśladuje toczniopodobne zapalenie nerek w późnym etapie życia, ze zwiększoną samoreaktywną IgE, a usunięcie Il4 znacznie zmniejsza wytwarzanie IgE i łagodzi nasilenie choroby (Charles i in., 2010). Biorąc pod uwagę funkcję IL-4 w indukowaniu zmiany klasy immunoglobulin komórek B na IgG1 i IgE, Th2 może odgrywać ważną rolę w pośredniczeniu w odpowiedziach autoimmunologicznych zależnych od limfocytów B.

Komórki Th17

Odkrycie unikalnej funkcji IL-23 w indukowaniu komórek T wytwarzających IL-17A i chorób autoimmunologicznych, ale nie IL-12, induktora komórek Th1, który ma wspólną podjednostkę p40 z IL-23 silnie sugeruje obecność odrębnego podzbioru komórek T (Cua i in., 2003). W 2005 roku nasza grupa wraz z innymi osobami utworzyła nowy podzbiór limfocytów T, limfocyty Th17, w oparciu o ich funkcję wydzielania IL-17A i niezależne wymagania rozwojowe.

Pomimo ich znaczenia w ochronnych odpowiedziach immunologicznych gospodarza i utrzymaniu homeostazy tkanek, nadmierna odpowiedź komórek Th17 powoduje różne stany zapalne tkanek i liczne choroby autoimmunologiczne, na co wskazuje wysoka częstość występowania komórek Th17 we krwi lub dotkniętych narządach. W stwardnieniu rozsianym od dawna stwierdzano podwyższony poziom IL-17A w zmianach chorobowych u aktywnych pacjentów, a komórki Th17 skutecznie migrują przez barierę krew-mózg i zabijają neurony. U pacjentów z zapaleniem stawów poziom IL-17A w płynie stawowym znacząco wzrasta, co bezpośrednio indukuje osteoklastogenezę. Podobnie ekspresja IL-17A również wzrosła zarówno u pacjentów z aktywną chorobą CD, jak i u pacjentów z wrzodziejącym zapaleniem jelita grubego (Korn i in., 2009). Co więcej, ekspresja IL-23p19, IL-23R i IL{11}A w błonach śluzowych była podwyższona u pacjentów nieodpowiadających na terapię anty-TNF w porównaniu z pacjentami, którzy zareagowali (Schmitt i wsp., 2019). GWAS powiązał także kilka mutacji związanych z nabywaniem funkcji w osi Th17/IL-17 z wieloma chorobami autoimmunologicznymi, w tym SNP w IL23R, CCR6 i IL17A/F (Kochi, 2016). Zasadnicza przyczynowa rola komórek Th17 została dodatkowo potwierdzona w dużej kohorcie badań klinicznych ukierunkowanych na kluczowe elementy szlaków związanych z Th17-, w tym IL-6, IL-23, IL{{27 }}, STAT3 i IL-17RA, które zostaną omówione później. Rozwój komórek Th17 jest ściśle regulowany przez modyfikacje epigenetyczne, sieci transkrypcyjne i wiele cytokin. ROR t i ROR , silnie wyrażane w komórkach Th17 w porównaniu z innymi liniami, są dwoma zasadniczymi czynnikami transkrypcyjnymi dla komórek Th17. Połączenie TGF- i IL-6 jest niezbędne do inicjacji komórek Th17, a IL-1 i IL-23 dodatkowo wzmacniają odpowiedź Th17. Jednak u ludzi IL-21 zamiast IL-6 odgrywa większą rolę w indukowaniu komórek Th17 w połączeniu z TGF- (Dong, 2021). Patogeniczność komórek Th17 jest specyficznie regulowana. IL-23 jest cytokiną krytyczną indukującą patogenne komórki Th17, a także TGF- 3 i SAA. Badanie na pojedynczych komórkach ujawniło również kilka regulatorów patogeniczności, w tym Gpr65, Plzp, Toso i Cd5l. Co ciekawe, ostatnie badania wykazały, że IL-17A z kolei ogranicza patogenność Th17 poprzez indukcję autokrynnego wydzielania IL-24 (Chong i in., 2020).

Czynniki środowiskowe są również zaangażowane w regulację rozwoju i patogeniczności komórek Th17. Mikroflora, taka jak bakterie komensalne SFB, jest niezbędna do indukowania jelitowych komórek Th17 w stanie stacjonarnym, podczas gdy patogeny, takie jak Citrobacter rodentium, indukują transkrypcję i metabolizm różnych patogennych komórek Th17 (Omenetti i in., 2019). Diety ketogenne zmniejszają liczbę komórek Th17 jelit poprzez hamowanie wzrostu bifidobakterii (Ang i in., 2020). Co więcej, nie tylko mikroflora jelitowa, ale także patobionty związane ze stanem zapalnym jamy ustnej, indukują odpowiedź komórek Th17 i sprzyjają zapaleniu jelita grubego (Kitamoto i in., 2020). Co ważne, komórki Th17 z podwójnym TCR, które rozpoznają zarówno SFB, jak i własny antygen, wywołują autoimmunizację płuc (Bradley i in., 2017), podkreślając potencjalne znaczenie komórek Th17 indukowanych przez mikrobiotę w odpowiedziach autoimmunologicznych. Odkryliśmy również, że gorączka, częsty objaw wielu chorób autoimmunologicznych, sprzyja różnicowaniu i patogeniczności komórek Th17 poprzez promowanie SUMOilacji SMAD4 (Wang i in., 2020). Dieta bogata w sól również znacznie zwiększa różnicowanie komórek Th17 i zaostrza choroby autoimmunologiczne związane z Th19, indukując ekspresję genów związanych ze stanem zapalnym, takich jak Tnf, Ccl20, Il23r i Csf2 (Kleinewietfeld i in., 2013). W przeciwieństwie do stosunkowo stabilnych komórek Th1 i Th2, komórki Th17 są wysoce niejednorodne i plastyczne w odpowiedzi na różne warunki środowiskowe. Korzystając z myszy mapujących los Il17acreRosaYFP, badacze odkryli, że komórki Th17 mogą utracić zdolność wydzielania IL-17A i zacząć wyrażać IFN- w modelu EAE, a prawie wszystkie CD- -wyrażające IFN4+ Limfocyty T w rdzeniu kręgowym przekształcają się z byłych komórek Th17. Komórki Th17 z niedoborem Tbx21, który koduje T-bet, nie mogą indukować EAE, co dodatkowo podkreśla znaczenie plastyczności komórek Th17 w napędzanych chorobach autoimmunologicznych (Kamali i in., 2019). W plastrze Peyera komórki Th17 odbiegają od fenotypu Tfh wyrażającego PD-1 i CXCR5 i są niezbędne do wytwarzania IgA przez komórki GC B (Hirota i in., 2013). Później zidentyfikowano komórki Th17 wykazujące ekspresję IL-10, które przekształcają się w komórki Tr1-podobne, zarówno w stanie stacjonarnym, jak i w stanie prozapalnym w jelitach (Gagliani i in., 2015). Komórki ex-Th17 mogą również przekształcić się w komórki wydzielające IL-4-w modelu astmy (Tortola i in., 2020), a komórki Th17 tracące ekspresję ROR t spontanicznie przekształcają się w IL-4-wyrażające Th{{ 56}}podobnych komórek (Chi i in., 2022). Wszystkie te odkrycia prowadzą do potencjalnych rozważań nad celowaniem terapeutycznym w komórki Th17. IL-17A, główna cytokina sygnaturowa Th17, odgrywa kluczową rolę w wywoływaniu zapalenia i uszkodzenia tkanek w różnych chorobach autoimmunologicznych poprzez modulowanie odpowiedzi komórkowych. IL-17A przekazuje dominujący sygnał w komórkach niehematopoetycznych poprzez IL-17RA i IL-17RC, takie jak fibroblasty, komórki nabłonkowe i komórki śródbłonka (Korn i in., 2009). IL-17A indukuje kaskadową odpowiedź zapalną poprzez pobudzanie wydzielania przez te komórki dużej grupy cytokin zapalnych, chemokin, metaloproteinaz macierzy i białek przeciwdrobnoustrojowych. CXCL1, CXCL2 i CXCL8 dodatkowo rekrutują komórki szpikowe, takie jak neutrofile, do tkanek objętych stanem zapalnym. IL-17A uczestniczy także w odporności humoralnej, regulując reakcję ośrodka rozrodczego i wytwarzanie przeciwciał. U pacjentów z pSS zwiększone IL-17A jest skorelowane z tworzeniem się GC i poziomem autoprzeciwciał (Verstappen i in., 2018). IL-17A bezpośrednio promuje lokalizację komórek Tfh w strefach światła, proliferację komórek B/przełączanie klas izotypów oraz interakcje komórek T i B poprzez aktywację komórek zrębowych w celu wspierania organizacji pęcherzyków (Subbarayal i in., 2016). Oprócz komórek Th17, IL-17A ulega także ekspresji w kilku podzbiorach komórek odporności wrodzonej, w tym ILC3, δT, NK, NKT i neutrofilach, które odgrywają podobne lub zbędne role, ale działają jako komórki reagujące pierwszego rzutu w odpowiedzi na różne wyzwania immunologiczne lub wymagania gospodarza (Dong, 2021).

Desert ginseng-Improve immunity (20)

cistanche tubulosa – poprawiają układ odpornościowy

Komórki Tfh

Jedną z podstawowych funkcji limfocytów T CD4+ jest wspomaganie limfocytów B i odpowiedzi przeciwciał. Komórki Tfh to wyspecjalizowany podzbiór, który pomaga w tworzeniu ośrodków rozrodczych (GC), unikalnej struktury w pęcherzykach wtórnych narządów limfatycznych i pomaga komórkom B przejść hipermutację somatyczną immunoglobulin, zmianę klasy izotypu przeciwciał i różnicowanie do osocza lub komórek B pamięci. Początkowo opisano je w ludzkich migdałkach, gdzie kilka grup zidentyfikowało odrębną populację CD4+ wykazującą silną ekspresję markera powierzchniowego CXCR5, a także cząsteczki kostymulujące ICOS i PD-1, cytokina IL-21 i specyficzny czynnik transkrypcyjny BCL-6. Cząsteczki powierzchniowe ICOS, PD-1 i CD40L bezpośrednio wiążą się ze swoimi receptorami wyrażanymi na komórkach B i w ten sposób indukują proliferację, dojrzewanie i różnicowanie komórek B, co jest również promowane przez cytokiny wydzielane przez Tfh, takie jak IL{{10 }} (Crotty, 2011). Interakcja gruźlicy i wytwarzanie cytokin wspierają komórki GC B wytwarzające przeciwciała o wysokim powinowactwie po stymulacji antygenem. Komórki Tfh odgrywają ważną rolę w wywoływaniu odpowiedzi autoimmunologicznych, szczególnie w przypadku chorób, w których pośredniczą autoprzeciwciała lub chorób powiązanych. U pacjentów z aktywnym SLE od dawna obserwuje się autoreaktywne komórki GC B i zwiększoną liczbę krążących komórek Tfh (cTfh) we krwi, ze zwiększoną odpowiedzią cTfh2, ale zmniejszoną odpowiedzią cTfh1. Zmienione komórki cTfh są skorelowane z ciężkością choroby, liczebnością komórek plazmatycznych i mianem autoprzeciwciał. Ponadto w toczniowym zapaleniu nerek zaobserwowano funkcjonalne komórki Tfh i agregaty gruźlicy (Blanco i in., 2016). Podobnie zwiększoną liczbę komórek cTfh wykazujących wysoki poziom ICOS i PD-1 stwierdzono także w przypadku kilku innych chorób autoimmunologicznych, takich jak T1D, RA, stwardnienie rozsiane i pSS (Ueno i in., 2015). Tfh obejmuje ektopową strukturę limfoidalną (ELS), która wspiera odpowiedź autoprzeciwciał przez limfocyty B w tkankach obwodowych, wykryto także w tkance maziowej u pacjentów z RZS, oponach mózgowych u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym i gruczołach ślinowych u pacjentów z SS (Pitzalis i wsp., 2014). Patogenna rola komórek Tfh w chorobach autoimmunologicznych została dodatkowo potwierdzona na modelach mysich. Myszy Sanroque (Roquinsan), z niekontrolowaną ogólnoustrojową produkcją autoprzeciwciał i zwiększoną liczbą komórek Tfh w pęcherzykach limfocytów B, mają fenotypy autoimmunologiczne podobne do tocznia. Wyczerpanie Bcl6 jest wystarczające do złagodzenia fenotypu tocznia, radykalnie zmniejszając spontaniczne tworzenie GC i liczbę komórek Tfh, co bezpośrednio ustala sprawczą rolę komórek Tfh w wywoływaniu odpowiedzi autoimmunologicznej (Linterman i in., 2009). Konsekwentnie ustalono także patogenną funkcję sygnalizacji BCL-6, ICOS, OX40, CXCR5, SAP i IL-21 w modelach tocznia, eksperymentalnym modelu zespołu Sjögrena (ESS) lub modelach RA (Gensous i in. in., 2018). Tymczasem zidentyfikowano zasadniczą rolę komórek Tfh wykazujących ekspresję IFN lub IL-4/IL-13 w odpowiedzi odpowiednio na infekcję wirusową i alergię (Feng i in., 2022; Gowthaman i in., 2019). To, czy odpowiedź przeciwciał związana z plastycznością Tfh ma związek z chorobami autoimmunologicznymi, pozostaje do dalszej analizy.

Wieloetapowe różnicowanie komórek Tfh jest ściśle regulowane, ale nie jest jeszcze w pełni poznane. Aktywacja DC umożliwiła limfocytom T CD4+ regulującym w górę ekspresję CXCR5 i obniżającym ekspresję CCR7 na migrację do granicy gruźlicy. Następująca interakcja gruźlicy poprzez ICOS-ICOSL i peptyd MHC dodatkowo napędza dojrzewanie GC-Tfh i sprzyja tworzeniu się GC (Crotty, 2011). Nasza grupa wraz z innymi zidentyfikowała BCL-6 jako główny czynnik transkrypcyjny dla rozwoju komórek Tfh, podczas gdy ASCL2, ale nie BCL-6, bezpośrednio promuje transkrypcję Cxcr5 i dodatkowo sprzyja migracji Tfh do pęcherzyków. TOX2, indukowany przez BCL-6, jest również potrzebny do optymalnego różnicowania Tfh i promuje ekspresję BCL-6 w pętli sprzężenia zwrotnego (Dong, 2021). Różnicowanie komórek Tfh jest również regulowane przez miliony cytokin. Niedobór sygnalizacji zarówno IL-6, jak i IL-21, ale nie samej cytokiny, znacząco zmniejsza liczbę Tfh, co sugeruje potencjalną nadmiarową funkcję tych cytokin, podczas gdy IL-7 i IL{{21 }} hamują rozwój Tfh. U ludzi do indukcji komórek Tfh wymagane jest inne środowisko cytokin. IL-12 jest ważniejsza w indukowaniu ekspresji BCL-6 na wczesnym etapie, razem z TGF- i IL-23, w celu indukowania ekspresji różnych genów sygnatur Tfh, w tym CXCR5, ICOS, IL- 21, BATF i BCL-6 (Crotty, 2014). Czynniki środowiskowe, takie jak mikroflora jelitowa, są również zaangażowane w ogólnoustrojową odpowiedź komórek Tfh. U pacjentów z RZS indukowane SFB komórki Tfh w plastrze Peyera dostają się do krążenia ogólnoustrojowego i zwiększają produkcję autoprzeciwciał, co zaostrza zapalenie stawów (Teng i in., 2016). Leczenie myszy z zapaleniem stawów antybiotykami znacząco zahamowało postęp choroby poprzez zmniejszoną liczbę komórek Tfh, tworzenie ośrodków rozrodczych i produkcję autoprzeciwciał (Block i in., 2016).

Komórki Treg

Od dawna obserwowano funkcjonalnie odrębny podzbiór komórek T, który utrzymuje samotolerancję i homeostazę, ze specyficzną ekspresją czynnika transkrypcyjnego FOXP3, określaną jako komórki Treg. Rozwój komórek Treg jest indukowany przez kilka cytokin, takich jak TGF-, IL-2, TSLP, IL-33 i IL- 6, czynniki środowiskowe, mikrobiomy, takie jak szczepy Clostridia, oraz metabolizm mikroflory jelitowej i diety, takiej jak kwasy żółciowe, kwas retinowy, krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe i aminokwasy (Kanamori i in., 2016).

U ludzi zaburzony FOXP3, główny czynnik transkrypcyjny komórek Treg, powoduje rozregulowanie układu odpornościowego, poliendokrynopatię i zespół enteropatii sprzężonej z chromosomem X (IPEX), któremu towarzyszą różne choroby autoimmunologiczne, łączące kluczową funkcję komórek Treg z chorobami autoimmunologicznymi. U osób z niedoborami CD25, STAT5B i CTLA4 oraz innych cząsteczek związanych z Treg również rozwijają się ciężkie zespoły autoimmunologiczne, których nie można odróżnić od IPEX. Warianty specyficzne dla Treg są częstą cechą chorób autoimmunologicznych. Polimorfizmy w FOXP3, CTLA4 i CD25 są silnie skorelowane z początkiem choroby odpowiednio u pacjentów z autoimmunologicznymi chorobami tarczycy, T1D i stwardnieniem rozsianym (Ohkura i in., 2020). Co ważne, komórki Treg wyizolowane od pacjentów ze stwardnieniem rozsianym rzeczywiście mają wadliwą zdolność tłumienia, a komórki Treg u pacjentów z RZS wykazują niski poziom CTLA4 w porównaniu ze zdrową grupą kontrolną (Mohr i in., 2019). Podobnie jak u ludzi, u myszy z niedoborami FOXP3, CD25 i CTLA4 również rozwija się patologia autoimmunologiczna w wielu narządach, a transfer komórek CD4+ CD25hi Treg uratował zespoły limfoproliferacyjne (Fontenot i in., 2003). Komórki Treg hamują odpowiedź immunologiczną poprzez kilka mechanizmów. Komórki Treg zawierają repertuar TCR, który silnie rozpoznaje kompleks własny antygen/MHC w grasicy i jest bardziej wrażliwy na własne peptydy po aktywacji w porównaniu z konwencjonalnymi komórkami T w obwodzie, co umożliwiło zależną od Treg samotolerancję (Sakaguchi i in. , 2008). Komórki Treg wyrażają szerokie spektrum cząsteczek powierzchniowych, w tym CD25, CTLA4, TIGIT, CD39 i CD73, aby konkurować z efektorowymi komórkami T i dodatkowo hamować aktywację i ekspansję komórek T. Tymczasem Tregs wydzielają także cytokiny immunosupresyjne, takie jak IL-10, TGF- i IL-35. Dokładna funkcja tych cytokin w modulowaniu chorób autoimmunologicznych nie jest w pełni poznana. IL-10 bezpośrednio hamuje zdolność APC do prezentacji antygenu, a ponadto zapobiega rozwojowi i funkcjonowaniu komórek T efektorowych/pamięci, takich jak komórki Th1, lub bezpośrednio hamuje komórki Th17 i Th1/Th17 wyrażające IL-10Ra patogeniczność (Huber i in., 2011). TGF- nie tylko ogranicza proliferację limfocytów T i promuje apoptozę poprzez antagonizowanie antyapoptotycznej ekspresji BCL-2, ale także moduluje DC i bezpośrednio reguluje równowagę Th17/Treg (Travis i Sheppard, 2014). Co więcej, komórki Treg bezpośrednio wydzielają Grzm B i perforynę, aby wywołać ukierunkowaną śmierć komórek, w tym APC.

Desert ginseng-Improve immunity (14)

Kliknij tutaj, aby wyświetlić produkty Cistanche Enhance Immunity

【Zapytaj o więcej】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Aplikacja Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Komórki Treg są heterogenne. Komórki Treg wyrażające T-bet są indukowane przez stymulację IFN i specyficznie hamują limfocyty T CD4+ wyrażające IFN, ale nie IL-17A i IL-4. Komórki Treg wyrażające GATA3-wykryto zarówno w stanie stacjonarnym, jak i podczas stanu zapalnego. Zarówno ekspresja T-bet, jak i GATA3 jest wysoce dynamiczna, a usunięcie zarówno Tbx21, jak i Gata3 w Treg powoduje u myszy ciężkie choroby autoimmunologiczne w młodym wieku (Yu i in., 2015). Tymczasem komórki Treg wykazujące ekspresję ROR, znajdujące się głównie w jelitach w stanie stacjonarnym, powstrzymują zarówno zapalenie okrężnicy za pośrednictwem Th1/Th17, jak i infekcję robakami pasożytniczymi związanymi z Th2. Usunięcie STAT3, innego czynnika transkrypcyjnego specyficznego dla Th17-, w komórkach Treg skutkuje śmiertelnym zapaleniem jelit ze zwiększoną ekspresją IL-17A, ale nie IFN- i IL4, co wskazuje na selektywne rozregulowanie za pośrednictwem Th17- zapalenie (Qiu i in., 2020). Nasza grupa zidentyfikowała także populację komórek Treg wykazujących ekspresję zarówno FOXP3, jak i BCL-6, zwanych komórkami Tfr. Komórki te pochodzą z nTregs w obwodzie i tłumią reakcje ośrodka rozmnażania (Chung i in., 2011b). Niedobór Bcl6 w Tregs sprzyja autoimmunizacji humoralnej w modelu ESS (Fu i in., 2018). Te czynniki transkrypcyjne z jednej strony kontrolują ekspresję markerów powierzchniowych na komórkach Treg, takich jak CXCR3, CCR6 i CXCR5, w celu promowania migracji komórek Treg do miejsc zapalnych. Z drugiej strony, funkcja hamująca Treg była bezpośrednio regulowana, ponieważ ekspresja cząsteczek efektorowych, takich jak Il10 i Gzmb, była zmniejszona w Treg pozbawionych T-bet.

Inni

TGM-CSF. Korzystając z myszy mapujących los GM-CSF, Becher i in. odkryli, że limfocyty T wytwarzające GM-CSF stanowią odrębny podzbiór indukowany przez IL-23 i IL-1 (Komuczki i in., 2019). Biorąc pod uwagę jego funkcję polegającą na promowaniu migracji, aktywacji i przeżycia komórek szpikowych, GM-CSF może być ważny w chorobach autoimmunologicznych zależnych od komórkowej odpowiedzi immunologicznej. Jak dotąd GM-CSF jest jedyną cytokiną, co do której stwierdzono, że całkowicie znosi postęp EAE po delecji, ale nie IL-17A ani IFN- (Codarri i in., 2011). To odkrycie przypomina nam również, że komórki Th17 mogą nie być jedynym celem IL-23. Blokowanie GM-CSF łagodzi także nasilenie choroby w modelu CIA (Cook i in., 2001). W modelu EAU stan zapalny nadal występuje u myszy z podwójnym niedoborem IL-17A i IFN, co wskazuje na obecność dodatkowego szlaku efektorowego. Blokowanie GM-CSF u tych myszy dodatkowo zmniejszyło nasilenie EAU i zmniejszoną infiltrację eozynofilów (Bing i in., 2020). W oparciu o te obiecujące wyniki przedkliniczne, leki przeciw GMO-CSF poddano szeroko badaniom klinicznym w leczeniu RZS i stwardnienia rozsianego. Komórki T CD8+. Funkcja limfocytów T CD8+ w chorobach zakaźnych i nowotworach była szeroko analizowana (Guo i Dong, 2022; Zhao i in., 2020). Co ciekawe, coraz więcej dowodów wskazuje, że limfocyty T CD8+ biorą także udział w patogeniczności i ochronie chorób autoimmunologicznych. W ośrodkowym układzie nerwowym pacjentów ze stwardnieniem rozsianym naciek limfocytów T CD8+ przewyższa nawet liczbę limfocytów T CD4+. Co więcej, w przypadku EAE zależnego od limfocytów T CD8+, ciężkiego zapalenia OUN, podobnego do występującego u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym, nie stwierdza się (Huseby i in., 2001). Funkcja cytotoksyczna limfocytów T CD8+, w tym wydzielanie FASL i ziarnistości, potencjalnie indukuje śmierć komórki i sprzyja ekspozycji na własne antygeny. Tymczasem limfocyty T CD8+ wydzielają cytokiny, takie jak IFN-, TNF i IL-17A, które dobrze charakteryzują się działaniem prozapalnym w odpowiedziach autoimmunologicznych. Oprócz patogennej funkcji limfocytów T CD8+ w stwardnieniu rozsianym, SLE, T1D i chorobie Grave'a, limfocyty T regulatorowe CD8+ scharakteryzowano także w stwardnieniu rozsianym, zapaleniu okrężnicy, toczniu, RZS i T1D. Komórki te pomagają kontrolować rozwój choroby poprzez wydzielanie IL-10, ograniczanie samoreaktywnych limfocytów T CD4+ i nadawanie APC aktywności tolerogennej i cytotoksycznej (Li i in., 2022; Yu i in., 2018 ).

Podwójnie ujemne komórki T. Komórka T TCR + CD3+ CD4− CD8− (podwójnie ujemna, DN) to niewielka frakcja obwodowych limfocytów T CD3+, licząca 1%–3%, o niewielkim zrozumieniu jej biologii. Ekspansja limfocytów T DN jest zjawiskiem charakterystycznym w autoimmunologicznym zespole limfoproliferacyjnym, a liczba limfocytów T DN we krwi jest skorelowana z mianem autoprzeciwciał (Li i in., 2016a). Podobnie, zwiększona liczba komórek T DN jest również skorelowana z ciężkością choroby u pacjentów z SLE, a komórki te mogą wyrażać IL-4, IL-17A, IFN- i TNF. Tymczasem komórki T DN naciekające gruczoły ślinowe mogą również wytwarzać IL-17A u pacjentów z SS (Brandt i Hedrich, 2018). W skrócie, komórki T DN mogą uczestniczyć w systemie i lokalnym zapaleniu poprzez wytwarzanie cytokin i modulowanie odpowiedzi komórek B, a potrzebne są dalsze badania, aby zrozumieć ich funkcję w chorobach autoimmunologicznych. Limfocyty T pamięci rezydentnej w tkance (Trm). Komórki Trm, w tym komórki Trm CD4+ i CD8+, to komórki T pamięci o długim czasie życia, rezydujące w tkankach obwodowych i broniące się przed patogenami. W ostatnich latach zwraca się uwagę na znaczenie komórek Trm w chorobach autoimmunologicznych, zwłaszcza w chorobach skóry, w tym w łuszczycy, ziarniniaku grzybiastym i utrwalonych wykwitach polekowych. U pacjentów z bielactwem nabytym i łuszczycą zidentyfikowano cytotoksyczne komórki Trm wyrażające IFN- lub IL-17A. Co ważne, celowanie w CD122, receptor dla IL-15, który promuje rozwój komórek Trm, odwróciło rozwój bielactwa nabytego w modelach mysich, podkreślając potencjalne zastosowanie kliniczne celowania w komórki Trm (Ryan i in., 2021). Komórki Trm zgromadzone w jelitach pacjentów z IBD wyrażają dużą ilość cytokin prozapalnych, takich jak Il17a, Tnf, Ifng i Il13. Wzbogacenie komórek Trm, zwłaszcza komórek Trm CD4+, istotnie korelowało z zaostrzeniami klinicznymi u pacjentów z IBD (Zundler i in., 2019). Komórki Trm w jelitach dają również perspektywę braku odpowiedzi na leczenie wedolizumabem u niektórych pacjentów z IBD, co blokuje zawracanie limfocytów do jelit. Różne komórki Trm znaleziono także w mózgach ludzi, w tym u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym. Co ciekawe, infekcja wirusowa we wczesnym okresie życia sprzyja wytwarzaniu CCL5-wytwarzającego Trm w mózgu, co predysponuje do autoimmunizacji mózgu w późniejszym życiu w mysim modelu EAE (Steinbach i in., 2019). Wszystkie te obserwacje podkreślają znaczenie komórek Trm specyficznych dla autoantygenu w promowaniu chorób autoimmunologicznych i potencjał ukierunkowania leczenia na komórki Trm.

Terapia celowana na limfocyty T 

Podkreślając znaczenie limfocytów T w pośredniczeniu w chorobach autoimmunologicznych i ograniczony wybór leków klinicznych, duże zainteresowanie wzbudziło ukierunkowanie na limfocyty T. Przeciwciała anty-TNF odniosły ogromny sukces w leczeniu chorób autoimmunologicznych. Dzięki zidentyfikowaniu większej liczby celów, zwłaszcza cytokin prozapalnych, ukierunkowanie na limfocyty T odniosło ogromny sukces, a innowacyjne metody były również szeroko badane w eksperymentach przedklinicznych.

Celowanie w komórki Th17

Natychmiast po odkryciu komórki Th17 powiązano z wieloma chorobami autoimmunologicznymi, co wzbudziło duże zainteresowanie zarówno ze strony badań podstawowych, jak i firm farmaceutycznych. Zasadnicza przyczynowa rola komórek Th17 została również dodatkowo potwierdzona w dużej kohorcie badań klinicznych ukierunkowanych na kluczowe elementy szlaków związanych z Th17-, w tym IL-6, IL-23, IL{{ 5}}A, STAT3 i IL-17RA. Jak dotąd dziewięć przeciwciał monoklonalnych i jeden drobnocząsteczkowy inhibitor ukierunkowany na szlak Th17 zostało zatwierdzonych przez FDA do leczenia różnych chorób autoimmunologicznych (Tabela 2). Należą do nich 2 skierowane przeciwko receptorowi IL-6 (Tocilizumab i Sarilumab), 4 przeciwciała monoklonalne skierowane przeciwko IL-23 (Ustekinumab, Tildrakizumab, Guselkumab i Risankizumab) oraz 3 skierowane przeciwko IL-17 lub IL{{16 }}RA (Secukinumab, Ixekizumab, Brodalumab), a także Tofacitinib, inhibitor JAK1/3 hamujący aktywację STAT3. Pomimo tego, że wszystkie te leki blokują odpowiedź komórek Th17, wykazują one różne skutki w przypadku różnych zespołów autoimmunologicznych, prawdopodobnie ze względu na ich plejotropowe działanie na układ odpornościowy. Na przykład szlak IL-6 →STAT3 jest również ważny w regulacji ośrodka rozmnażania i odpowiedzi humoralnych, co może być jednym z powodów, dla których pokrewne leki wykazują lepszą skuteczność w leczeniu stanów zapalnych stawów z nasilonymi odpowiedziami humoralnymi, w tym umiarkowane do ciężkiego RZS i uMIZS (Hunter i Jones, 2015), podczas gdy leki ukierunkowane na IL-23 lub IL-17 są zatwierdzone głównie do leczenia pacjentów z łuszczycą plackowatą o nasileniu umiarkowanym do ciężkiego, ŁZS i ZZSK. Ustekinumab, którego celem jest zarówno IL-12, jak i IL-23 i hamuje odporność zarówno typu 1, jak i typu 17, został zatwierdzony do leczenia umiarkowanej do ciężkiej choroby Cohna (CD) i WZJG ze względu na jego korzystne działanie . Jednakże przeciwciała monoklonalne związane z IL-17A, w tym Secukinumab i Ixekizumab, mogą nawet pogorszyć chorobę u pacjentów z CD, prawdopodobnie ze względu na ich funkcję ochronną polegającą na utrzymywaniu funkcji barierowych (Hueber i in., 2012). Brodalumab, przeciwciało monoklonalne przeciwko IL-17RZS, może zwiększać ryzyko samobójstwa u pacjentów, czego nie obserwuje się w przypadku przeciwciał monoklonalnych przeciwko IL-17A, w tym Secukinumab i Ixekizumab, prawdopodobnie z powodu IL-17RZS jest również wymagany do przekazywania sygnałów z innych cytokin (Greig, 2016). Ogólnie rzecz biorąc, ze względu na ich doskonałą skuteczność w leczeniu zespołów autoimmunologicznych w porównaniu z tradycyjnymi lekami biologicznymi związanymi z TNF, zwłaszcza w przypadku chorób związanych z łuszczycą, rynki leków związanych z Th17- szybko się rozwijają.

Wszystkie powyższe leki działają na kluczowe szlaki sygnałowe cytokin zaangażowane w różnicowanie komórek Th17 i funkcje efektorowe. Ostatnio duże zainteresowanie firm farmaceutycznych wzbudził także ROR t, główny czynnik transkrypcyjny w komórkach Th17. W 2011 r. trzy grupy niezależnie przedstawiły dowód słuszności koncepcji celowania w ROR t w leczeniu chorób autoimmunologicznych związanych z Th17-na modelach zwierzęcych. Od tego czasu ponad 10 drobnocząsteczkowych inhibitorów ROR t weszło do badań klinicznych I lub II fazy w leczeniu łuszczycy, choroby suchego oka i stwardnienia rozsianego. Oczekuje się, że te inhibitory ROR t mogą zapewnić alternatywną, ale kosztowną i skuteczną terapię w leczeniu chorób autoimmunologicznych związanych z Th17-w porównaniu z regentami biologicznymi. Odkrycia te nie tylko potwierdzają ważną rolę osi Th17/IL-17 w chorobach autoimmunologicznych u ludzi, ale także sugerują złożoność tych chorób, a niektóre z nich mogą obejmować wiele osi zapalnych i czynników ryzyka, w przypadku których skojarzone leczenie może być konieczna strategia terapeutyczna i wymagać będzie dalszych badań w przyszłości.

Tabela 2 Podsumowanie leków zatwierdzonych przez FDA związanych z komórkami Th17

Table 2 Summary of FDA-approved drugs related to Th17 cells

Inni

Celowanie w migrację komórek. Po zaatakowaniu narządów limfatycznych limfocyty T ponownie dostają się do układu krążenia i migrują do różnych miejsc peryferyjnych w zależności od wyrażanych receptorów powierzchniowych, takich jak integryny i gradienty chemokin. Celowanie w cząsteczkę naprowadzającą limfocyty 4 znacząco łagodzi spontaniczne i wywołane transferem komórek T zapalenie okrężnicy (Neurath, 2019). Obserwacje te doprowadziły do ​​opracowania leków ukierunkowanych na handel limfocytami w leczeniu IBD. Jednakże natalizumab, ukierunkowany na 4, ma potencjalnie poważny efekt uboczny w postaci wywoływania postępującej wieloogniskowej leukoencefalopatii, co może być spowodowane dotkniętymi integrynami 4 1, które chronią w infekcji mózgu (Van Assche i in., 2005). Później wedolizumab ukierunkowany na 4 7, specyficzny receptor zasiedlający jelita, osiągnął ogromne korzyści kliniczne i został zatwierdzony przez FDA do leczenia zarówno WZJG, jak i CD. Oprócz hamowania zawracania limfocytów do jelit, korzyści kliniczne również wykazały inne strategie, w tym przeciwciała skierowane przeciwko E 7, które blokują zatrzymywanie limfocytów w jelitach, oraz agonista S1PR1, który sekwestruje limfocyty T w narządach limfatycznych (Neurath, 2019). Tymczasem natalizumab został również zatwierdzony do leczenia stwardnienia rozsianego, z ostrzeżeniami.

Celowanie w cząsteczki kostymulujące. GWAS ujawniło kilka SNP związanych z cząsteczkami kostymulującymi, takimi jak CD28, CTLA4, ICOS, CD40 i OX40L, które są ważne w modulowaniu odpowiedzi komórek T. Cząsteczka CTLA4-Ig Abatacept została zatwierdzona do leczenia RZS i jest również skuteczna w leczeniu młodzieńczego idiopatycznego zapalenia stawów (MIZS), zgodnie z badaniem klinicznym III fazy. Leki ukierunkowane na CD40-CD40L, OX40-OX40L i inne również są badane w przedklinicznych lub wczesnych badaniach klinicznych. Lek anty-BAFF Belimumab został zatwierdzony do leczenia SLE, a także wykazał korzyści w badaniach klinicznych II fazy leczenia pierwotnego zespołu Sjögrena i RZS oraz przeciwciała anty-OX40 GBR830 w poprawie umiarkowanego do ciężkiego atopowego zapalenia skóry (Edner i wsp., 2020). Testowane jest połączenie cząsteczek antykostymulujących i innych środków immunosupresyjnych. Terapia komórkami Treg. Biorąc pod uwagę znaczenie komórek Treg w hamowaniu odpowiedzi zapalnej, doniesiono o obiecujących wynikach przedklinicznych dotyczących adoptywnego transferu Treg w leczeniu chorób autoimmunologicznych, takich jak stwardnienie rozsiane, SLE, T1D i choroba przeszczep przeciwko gospodarzowi. Komórki Treg specyficzne dla antygenu wykazują lepsze działanie terapeutyczne w porównaniu z poliklonalnymi Treg. Połączenie edycji genów opartej na CRISPR z komórkami Treg może przyspieszyć ich funkcję w kontrolowaniu odpowiedzi immunologicznej (Ferreira i in., 2019).

Sygnalizacja receptora TNF i choroby autozapalne: NF-κB i Nekroptoza

Sygnalizacja receptora czynnika martwicy nowotworu (TNF) jest misternie regulowanym i wieloskładnikowym szlakiem zaangażowanym w różnorodne procesy komórkowe, w tym proliferację komórek, przeżycie komórek, śmierć komórek i zapalenie. Rozregulowanie sygnalizacji receptora TNF przez mutacje genetyczne ma związek z wieloma chorobami autoimmunologicznymi u ludzi i zwierząt, w tym IBD, łuszczycą i RZS. Jak dotąd większość badanych wariantów genów znajdujących się poniżej receptora TNF w tych chorobach autozapalnych jest zaangażowana w rozregulowaną aktywację NF-κB, taką jak niedobory OTULIN i haploinsufficiency A20. Jednakże w ostatnich postępach zbadano kluczową rolę nieprawidłowej sygnalizacji śmierci komórkowej za pośrednictwem TNFR, zwłaszcza nekroptozy w tych chorobach autozapalnych. W tym przeglądzie omówimy ważną rolę nekroptozy w patogenezie chorób autoimmunologicznych wywołanych mutacjami genów związanych ze szlakiem NF-κB, w tym NEMO, LUBAC, OTULIN i A20. Podsumowujemy także najnowsze postępy w zakresie mutacji genetycznych składników sygnalizacyjnych nekroptozy w chorobach autozapalnych, w tym autozapaleniu związanym z RIPK1-i innych zaburzeniach zapalnych, w których pośredniczy nekroptoza. Łącznie niniejszy przegląd poszerza wiedzę na temat złożonej zależności między NF-κB i nekroptozą poniżej sygnalizacji receptora TNF w chorobach autoimmunologicznych i zapewnia przyszłe kierunki terapii ukierunkowanej na nekroptozę w modulacji powiązanych chorób ludzkich.

Desert ginseng-Improve immunity (9)

cistanche tubulosa – poprawiają układ odpornościowy

Aktualna wiedza na temat sygnalizacji receptora TNF

Indukowana przez TNF-TNFR1 aktywacja NF-κB zapewniająca przeżycie Czynnik martwicy nowotworu (TNF) jest krytyczną cytokiną prozapalną, która może wiązać się z pokrewnymi receptorami TNFR1 i TNFR2 w celu zainicjowania sygnalizacji zapalnej, a także wielu szlaków śmierci komórek, w tym apoptozy i nekroptozy (Apostolaki i in. in., 2010). Po ligacji TNF, TNFR1 ulega trimeryzacji i szybko tworzy wieloskładnikowy kompleks sygnalizacyjny nazwany kompleksem sygnalizacyjnym TNFR1 (TNFR1-SC) lub kompleksem I (Micheau i Tschopp, 2003). Zligowany TNFR1 mógłby dodatkowo rekrutować białka adaptorowe, w tym kinazę białkową oddziałującą z receptorem-1 (RIPK1) i TRADD, która z kolei wiąże się z TRAF2 i TRAF5. Następnie ligazy ubikwitynowe E3, cIAP1 i cIAP2, można rekrutować do TNF-RSC i generować łańcuchy ubikwityny połączone z K63-na różnych regulatorach, takich jak RIPK1 i sam cIAP1. To zdarzenie ubikwitynacji mogłoby dodatkowo rekrutować kompleks liniowego zespołu łańcucha ubikwityny (LUBAC) w celu wygenerowania liniowych łańcuchów ubikwityny (znanych również jako połączone Met1-) na różnych składnikach kompleksu I, w tym RIPK1 i NEMO. Te połączone K63-i liniowe (Met1-połączone) łańcuchy ubikwityny pośredniczą w rekrutacji i aktywacji TAK1-TAB1-TAB2 i IKK1-IKK{ {32}}Kompleksy kinaz IKK poprzez wiązanie ubikwityny. TAK1 fosforyluje i aktywuje kompleks IKK, co prowadzi do fosforylacji, późniejszej ubikwitynacji i degradacji IκB za pośrednictwem proteasomów oraz aktywacji NF-κB. Ponadto TAK1 może również fosforylować i aktywować sygnalizację MAPK, która koordynuje się z odpowiedzią zapalną, w której pośredniczy NF-κB, w celu promowania przeżycia komórek (Yuan i in., 2019) (Rysunek 3).

Sygnalizacja śmierci za pośrednictwem TNF: apoptoza, nekroptoza i piroptoza zależna od RIPK1-

Oprócz indukcji genu sprzyjającego przeżyciu, aktywacja TNFR1 może również indukować zaprogramowaną śmierć komórki poprzez sygnalizację apoptozy, nekroptozy i piroptozy. Podobnie do innych receptorów i białek adaptorowych zawierających domenę śmierci, takich jak Fas i FADD, TNFR1 zawiera wewnątrzkomórkową domenę śmierci oddziałującą z RIPK1 i TRADD po ​​stymulacji TNF, co obejmuje apoptozę lub nekroptozę indukowaną TNF (Yuan i in., 2019). Zatem RIPK1 działa jako niezbędny regulator sygnalizacji receptora TNF, kontrolując równowagę między przeżyciem komórek a śmiercią komórek. RIPK1 składa się z N-końcowej domeny kinazy (KD), domeny pośredniej (ID) i C-końcowej domeny śmierci (DD). Domena kinazy ma kluczowe znaczenie dla autofosforylacji RIPK1 na S166 i zależnej od aktywacji kinazy indukcji apoptozy i nekroptozy przez TNF. Domena pośrednia RIPK1 jest niezbędna dla przetrwania sygnalizacji NF-κB i MAPK poprzez różne modyfikacje ubikwitynacji. Domena pośrednia zawiera także homotypowy motyw interakcji białka oddziałującego z receptorem (RHIM), który pośredniczy w interakcjach z innymi białkami zawierającymi RHIM, takimi jak RIPK3 do indukcji nekroptozy. Domena śmierci RIPK1 bierze udział w wiązaniu się z innymi białkami adaptorowymi z rodziny domen śmierci, takimi jak TNFR1, TRADD i FADD, w celu jej rekrutacji do TNF-RSC w celu promowania kompleksów przeżycia lub śmierci komórki w celu indukcji apoptozy (Yuan i in., 2019).

W normalnej sytuacji przy samej stymulacji TNF, sygnalizacja śmierci komórkowej jest tłumiona z powodu ekspresji genów antyapoptotycznych, takich jak cIAP1 i c-FLIP, za pośrednictwem NF-κB i MAPK. Ponieważ c-FLIP ma bardzo podobną strukturę do kaspazy-8, ale brakuje mu aktywności enzymatycznej, c-FLIP może heterodimeryzować z kaspazą-8 i hamować pełną aktywację kaspazy-8. Kiedy aktywacja NF-κB jest hamowana przez cykloheksymid (CHX), inhibitor syntezy białek (CHX), antyapoptotyczna ekspresja c-FLIP jest blokowana i kaspaza-8 może następnie tworzyć aktywne homodimery i kompleks śmierci komórkowej II z TRADD i FADD w celu wywołania apoptozy . Jednakże aktywność kinazy RIPK1 jest zbędna w tym procesie, ponieważ hamowanie kinazy RIPK1 nie ma wpływu na indukcję apoptozy (Wang i in., 2008). Z drugiej strony, zakłócenie tworzenia TNF-RSC przez niedobór cIAP1/2, LUBAC, TAK1, MK2, TBK1 lub NEMO/IKK, który hamuje stan ubikwitynacji i fosforylacji RIPK1, może promować aktywację aktywności kinazy RIPK1 i tworzenie kompleksu RIPK1-FADDCaspaza-8 w celu wywołania apoptozy zależnej od RIPK1-(Delanghe i in., 2020; Peltzer i in., 2016). Niemniej jednak, gdy apoptoza jest blokowana przez niedobór lub hamowanie kaspazy-8, komórki są nadal wrażliwe na indukowaną przez TNF śmierć komórkową niezależną od kaspazy. Zamiast apoptozy, niezależna od kaspazy śmierć komórki, zwana nekroptozą, może wywołać pęknięcie błony komórkowej i stan zapalny. Podczas indukcji nekroptozy RIPK1 ulega autofosforylacji i aktywacji, tworząc nekrosom z RIPK3, co dodatkowo sprzyja oligomeryzacji fosforylowanego MLKL (He i in., 2009). Zatem nekroptoza jest ściśle regulowana przez zależne od kaspazy rozszczepienie i aktywność kinazy RIPK1 i RIPK3. Ponadto tworzenie kompleksu RIPK1/Caspsae-8/FADD powoduje niezapalną śmierć komórek za pośrednictwem apoptozy. Jednak ostatnie badania wykazały, że aktywacja RIPK1 i kaspazy-8 przez TNF z inhibitorami TAK1 lub IKK w makrofagach może wywołać zarówno apoptozę, jak i piroptozę, inną lityczną i prozapalną formę śmierci komórek wywoływaną przez kaspazę.-8- pośrednie rozszczepienie GSDMD (Orning i in., 2018). Zatem RIPK1 i kaspaza-8 są kluczowymi punktami kontrolnymi w regulacji apoptozy, nekroptozy i piroptozy indukowanej TNF (ryc. 3).

Modyfikacje potranslacyjne: punkty kontrolne w określaniu losu komórki

Obecnie nadal nie jest jasne, co determinuje przełącznik decydujący o tym, czy RIPK1 jest trzymany w kompleksie I w celu stłumienia śmierci komórki, czy też przejścia do kompleksu II i nekrosomu w celu promowania apoptozy i nekroptozy. Potencjalnym wyjaśnieniem tego mogą być potranslacyjne modyfikacje białka punktu kontrolnego RIPK1, zwłaszcza ubikwitynacja, fosforylacja i rozszczepienie (Yuan i in., 2019). Istnieje wiele enzymów ubikwitynujących i deubikwitynujących zaangażowanych w regulację śmierci komórek i sygnalizację NF-κB sprzyjającą przeżyciu (Peltzer i in., 2016). Szeroko badane ligazy ubikwityny E3, które pozytywnie regulują aktywację NF-κB i dalszą ekspresję genów, to kompleks cIAP1/2 i LUBAC (składający się z HOIP, HOIL-1 i SHARPIN). Co więcej, ostatnie badania wykazały, że inną ważną funkcją tych ligaz E3 jest tłumienie aktywności kinazy RIPK1 i indukowanie śmierci komórek. Niedobór kompleksu cIAP1/cIAP2 lub LUBAC upośledza ubikwitynację związaną z K63-połączoną z Met1-na RIPK1 i promuje aktywację kinazy RIPK1 oraz przejście od kompleksu I do kompleksu II, co prowadzi do indukowanej apoptozy i nekroptozy (Peltzer i in. , 2018; Zhang i in., 2019b). Poza tym istnieje również kilka enzymów deubikwitynujących (DUB) działających w szlakach sygnałowych receptora TNF i negatywnie regulujących stan ubikwitynacji w kompleksie I w celu modulowania zarówno sygnalizacji NF-κB, jak i śmierci komórkowej, najważniejsze jako A20, CYLD, SPATA2 i OTULIN (Lork i in., 2017). Poziom A20 ulega zwiększeniu w odpowiedzi na stymulację TNF i może negatywnie regulować ekspresję genów zależną od NF-κB poprzez usuwanie ubikwityny K63 z kilku substratów, takich jak RIPK1 i NEMO. A20 pełni również kluczową funkcję w regulowaniu aktywności RIPK1 w śmierci komórki, ponieważ niedobór A20 może tłumić ubikwitynację RIPK1 przez Met1 w odpowiedzi na TNF i promować apoptozę i nekroptozę zależną od kinazy RIPK1 (Draper i in., 2015). Co więcej, ostatnie badanie wykazało również, że utrata ABIN1, niezbędnego do rekrutacji A20, może upośledzać fosforylację A20 i zwiększać ubikwitynację RIPK1 przez K63 w celu promowania aktywacji kinazy RIPK1 i śmierci komórki (Dziedzic i in., 2018). OTULIN jest specyficzną proteazą hydrolizującą łańcuchy ubikwityny Met1 i uważa się, że hamuje aktywację NF-κB za pośrednictwem LUBAC. Utrata OTULIN może również wydłużyć produkcję cytokin prozapalnych i spowodować stan zapalny (Fiil i in., 2013). Niemniej jednak ostatnie badanie wykazało, że katalitycznie nieaktywny OTULIN zaskakująco zwiększa ubikwitynację auto-Met1 LUBAC z niewielkim wpływem na aktywację NF-κB i przypomina niedobór LUBAC w celu promowania śmierci komórek i stanu zapalnego zależnego od kinazy RIPK1 (Heger i in., 2018). Zatem badania te sugerują złożoną i krytyczną rolę K63 i Met1-połączonego stanu ubikwitynacji kompleksu I w dyktowaniu zmiany aktywacji kinazy RIPK1 w celu określenia losu komórki. Jednakże podstawowy mechanizm, dzięki któremu komórki rozróżniają różne stany ubikwitynacji w kompleksie I w celu określenia decyzji o losie komórki w sygnalizacji receptora TNF, jest nadal niejasny. Obecny model został dobrze ustalony, że białka wiążące ubikwitynę, takie jak TAB2/3 i NEMO, są kluczowymi czujnikami umożliwiającymi tranzyt sygnału z różnych zdarzeń ubikwitynacji w kompleksie I, ponieważ łańcuchy ubikwitynowe K63 i Met1 mają wysokie powinowactwo do wiązania TAB2/TAB3 i NEMO z w pełni aktywują kompleks TAK1-TAB2-TAB3 i IKK / IKK /NEMO oraz dalszą sygnalizację NF-κB i MAPK (Yuan i in., 2019). Ponadto ostatnie badania wykazały, że wiele kinaz, w tym TAK1, IKK/IKK, TBK1 i MK2, może bezpośrednio lub pośrednio fosforylować RIPK1, dodatkowo hamując aktywność kinazy RIPK1 oraz apoptozę i nekroptozę zależną od RIPK1- (Delanghe i in., 2020). . Zatem regulacja za pośrednictwem kinazy może służyć poniżej różnych modyfikacji ubikwitynacji, aby dyktować przejście kompleksów sygnałowych i określenie losu komórki. Regulacja przejścia kompleksu I do kompleksu II TNFR1 była szeroko badana, jednakże nie jest zbyt jasne, w jaki sposób kompleks II podczas apoptozy przechodzi do nekrosomu w wyniku nekroptozy za pośrednictwem hamowania kaspazy. Wykazano, że kaspaza-8, aktywowana podczas apoptozy, rozszczepia wiele białek punktów kontrolnych w sygnalizacji NF-κB i nekroptozy, takich jak cFLIP, HOIP, RIPK1, RIPK3 i CYLD (Newton, 2020). Ponieważ RIPK1 i RIPK3 są ważne dla tworzenia nekrosomów, rozszczepienie RIPK1 i RIPK3 za pośrednictwem kaspazy-8-może być kluczową regulacją nekroptozy. Kaspaza-8 rozszczepia RIPK1 w D325, a nieaktywne przy rozszczepianiu D325A RIPK1 wykazuje wczesną śmiertelność embrionów i powoduje zarówno wzmożoną apoptozę, jak i nekroptozę (Lalaoui i in., 2020; Newton i in., 2019a; Tao i in., 2020; Zhang i in., 2019c). Badania in vitro pokazują również, że RIPK3 może zostać rozszczepiony w D328 przez kaspazę-8 w celu zahamowania nekroptozy (Feng i in., 2007). Ponieważ RIPK3 odgrywa także rolę w apoptozie i inflamasomie, funkcjonalny wynik zależnego od D rozszczepienia RIPK3 nadal wymaga dalszych badań.

Figure 3 Overview of gene activation and cell death in TNF receptor signaling. A, Under TNFα stimulation, RIPK1 and other signaling molecules including TRADD, TRAF2/5, E3 ligase cIAP1/2 and linear ubiquitin chain assembly complex (LUBAC, composed of HOIL-1, HOIP, and SHARPIN) could be rapidly recruited to form TNFR1 signaling complex (TNF-RSC, also called complex I). The E3 ubiquitin ligases cIAP1/cIAP2 and linear ubiquitin chain assembly complex (LUBAC) could generate K63-linked or Met1-linked ubiquitin chains on various regulators such as RIPK1 and NEMO. These K63-linked and linear Met1-linked ubiquitin chains could mediate the recruitment and activation of the TAK1-TAB1-TAB2 and IKK1-IKK2-IKKγ kinase complexes by ubiquitin binding, which subsequently activates downstream pro-survival MAPK and NF-κB signaling. B, When the formation of TNF-RSC is disrupted (cIAP1/2, LUBAC, TAK1, MK2, TBK1, or NEMO/IKK deficiency) or NF-κB activation is blocked, RIPK1 and/or TRADD could transit from TNF-RSC to form complex II with FADD and Caspase-8 in the cytoplasm, which consequently triggers apoptosis. However, when apoptosis is inhibited by inactivation of Caspase-8, RIPK1 in the cytosolic complex II could also promote RIPK1-RIPK3-MLKL necrosome formation in a kinase-dependent way to trigger necroptosis activation. C, During Yersinia infection, TLR and TNF signaling will lead to activation of NF-κB and transcription of proinflammatory genes in macrophages. Secretion of the Yersinia effector protein YopJ leads to inhibition of TAK1 and IKK and triggers the activation of RIPK1-dependent caspase-8 activation and apoptosis. Simultaneously, Caspase-8 also cleaves GSDMD leading to the formation of GSDMD pores and NLRP3 inflammasome activation, further inducing pyroptosis.

Rycina 3 Przegląd aktywacji genów i śmierci komórek w sygnalizacji receptora TNF. A, pod wpływem stymulacji TNF, można szybko zrekrutować RIPK1 i inne cząsteczki sygnalizacyjne, w tym TRADD, TRAF2/5, ligazę E3 cIAP1/2 i liniowy kompleks składania łańcucha ubikwityny (LUBAC, składający się z HOIL-1, HOIP i SHARPIN). tworząc kompleks sygnalizacyjny TNFR1 (TNF-RSC, zwany także kompleksem I). Ligazy ubikwityny E3 cIAP1/cIAP2 i liniowy kompleks składania łańcuchów ubikwityny (LUBAC) mogą generować łańcuchy ubikwityny połączone z K63- lub Met1- na różnych regulatorach, takich jak RIPK1 i NEMO. Te połączone K63-i liniowe Met1-łańcuchy ubikwityny mogą pośredniczyć w rekrutacji i aktywacji TAK1-TAB1-TAB2 i IKK1-IKK{{ 22}}Kompleksy kinaz IKK poprzez wiązanie ubikwityny, co następnie aktywuje dalszą sygnalizację MAPK i NF-κB sprzyjającą przeżyciu. B, gdy tworzenie TNF-RSC jest zakłócone (niedobór cIAP1/2, LUBAC, TAK1, MK2, TBK1 lub NEMO/IKK) lub aktywacja NF-κB jest zablokowana, RIPK1 i/lub TRADD mogą przedostać się z TNF-RSC do tworzą kompleks II z FADD i kaspazą-8 w cytoplazmie, co w konsekwencji wywołuje apoptozę. Jednakże, gdy apoptoza jest hamowana przez inaktywację kaspazy-8, RIPK1 w kompleksie cytozolowym II może również promować tworzenie nekrosomów RIPK1-RIPK3-MLKL w sposób zależny od kinazy, aby wywołać aktywację nekroptozy . C, Podczas zakażenia Yersinia, sygnalizacja TLR i TNF doprowadzi do aktywacji NF-κB i transkrypcji genów prozapalnych w makrofagach. Wydzielanie białka efektorowego Yersinia YopJ prowadzi do hamowania TAK1 i IKK oraz wyzwala aktywację zależnej od RIPK1-aktywacji kaspazy-8 i apoptozy. Jednocześnie kaspaza-8 rozszczepia również GSDMD, co prowadzi do powstania porów GSDMD i aktywacji inflamasomu NLRP3, co dodatkowo indukuje piroptozę.

Mutacje genów w składnikach sygnalizacyjnych receptora TNF powodują choroby autozapalne

Choroby genetyczne człowieka spowodowane mutacjami składników sygnalizacyjnych receptora TNF podsumowano w Tabeli 3.

Mutacje genów związane z NF-κB i choroba autozapalna: wzajemne oddziaływanie z nekroptozą Znaczenie indukowanej przez TNF sygnalizacji NF-κB w chorobach autozapalnych było szeroko badane zarówno u ludzi, jak i na modelach mysich. Mutacje TNF, TNFRSF1A (członek 1A nadrodziny TNFR), A20 i OTULIN, które powodują konstytutywne wydzielanie TNF w celu zwiększenia aktywacji NF-κB, powiązano z różnymi chorobami autozapalnymi u ludzi, takimi jak astma, stłuszczeniowe zapalenie wątroby i reumatoidalne zapalenie stawów (Rezaei , 2006; Valenti i in., 2002). Co więcej, ostatnie postępy wzmocniły naszą wiedzę na temat regulacji pomiędzy NF-κB a procesem nekroptozy prozapalnej. W tej części omówimy wpływ mutacji genów związanych z NF-κB, w tym NEMO, LUBAC, OTULIN i A20, na nekroptozę w patogenezie chorób autozapalnych. (i) Choroby związane z NEMO. Mutacje NEMO/IKBKG zlokalizowane na chromosomie X powiązano z kilkoma odrębnymi chorobami genetycznymi sprzężonymi z chromosomem X, w tym recesywną dysplazją ektodermalną i niedoborem odporności (EDA-ID) oraz nietrzymaniem barwnika (IP). Pacjenci z EDA-ID wykazali nieprawidłowy rozwój tkanek ektodermalnych wraz z niedoborem odporności, niskim poziomem przeciwciał i dysfunkcją komórek NK, która jest głównie spowodowana utratą białka NEMO i zaburzoną aktywacją NF-κB (Mancini i in., 2008). Jednakże około 20% osób z EDAID ma zaburzenia obejmujące nieprawidłowy stan zapalny, w tym IBD i SLE (Hanson i in., 2008). Co więcej, nietrzymanie barwnika (IP), pierwsza zidentyfikowana choroba z niedoborem NEMO, charakteryzuje się ciężkim stanem zapalnym skóry, w tym wysypką zapalną i hiperproliferacją keratynocytów w naskórku (Smahi i in., 2000). Te zaobserwowane fenotypy zapalne niedoboru NEMO u ludzi są mało prawdopodobne ze względu na zapalną aktywację NF-κB.

Co ważne, liczne badania genetyczne na myszach dały nam nowy wgląd w zespoły autozapalne związane z niedoborem NEMO. Myszy z niedoborem NEMO powodowały śmiertelność embrionów u samców i zmiany zapalne skóry u heterozygotycznych samic (Makris i in., 2000). Niedobór NEMO w nabłonku skóry spowodował ciężkie zapalenie skóry oraz apoptozę i nekroptozę za pośrednictwem TNF, które mogą być opóźnione przez współdelecję TNFR1 (Nenci i in., 2006). Ponadto u myszy z niedoborem NEMO specyficznym dla nabłonka jelitowego wykazano poważną śmierć komórek Panetha i rozwinęło się samoistne zapalenie okrężnicy, któremu zapobiega zablokowanie wytwarzania TNF. Co ważne, zapalenie jelita grubego można zablokować poprzez genetyczne lub farmakologiczne hamowanie kinazy RIPK1, co wskazuje na zasadniczą rolę nekroptozy za pośrednictwem RIPK1-w chorobach autozapalnych wywołanych niedoborem NEMO (Vlantis i in., 2016). Ostatnie badania ponadto wykazały, że kompleks IKK, w którym pośredniczy NEMO, może fosforylować RIPK1 w Ser25 i hamować aktywność kinazy RIPK1 oraz nekroptozę w celu regulacji stanu zapalnego i infekcji bakteryjnej u myszy (Dondelinger i in., 2019). Badania te sugerują, że mutacje NEMO u ludzi są również prawdopodobnie zaangażowane w sygnalizację nekroptozy zależną od RIPK, wywołującą nieprawidłowy stan zapalny. (ii) haploinsufficiency A20. A20, enzym edytujący ubikwitynę, kodowany przez gen białka 3 indukowanego TNF (TNFAIP3), jest niezbędnym przeciwzapalnym regulatorem aktywacji NF-κB zaangażowanym zarówno w sygnalizację receptora Toll-podobnego (TLR), jak i receptora TNF (TNFR). Polimorfizmy genu TNFAIP3 powiązano z wieloma chorobami autoimmunologicznymi, w tym SLE, RZS, łuszczycą, cukrzycą typu 1, chorobą wieńcową, nieswoistym zapaleniem jelit i astmą (Zhou i in., 2016a). Oprócz działania hamującego na prozapalną aktywację NF-κB, A20 odgrywa ważną rolę w hamowaniu aktywności RIPK1 w sygnalizacji apoptozy i nekroptozy poprzez modulowanie K63-, K48- i Met1- ubikwitynacja powiązana (Draper i in., 2015; Dziedzic i in., 2018). Badania te ponadto sugerują potencjalną rolę zapalenia za pośrednictwem nekroptozy w patogenezie z powodu haploinsufficiencji A20. Znaczenie A20 w chorobach autozapalnych wykazano dalej u myszy z niedoborem A20-, o szeregu fenotypów specyficznych dla komórek. Specyficzna dla komórek delecja A20 w keratynocytach powoduje objawy autozapalne, w tym zapalenie wielostawowe i zapalenie jelit, które przypominają ludzkie choroby autoimmunologiczne (Lippens i in., 2011). Większość badań przypisuje autoimmunizację haploinsufficiencji A20 utracie hamowania sygnałów NF-κB. Jednakże te badania genetyczne na myszach dostarczają bezpośrednich dowodów na to, że nekroptoza zależna od kinazy RIPK1 odgrywa dominującą rolę w patogenezie, ponieważ hamowanie RIPK3 lub RIPK1 może uratować ogólnoustrojowy stan zapalny u myszy z niedoborem A20- (Onizawa i in., 2015 ). Niedawno badacze odkryli, że mutacja domeny wiążącej ubikwitynę A20 ZnF7 powoduje spontaniczne zapalenie stawów poprzez aktywację nekroptozy zależnej od RIPK1-, co sugeruje, że funkcja A20 regulująca ubikwitynę ma kluczowe znaczenie dla ograniczenia śmierci komórek i stanu zapalnego (Polykratis i in. in., 2019). Dlatego konieczne są dalsze badania w celu zbadania funkcji rusztowania, deubikwitynacji i enzymu K48- ubikwitynacji A20 w nekroptozie, zapaleniu i pokrewnych chorobach ludzkich. (iii) Niedobór LUBAC (HOIP/HOIL/SHARPIN). Kompleks LUBAC, składający się z HOIP, HOIL-1 i SHARPIN, to jedyny kompleks ligazy E3, który może generować ubikwitynację związaną z Met1-na kilku substratach w celu regulacji sygnalizacji immunologicznej (Peltzer i in., 2016). . U pacjentów z defektami składników LUBAC rozwija się niedobór odporności i choroby autoimmunologiczne charakteryzujące się nawracającymi infekcjami, amylopektynozą mięśni i okresowymi gorączkami. Mutacje powodujące utratę funkcji HOIP i HOIL-1 prowadzą do skróconej ekspresji białka i destabilizacji innych składników LUBAC, co dodatkowo upośledza dalszą aktywację NF-κB i niedobór odporności (Boisson i in., 2015; Boisson i in., 2012). Jednak projekt LUBAC może również generować łańcuchy ubikwityny Met-1 na RIPK1 i hamować śmierć komórek za pośrednictwem kinazy RIPK1 (Peltzer i in., 2018), co może wyjaśniać fenotypy autozapalne u pacjentów z tymi mutacjami. Ważna funkcja LUBAC w chorobach autoimmunologicznych została dobrze zbadana przy użyciu modeli mysich z niedoborami genetycznymi. Myszy z niedoborem HOIP- i HOIL-1 prowadzą do wczesnej śmiertelności embrionów i wykazują ciężką śmierć komórek i zapalenie związane z TNFR. Jednak niedobór TNFR1 lub TNF nie może go w pełni uratować, a jedynie opóźnić, podczas gdy niedobór kaspazy-8- i podwójnego MLKL mogą w pełni zapobiec śmiertelności embrionów (Peltzer i in., 2018; Peltzer i in., 2014). Wyniki te sugerują kluczową rolę LUBAC w zapobieganiu śmierci komórek i stanom zapalnym, umożliwiając embriogenezę. Ponadto myszy z niedoborem SHARPIN, znane również jako myszy z przewlekłym proliferacyjnym zapaleniem skóry (cpdm), cierpią na ciężkie autozapalenie skóry przypominające atopowe zapalenie skóry i łuszczycę u ludzi (Seymour i in., 2007). Zapalenie skóry myszy cpdm można zablokować przez niedobór TNF lub inaktywację aktywności kinazy RIPK1 (Berger i in., 2014), co dodatkowo sugeruje kluczową rolę aktywności kinazy RIPK1 i nekroptozy w patogenezie choroby spowodowanej niedoborem LUBAC. (iv) Zespół autozapalny związany z otulipenią/OTULINĄ. OTULIN (zwany także gumby) to jedyny znany enzym deubikwitylujący, regulujący sygnały zapalne TNFR poprzez hydrolizę łańcuchów ubikwityny połączonych z Met1- utworzonych na złożonych celach LUBAC, takich jak NEMO, RIPK1, TNFR1 (Damgaard i in., 2016 ). U pacjentów z dziedzicznymi mutacjami powodującymi utratę funkcji genu OTULIN rozwija się ciężka choroba autozapalna, znana jako OTULIPENIA lub zespół autozapalny związany z OTULINEM (ORAS). Te ogólnoustrojowe objawy zapalne niedoboru OTULIN o wczesnym początku obejmują obrzęki stawów, przedłużającą się gorączkę, biegunkę, jałową neutrofilię i lipodystrofię (Damgaard i in., 2016; Zhou i in., 2016b). W przeciwieństwie do pacjentów z niedoborem LUBAC, pacjenci z mutacjami z niedoborem OTULIN nie mają oczywistego niedoboru odporności spowodowanego nadmierną aktywacją NF-κB. Jednakże myszy C129A z niedoborem OTULIN lub nieaktywne katalitycznie wykazują wczesną śmiertelność embrionów z powodu ciężkiej śmierci komórek i stanu zapalnego zależnego od RIPK, które mogą być opóźnione przez blokadę TNF, hamowanie kinazy RIPK1 lub niedobór RIPK3 (Damgaard i in., 2016; Heger i in., 2018). Co ważne, niedobór OTULIN lub inaktywacja katalityczna prowadzi również do zmniejszonej aktywności LUBAC, która jest również negatywnie regulowana przez ubikwitynację własnego Met1. Wyniki te sugerują, że duża wrażliwość na śmierć komórek zależną od RIPK1-podczas embriogenezy u myszy z niedoborem OTULIN lub nieaktywnych katalitycznie może wynikać z utraty aktywności LUBAC. Podsumowując, badania genetyczne na ludziach i modelach mysich ujawniają, że niedobór OTULIN prowadzi do zwiększonej ubikwitynacji Met1 i sprzyja prozapalnej aktywacji NF-κB i nekroptozy w celu wywołania chorób autoimmunologicznych.

Tabela 3 Podsumowanie mutacji genetycznych w sygnalizacji receptora TNF i chorobach autozapalnych

Table 3 Summary of genetic mutations in TNF receptor signaling and autoinflammatory diseases


Autozapalenie związane z nekroptozą

Ostatnio wykazano, że przewlekła śmierć komórek prozapalnych wywołana TNF, zwłaszcza nekroptoza, odgrywa zasadniczą rolę w chorobach autoimmunologicznych, takich jak choroby neurodegeneracyjne, łuszczyca i nieswoiste zapalenie jelit. Indukowana przez TNF śmierć komórek nekroptotycznych może uwolnić wzorce molekularne związane z uszkodzeniami (DAMP), które promują patologiczne reakcje zapalne. Dlatego w tej części omówimy mutacje genów komponentów sygnalizacyjnych nekroptozy w patogenezie chorób autozapalnych. (i) Choroba zapalna, w której pośredniczy RIPK1-. Kinaza białkowa oddziałująca z receptorem-1 (RIPK1) jest głównym regulatorem sygnalizacji receptora TNF i określania losu komórki. Jako białko rusztowania, RIPK1 może ułatwiać tworzenie kompleksu I TNFR i promować prozapalną aktywację NF-κB w celu przeżycia. Ponadto RIPK1 wykazuje również aktywność kinazy białkowej, promując tworzenie kompleksu II i nekrosomów w celu wywołania apoptozy i nekroptozy (Yuan i in., 2019). U pacjentów z dziedzicznymi mutacjami powodującymi utratę funkcji w RIPK1 rozwijają się niedobory odporności i choroby autoimmunologiczne charakteryzujące się zapaleniem jelit o zmiennym początku i nasileniu oraz zapaleniem wielostawowym (Cuchet-Lourenço i in., 2018; Li i in., 2019a). W przeciwieństwie do myszy z niedoborem RIPK1-, które umierają wkrótce po urodzeniu, pacjenci z mutacjami z niedoborem RIPK1- mogą przeżyć długi czas po urodzeniu, co wskazuje, że RIPK1 nie jest niezbędny do przeżycia u ludzi (Dillon i in., 2014; Rickard i in., 2014). Utrata RIPK1 w fibroblastach skóry u ludzi upośledza aktywację szlaku NF-κB, ale zwiększa aktywację nekroptozy, w której pośredniczy RIPK3 i MLKL (Cuchet-Lourenço i in., 2018; Li i in., 2019a). Doniesiono, że funkcjonalne przejście RIPK1 w sygnalizacji TNFR1 jest ściśle regulowane przez modyfikacje potranslacyjne, przede wszystkim przez fosforylację, ubikwitynację i rozszczepienie za pośrednictwem kaspazy (Yuan i in., 2019). Kaspaza-8 rozszczepia ludzki i mysi RIPK1 odpowiednio po resztach D324 i D325, co może inaktywować RIPK1 i tłumić nekroptozę za pośrednictwem RIPK1-. Co ważne, nowsze badania wykazały, że u ludzi z mutacjami D234N/Y nabywającymi funkcję rozwija się autosomalna choroba autoimmunologiczna charakteryzująca się nawracającymi gorączkami i powiększeniem węzłów chłonnych. Myszy z mutacją typu knock-in D325A wykazują wczesną śmiertelność embrionów i ciężki stan zapalny, który można uratować poprzez inaktywację zarówno nekroptozy, jak i apoptozy poprzez podwójny niedobór RIPK3 i FADD lub MLKL i FADD (Lalaoui i in., 2020; Newton i in. , 2019a; Tao i in., 2020; Zhang i in., 2019c). Liczne badania genetyczne na myszach dodatkowo ujawniły znaczenie RIPK1 w sygnalizacji nekroptozy w regulacji chorób autozapalnych. Niedobór RIPK1 lub specyficzna dla komórki utrata RIPK1 napędza ogólnoustrojowy stan zapalny i awaryjną hematopoezę z powodu zwiększonej aktywacji nekroptozy (O'Donnell i in., 2018; Rickard i in., 2014). Ponadto ubikwitynacja RIPK1 odgrywa również kluczową rolę w regulacji jego aktywności rusztowania i kinazy w sygnalizacji TNFR1. My i inne grupy generujemy myszy typu knock-in K376R i ujawniamy, że połączona z K63- ubikwitynacja RIPK1 na K376 ma kluczowe znaczenie dla promowania aktywacji NF-κB i ograniczania zależnej od kinazy RIPK1 śmierci komórek podczas embriogenezy i zapalenia (Tang i in. , 2019; Zhang i in., 2019d). Niedawno odkryliśmy również, że reszta K612 jest dominującym miejscem dla liniowej ubikwitynacji n RIPK1 za pośrednictwem LUBAC. Generując myszy typu knock-in K612R, odkryliśmy, że ubikwitynacja Met1 RIPK1 na K612 jest niezbędna do zapobiegania śmierci komórek w celu powstrzymania ogólnoustrojowego zapalenia (Tu i in., 2021). Zdolność RIPK1 do ułatwiania aktywacji nekrosomów wymaga interakcji homotypowej interakcji białka oddziałującego z receptorem (RHIM) między RIPK1, RIPK3 i ZBP1. Generując myszy niosące mutacje w motywie RHIM RIPK1, kilka grup stwierdziło, że myszy z mutacją RHIM RIPK1 wykazują śmiertelność poporodową i ciężki stan zapalny z powodu zwiększonej aktywacji nekroptozy (Lin i in., 2016; Newton i in., 2016). Co więcej, ostatnie badania wykazały, że fosforylacja RIPK1 na Ser25/321/335, w której pośredniczy TAK1, p38/MK2, TBK1/IKKε i IKK, zapewnia fizjologiczny hamulec zapobiegający indukowanej przez TNF śmierci komórek zależnej od kinazy RIPK1 podczas embriogenezy, infekcji i zapalenie układu nerwowego (Delanghe i in., 2020). Zatem badania tych mutacji modyfikacji potranslacyjnych RIPK1 mogą dodatkowo zapewnić mechanistyczny wgląd w choroby zapalne związane z pokrewnymi ludzkimi polimorfizmami. (ii) Inne choroby zapalne związane z mutacjami nekroptozy. Wykazano, że kaspaza-8, aktywowana podczas apoptozy, rozcina białka punktów kontrolnych w nekrosomach, w tym RIPK1 i RIPK3, w celu zahamowania aktywacji nekroptozy (Yuan i in., 2019). U pacjentów z dziedzicznymi mutacjami genetycznymi powodującymi utratę funkcji kaspazy-8 występuje choroba podobna do ALPS z powiększeniem węzłów chłonnych i powiększeniem śledziony. Ponadto u tych pacjentów występuje również niedobór odporności charakteryzujący się nawracającymi infekcjami zatokowo-płucnymi i wirusem opryszczki pospolitej, co jest spowodowane upośledzoną indukowaną antygenem aktywacją limfocytów T i B (Chun i in., 2002; Niemela i in., 2015). Jednak w przeciwieństwie do wczesnej śmiertelności embrionalnej myszy z niedoborem kaspazy-8, pacjenci z utratą funkcji-8 kaspazy mogą przeżyć po urodzeniu przez długi czas, co być może wynika z zbędnej funkcji kaspazy.{{113 }} u ludzi (Kaiser i in., 2011; Varfolomeev i in., 1998). Ponadto niedawno wykazano, że kaspaza-8 rozszczepia GSDMD podczas aktywacji apoptotycznej i dodatkowo wyzwala piroptozę, aby promować obronę gospodarza przed infekcją bakteryjną (Orning i in., 2018). Nowsze badania pokazują również, że myszy z nieaktywną katalitycznie kaspazą C326A/S z mutacją C326A/S wykazują wczesną śmiertelność embrionów i ciężki stan zapalny z powodu wzmożonej apoptozy, nekroptozy i piroptozy (Fritsch i in., 2019; Newton i in., 2019b). , co sugeruje zasadniczą rolę kaspazy-8 w modulowaniu autozapalenia wywołanego śmiercią komórkową. Badanie GWAS wykazało, że dwa warianty CASP8, p.K148R i p.I298V, są allelami ryzyka w chorobie Alzheimera (Rehker i in., 2017). Jednak wpływ mutacji K148R kaspazy-8 na jej aktywność podczas apoptozy i nekroptozy nadal wymaga dalszych badań genetycznych. RIPK3 to kolejna ważna kinaza, która aktywuje dalszą indukcję MLKL i nekroptozy. Myszy z niedoborem RIPK3 są zdolne do życia i nie wykazują oznak zapalenia autozapalnego; nie ma też doniesień o ludzkich mutacjach RIPK3 związanych z chorobami autozapalnymi. Jednakże badanie, w którym wygenerowano myszy z mutacją D161N pozbawione kinazy RIPK3, wykazało, że myszy te wykazywały spontaniczną apoptozę, stan zapalny i wczesną śmiertelność zarodków (Newton i in., 2014). Ponadto ostatnio wykazano, że MLKL, kolejny istotny składnik nekroptozy, jest powiązany z chorobą autozapalną u myszy i w badaniach na ludziach. U szczepu myszy z mutacją D139V w genie MLKL, umiejscowionym w „aparacie ortodontycznym” z dwiema helisami, po urodzeniu rozwija się śmiertelne zapalenie charakteryzujące się nekroptozą i naciekiem zapalnym w gruczołach ślinowych i osierdziu. Te obserwacje na modelu mysim dostarczają ważnego wglądu w potencjalną rolę autozapalną trzech powszechnych ludzkich polimorfizmów MLKL sąsiadujących z regionem ortezy MLKL (Hildebrand i in., 2020).

Uwagi końcowe i perspektywy na przyszłość

Nasze zrozumienie sygnalizacji TNFR, w tym sygnału sprzyjającego przeżyciu NF-κB oraz sygnału sprzyjającego apoptozie i nekroptozie, uległo znacznej poprawie w ciągu ostatniej dekady. Utrzymanie optymalnej i skutecznej odpowiedzi immunologicznej za pośrednictwem receptora TNF ma kluczowe znaczenie dla prawidłowej homeostazy układu odpornościowego i zapobiegania niedoborom odporności lub chorobom autozapalnym. Chociaż celowanie w hiperaktywację NF-κB przez blokadę TNF lub IKK jest stosowane w leczeniu niektórych chorób u ludzi, nadal ma pewne skutki uboczne ze względu na dalszą zwiększoną cytotoksyczność za pośrednictwem RIPK1-. Liczne badania genetyczne na myszach ujawniły kluczową rolę śmierci komórek, zwłaszcza zapalenia wywołanego nekroptozą, w patogenezie chorób autozapalnych. Dlatego potrzebne są dalsze badania w celu zbadania i przeanalizowania złożonej roli NF-κB i sygnalizacji śmierci komórek podczas patogenezy chorób zapalnych wywołanych tymi mutacjami genetycznymi. Warto zauważyć, że mutacje składników sygnalizacyjnych TNF, takich jak NEMO i LUBAC, blokują aktywację NF-κB i prowadzą do niedoboru odporności, ale z drugiej strony mogą również powodować ciężką śmierć komórek za pośrednictwem TNF i powodować autoimmunizację. Jednakże te dwulicowe postacie dokładnie pokazują złożoność i elegancję naszego układu odpornościowego, ponieważ funkcja tych genów w układzie odpornościowym jest wysoce specyficzna dla typu komórki. Komórki odporności wrodzonej, takie jak makrofagi i komórki dendrytyczne, które zawsze napotykają patogeny, mają wyższą wrażliwość na śmierć komórkową za pośrednictwem TNF i skłonność do autoimmunizacji. Jednakże adaptacyjne komórki odpornościowe, takie jak komórki T, są bardziej wrażliwe na śmierć komórkową za pośrednictwem Fas podczas rozwoju i aktywacji. Dlatego niedobór genu w tych komórkach w dużym stopniu blokuje indukowaną antygenem aktywację NF-κB i powoduje niedobór odporności. Ponieważ niedobór tych genów wywołuje ciężką autoimmunizację i wrodzoną odpowiedź immunologiczną, która powoduje ogromne szkody u żywiciela, jednoczesny niedobór odporności może powodować negatywne sprzężenie zwrotne w celu osłabienia odpowiedzi zapalnej. Dlatego konieczne są dalsze badania w celu zbadania funkcji tych mutacji genetycznych w wielu typach komórek odpornościowych w regulacji zarówno wrodzonej, jak i nabytej odpowiedzi immunologicznej podczas patogenezy chorób zapalnych.

Desert ginseng-Improve immunity (21)

cistanche tubulosa – poprawiają układ odpornościowy

Kluczowym pytaniem, które pozostaje w sygnalizacji TNFR1, jest to, w jaki sposób komórki określają przejście między tworzeniem kompleksu I związanego z aktywacją NF-κB do kompleksu II związanego ze śmiercią komórki lub tworzeniem nekrosomów w odpowiedzi na stymulację TNF. Poprzednie badania sugerują, że RIPK1, który bierze udział w aktywacji NF-κB, apoptozie i sygnale nekroptozy, wydaje się być kluczowym punktem kontrolnym, ponieważ wykazano, że wiele składników kompleksu TNFR I, w tym A20, LUBAC, IKK i TBK1, hamuje aktywność RIPK1 do hamować śmierć komórek. Konsekwentnie, ostatnie badania z wykorzystaniem próbek od pacjentów ludzkich ujawniły zasadniczą rolę RIPK1 i jego rozszczepienia w ograniczaniu nekroptozy i pokrewnych chorób autozapalnych. Bardzo interesujące będzie zbadanie regulacji nekroptozy i potranslacyjnych modyfikacji RIPK1 przy użyciu myszy z genetyczną nokautem i nokautem lub analizując próbki od pacjentów. Ponieważ aktywność kinazy RIPK1 ma kluczowe znaczenie dla aktywacji apoptozy i nekroptozy, pojawia się pytanie, w jaki sposób aktywność kinazy RIPK1 jest tłumiona w kompleksie TNFR przez modyfikacje potranslacyjne. Co ciekawe, aktywność kinazy RIPK1 wymaga jej autofosforylacji w N-końcowej domenie kinazy, ale fosforylacja hamująca RIPK1 jest głównie zlokalizowana w domenie pośredniej i otacza miejsce cięcia RIPK1. Zatem potrzebne są dalsze analizy biochemiczne i strukturalne, aby zbadać potencjalny przesłuch między fosforylacją hamującą a autofosforylacją lub rozszczepieniem RIPK1. Co więcej, opracowanie selektywnych, silnych i bezpiecznych drobnocząsteczkowych inhibitorów ukierunkowanych na nekroptozę, takich jak RIPK1, RIPK3 i MLKL, ułatwiłoby przyszłe leczenie kliniczne powiązanych chorób autozapalnych.

Bibliografia

Acosta-Herrera, M., Kerick, M., González-Serna, D., Wijmenga, C., Franke, A., Gregersen, PK, Padyukov, L., Worthington, J., Vyse, TJ, Alarcón-Riquelme , JA i in. (2019). Metaanaliza obejmująca cały genom ujawnia wspólne nowe loci w układowych seropozytywnych chorobach reumatycznych. Ann Rheum Dis 78, 311–319.

Adler, SH, Chiffoleau, E., Xu, L., Dalton, NM, Burg, JM, Wells, AD, Wolfe, MS, Turka, Los Angeles i Pear, WS (2003). Sygnalizacja Notch zwiększa responsywność komórek T poprzez zwiększenie ekspresji CD25. J. Immunol 171, 2896–2903.

Almutairi, KB, Nossent, JC, Preen, DB, Keen, Hawaje i Inderjeeth, Kalifornia (2021). Częstość występowania reumatoidalnego zapalenia stawów: systematyczny przegląd badań populacyjnych. J. Rheumatol 48, 669–676.

Amador-Patarroyo, MJ, Rodriguez-Rodriguez, A. i Montoya-Ortiz, G. (2012). Jak wiek zachorowania wpływa na przebieg chorób autoimmunologicznych? Choroba autoimmunologiczna 2012, 251730.

Amann, J., Blasimme, A., Vayena, E., Frey, D. i Madai, VI (2020). Wyjaśnialność sztucznej inteligencji w opiece zdrowotnej: perspektywa multidyscyplinarna. BMC Med Inform Decis Mak 20, 310.

Ando, ​​DG, Clayton, J., Kono, D., Urban, JL i Sercarz, EE (1989). Encefalitogenne komórki T w modelu B10.PL eksperymentalnego alergicznego zapalenia mózgu i rdzenia (EAE) należą do podtypu limfokin Th-1. Immunol komórkowy 124, 132–143.

Ando, ​​K., Kanazawa, S., Tetsuka, T., Ohta, S., Jiang, X., Tada, T., Kobayashi, M., Matsui, N. i Okamoto, T. (2003). Indukcja sygnalizacji Notch przez czynnik martwicy nowotworu w reumatoidalnych fibroblastach maziowych. Onkogen 22, 7796–7803.

Ang, QY, Alexander, M., Newman, JC, Tian, ​​Y., Cai, J., Upadhyay, V., Turnbaugh, JA, Verdin, E., Hall, KD, Leibel, RL i in. (2020). Diety ketogenne zmieniają mikrobiom jelitowy, powodując zmniejszenie liczby limfocytów Th17 w jelitach. Komórka 181, 1263–1275.e16.

Angum, F., Khan, T., Kaler, J., Siddiqui, L. i Hussain, A. (2020). Częstość występowania chorób autoimmunologicznych u kobiet: przegląd narracyjny. Cureusa 12, e8094.

Apostolaki, M., Armaka, M., Victoratos, P. i Kollias, G. (2010). Komórkowe mechanizmy działania TNF w modelach zapalenia i autoimmunizacji. Curr Dir Autoimmun 11, 1–26.

Armingol, E., Officer, A., Harismendy, O. i Lewis, NE (2021). Rozszyfrowanie interakcji komórka-komórka i komunikacja na podstawie ekspresji genów. Nat Rev Genet 22, 71–88.

Artyomov, MN i Van den Bossche, J. (2020). Immunometabolizm w epoce jednokomórkowej. Metab komórki 32, 710–725. Asanuma, K., Oliva Trejo, JA i Tanaka, E. (2017). Rola sygnalizacji Notch w podocytach nerek. Clin Exp Nephrol 21, 1–6.

Baglaenko, Y., Macfarlane, D., Marson, A., Nigrovic, PA i Raychaudhuri, S. (2021). Edycja genomu w celu określenia funkcji loci i wariantów ryzyka w chorobie reumatycznej. Nat Rev Rheumatol 17, 462–474.

Baranzini, SE i Oksenberg, JR (2017). Genetyka stwardnienia rozsianego: od 0 do 200 w ciągu 50 lat. Trendy Genet 33, 960–970.

Leavitt, SJE, Harder, KW, Kemp, JM, Jones, J., Quilici, C., Casagranda, F., Lam, E., Turner, D., Brennan, S., Sly, PD i in. (2005). U myszy z niedoborem Lyn rozwija się ciężka, uporczywa astma: Lyn jest krytycznym negatywnym regulatorem odporności Th2. J. Immunol 175, 1867–1875.

Berger, SB, Kasparcova, V., Hoffman, S., Swift, B., Dare, L., Schaeffer, M., Capriotti, C., Cook, M., Finger, J., Hughes-Earle, A. i in. (2014). Nowatorstwo: aktywność kinazy RIP1 jest niezbędna do normalnego rozwoju, ale jest kluczowym regulatorem stanu zapalnego u myszy z niedoborem SHARPIN. J. Immunol 192, 5476–5480.

Billiard, F., Lobry, C., Darrasse-Jèze, G., Waite, J., Liu, X., Mouquet, H., DaNave, A., Tait, M., Idoyaga, J., Leboeuf, M ., i in. (2012). Sygnalizacja Dll4- Notch w niezależnym rozwoju komórek dendrytycznych Flt3- i autoimmunizacji u myszy. J Exp Med 209, 1011–1028.

Bing, SJ, Silver, PB, Jittayasothorn, Y., Mattapallil, MJ, Chan, CC, Horai, R. i Caspi, RR (2020). W autoimmunizacji przeciwko neuroretinie przy jednoczesnym braku IFN- i IL-17A pośredniczy zapalenie eozynofilowe wywołane GM-CSF. J. Autoimmun 114, 102507.

Blanco, P., Ueno, H. i Schmitt, N. (2016). Komórki pęcherzykowe T pomocnicze (Tfh) w toczniu: aktywacja i udział w patogenezie SLE. Eur J. Immunol 46, 281–290.

Blaser, H., Dostert, C., Mak, TW i Brenner, D. (2016). Przesłuch TNF i ROS w zapaleniu. Trendy Komórka Biol 26, 249–261.

Block, KE, Zheng, Z., Dent, AL, Kee, BL i Huang, H. (2016). Mikrobiota jelitowa reguluje autoimmunologiczne zapalenie stawów K/BxN poprzez pęcherzykowy pomocniczy T, ale nie komórki Th17. J Immunol 196, 1550–1557.

Bogdanos, DP, Smyk, DS, Rigopoulou, EI, Mytilinaiou, MG, Heneghan, MA, Selmi, C. i Eric Gershwin, M. (2012). Bliźniacze badania nad chorobami autoimmunologicznymi: genetyka, płeć i środowisko. J Autoimmunologiczny 38, J156 – J169.

Boisson, B., Laplantine, E., Dobbs, K., Cobat, A., Tarantino, N., Hazen, M., Lidov, HGW, Hopkins, G., Du, L., Belkadi, A., et glin. (2015). Niedobór ludzkiego HOIP i LUBAC leży u podstaw zapalenia autozapalnego, niedoboru odporności, amylopektynozy i limfangiektazji. J Exp Med 212, 939–951.

Boisson, B., Laplantine, E., Prando, C., Giliani, S., Israelsson, E., Xu, Z., Abhyankar, A., Izrael, L., Trevejo-Nunez, G., Bogunovic, D ., i in. (2012). Niedobory odporności, zapalenie autozapalne i amylopektynoza u ludzi z dziedzicznym niedoborem HOIL-1 i LUBAC. Nat Immunol 13, 1178–1186.

Bradfield, JP, Qu, HQ, Wang, K., Zhang, H., Sleiman, PM, Kim, CE, Mentch, FD, Qiu, H., Glessner, JT, Thomas, KA i in. (2011). Metaanaliza obejmująca cały genom sześciu kohort chorych na cukrzycę typu 1 identyfikuje wiele powiązanych loci. PLoS Genet 7, e1002293.

Bradley, CP, Teng, F., Felix, KM, Sano, T., Naskar, D., Block, KE, Huang, H., Knox, KS, Littman, DR i Wu, HJJ (2017). Segmentowane bakterie nitkowate wywołują autoimmunizację płuc poprzez indukcję komórek Th17 osi jelitowo-płucnej wyrażających podwójne TCR. Mikroorganizm gospodarza komórkowego 22, 697–704.e4.

Brandt, D. i Hedrich, CM (2018). TCR + CD3+ CD4− CD8− (podwójnie ujemne) limfocyty T w autoimmunizacji. Autoimmunizacja Rev 17, 422–430.

Brown, MA, Kenna, T. i Wordsworth, BP (2016). Genetyka zesztywniającego zapalenia stawów kręgosłupa – spojrzenie na patogenezę. Nat Rev Rheumatol 12, 81–91.

Bungau, SG, Behl, T., Singh, A., Sehgal, A., Singh, S., Chigurupati, S., Vijayabalan, S., Das, S. i Palanimuthu, VR (2021). Celowanie w probiotyki w reumatoidalnym zapaleniu stawów. Składniki odżywcze 13, 3376.

Caielli, S., Athale, S., Domic, B., Murat, E., Chandra, M., Banchereau, R., Baisch, J., Phelps, K., Clayton, S., Gong, M., i in. (2016). Utlenione nukleoidy mitochondrialne uwalniane przez neutrofile napędzają produkcję interferonu typu I w ludzkim toczniu. J Exp Med 213, 697–713.

Caliskan, M., Brown, CD i Maranville, JC (2021). Katalog wysiłków w zakresie dokładnego mapowania GWAS w chorobach autoimmunologicznych. Am J. Hum Genet 108, 549–563.

Cárdenas-Roldán, J., Rojas-Villarraga, A. i Anaya, JM (2013). Jak choroby autoimmunologiczne gromadzą się w rodzinach? Przegląd systematyczny i metaanaliza. BMC Med 11, 73.

Charbonnier, LM, Wang, S., Georgiev, P., Sefik, E. i Chatila, TA (2015). Kontrola tolerancji obwodowej poprzez wewnętrzną sygnalizację Notch regulatorową limfocytów T. Nat Immunol 16, 1162–1173.

Charles, N., Hardwick, D., Douglas, E., Illei, GG i Rivera, J. (2010). Bazofile i środowisko T helper 2 mogą sprzyjać rozwojowi toczniowego zapalenia nerek. Nat Med 16, 701–707.

Chen, J., He, R., Sun, W., Gao, R., Peng, Q., Zhu, L., Du, Y., Ma, X., Guo, X., Zhang, H., i in. (2020). TAGAP instruuje różnicowanie Th17 poprzez mostkowanie aktywacji Dektyny z sygnalizacją EPHB2 we wrodzonej odpowiedzi przeciwgrzybiczej. Nat Commun 11, 1913.

Chi, X., Jin, W., Zhao, X., Xie, T., Shao, J., Bai, X., Jiang, Y., Wang, X. i Dong, C. (2022). Ekspresja ROR t w dojrzałych komórkach TH17 zabezpiecza specyfikację ich linii poprzez hamowanie konwersji do komórek TH2. Sci Adv 8, eabn7774.

Chiou, J., Geusz, RJ, Okino, ML, Han, JY, Miller, M., Melton, R., Beebe, E., Benaglio, P., Huang, S., Korgaonkar, K. i in. (2021). Interpretacja ryzyka cukrzycy typu 1 za pomocą genetyki i epigenomiki pojedynczych komórek. Natura 594, 398–402.

Cho, JH i Feldman, M. (2015). Heterogeniczność chorób autoimmunologicznych: spostrzeżenia patofizjologiczne z genetyki i implikacje dla nowych terapii. Nat Med 21, 730–738.

Choi, BY, Choi, Y., Park, JS, Kang, LJ, Baek, SH, Park, JS, Bahn, G., Cho, Y., Kim, HK, Han, J. i in. (2018). Hamowanie Notch1 indukuje populację i aktywność supresyjną regulatorowych limfocytów T w zapaleniu stawów. Teranostyka 8, 4795–4804.

Choi, SW, Mak, TSH i O′Reilly, PF (2020). Samouczek: przewodnik po przeprowadzaniu analiz punktowych ryzyka wielogenowego. Protokół Nat 15, 2759–2772.

Chong, WP, Mattapallil, MJ, Raychaudhuri, K., Bing, SJ, Wu, S., Zhong, Y., Wang, WW, Chen, Z., Silver, PB, Jittayasothorn, Y. i in. (2020). Cytokina IL-17A ogranicza patogenność Th17 poprzez pętlę ujemnego sprzężenia zwrotnego napędzaną autokrynną indukcją IL-24. Immunitet 53, 384–397.e5.

Chun, HJ, Zheng, L., Ahmad, M., Wang, J., Speirs, CK, Siegel, RM, Dale, JK, Puck, J., Davis, J., Hall, CG i in. (2002). Plejotropowe defekty aktywacji limfocytów spowodowane mutacjami kaspazy-8 prowadzą do niedoboru odporności u ludzi. Natura 419, 395–399.

Chung, SA, Brown, EE, Williams, AH, Ramos, PS, Berthier, CC, Bhangale, T., Alarcon-Riquelme, ME, Behrens, TW, Criswell, LA, Graham, DC i in. (2014). Loci podatności na toczniowe zapalenie nerek u kobiet z toczniem rumieniowatym układowym. J Am Soc Nephrol 25, 2859–2870.

Chung, SA, Taylor, KE, Graham, RR, Nititham, J., Lee, AT, Ortmann, WA, Jacob, CO, Alarcón-Riquelme, ME, Tsao, BP, Harley, JB i in. (2011a). Różnicowe powiązania genetyczne dla tocznia rumieniowatego układowego w oparciu o produkcję autoprzeciwciał anty-dsDNA. PLoS Genet 7, e1001323.

Chung, Y., Tanaka, S., Chu, F., Nurieva, RI, Martinez, GJ, Rawal, S., Wang, YH, Lim, H., Reynolds, JM, Zhou, X. i in. (2011b). Folikularne limfocyty T regulatorowe wykazujące ekspresję Foxp3 i Bcl-6 tłumią reakcje ośrodka rozrodczego. Nat Med 17, 983–988.

Może ci się spodobać również