Lamiwudyna poprawia spadek funkcji poznawczych u myszy SAMP8: integracja oceny farmakologicznej in vivo i farmakologii sieciowej Ⅱ

3|WYNIKI

3.1|3TC odwraca utratę masy ciała spowodowaną starzeniem i poprawia ocenę starzenia

Zmiany masy ciała myszy w różnych grupach doświadczalnych przedstawiono na Figurze 1D. Wyniki pokazały, że wszystkie myszy przybrały na wadze w ciągu 4 tygodni. W ramach standardowej diety myszy SAMP8, którym podawano 3TC, przybierały na wadze szybciej niż te, którym podawano nośniki. Wyniki ocen starzenia przed i po leczeniu 3TC lub nośnikiem wykazały, że średnie wyniki starzenia myszy SAMP8 były stosunkowo wyższe, podczas gdy odwrotny trend został osiągnięty przez leczenie 3TC (Figura 1E). Wyniki wyników związanych ze starzeniem każdej grupy myszy zebranych ostatniego dnia eksperymentu wykazały, że myszy SAMP8 leczone 3TC wykazały znaczną poprawę w kilku wynikach starzenia, w tym połysku skóry (p <{11}}. 01, t=3,901), zmętnienie rogówki (p < 0,01, t=4, 753) i owrzodzenie rogówki (p < 0,05 , t=6.125) (tabela uzupełniająca S1).

Kliknij tutaj, aby dowiedzieć się, jak Cistanche do funkcji poznawczychI Zdobądź Produkty Na Sprzedaż

3.2|3TC poprawia spadek zdolności poznawczych myszy SAMP8

Testy labiryntu wodnego Morrisa przeprowadzono w celu ocenyefekty poznawczez 3TC (Rysunek 2). Wyniki trajektorii i eksperymentów nawigacji kierunkowej przez pięć kolejnych dni wykazały, że myszy SAMR1 wykazywały znacznie mniejsze opóźnienia ucieczki niż myszy SAMP8 (p <{4}}.05, t=3. 194) (ryc. 2A–B). Jednak w trzecim i piątym dniu opóźnienia ucieczki myszy SAMP8 traktowanych 3TC były znacznie krótsze w porównaniu z myszami SAMP8 traktowanymi podłożem (p <0,05, t=3, 115), podczas gdy żadne statystyczne istotność została ujawniona w porównaniu z grupą SAMR1. Chociaż prędkość pływania myszy SAMP8 traktowanych 3TC pierwszego dnia była znacznie większa niż w pozostałych dwóch grupach, nie wykryto znaczącej różnicy między trzema grupami eksperymentalnymi w ciągu następnych 4 dni eksperymentów (ryc. 2C).

Wyniki prób sondy i trajektoria w 6. dniu wykazały, że zarówno SAMR1, jak i grupa SAMP8 traktowana 3TC spędziły więcej czasu w kwadrancie docelowym niż grupa SAMP8 traktowana nośnikiem (p <{7}}.{{ 19}} 5, t=4 0,512; ryc. 2D–E). Co więcej, liczba krzyżowań była również większa zarówno u myszy SAMR1, jak i grupy SAMP8 traktowanej 3TC niż w grupie SAMP8 traktowanej nośnikiem, ze statystycznie istotną różnicą ujawnioną między grupami zi bez traktowania 3TC ( p < 0.05, t=5.79; Ryc. 2F). Grupa SAMP8 traktowana nośnikiem wykazała największe opóźnienia w znalezieniu platformy pod wodą wśród wszystkich grup ze statystycznie istotną różnicą ujawnioną między grupami leczonymi i nietraktowanymi 3TC (p < 0,05, t=4, 415; Ryc. 2G).

FIGURA 2 Wpływ traktowania 3TC na poprawę pogorszenia funkcji poznawczych u myszy SAMP8. (A) Mapa trajektorii myszy po wejściu do wody z drugiego kwadrantu podczas testu nawigacji pozycjonującej w 5 dniu. (B) Opóźnienie ucieczki w eksperymencie nawigacji pozycjonującej dla każdej grupy. (C) Szybkość pływania myszy w każdej grupie w testach behawioralnych. (D) Mapa trajektorii myszy w eksploracji kosmosu Eksperyment. (E) Procent całkowitego czasu spędzonego w kwadrancie docelowym podczas prób sondy w każdej grupie. ( F ) Liczba przejść myszy przez platformę w każdej grupie w próbach sondujących. (G) Czas ucieczki do celu. Dane przedstawiono jako średnią ± SD. Test t-Studenta: * p < 0,0 5, ** p < 0, 01 i *** p < 0,001. ns: brak istotności statystycznej. Czarne gwiazdki lub „ns” oznaczają porównanie z grupą pojazdów SAMR1 plus. Czerwone gwiazdki lub „ns” oznaczają porównanie z grupą pojazdów SAMP8 plus. Każda grupa składała się z co najmniej ośmiu zwierząt

3.3|Docelowe geny 3TC ujawnione przez ilościową reakcję PCR w czasie rzeczywistym

Wcześniejsze badania wykazały, że 3TC może zmniejszać sygnały odpowiedzi SASP i IFN-I w komórkach mięśni gładkich starzejących się myszy, ale nie ma doniesień na temat powiązanych genów neurologicznej choroby zwyrodnieniowej w tkance mózgowej. Aby zbadać wpływ 3TC na mózg myszy, zbadaliśmy ekspresję dziesięciu genów kandydujących będących przedmiotem zainteresowania w hipokampie i korze myszy, stosując ilościową reakcję PCR w czasie rzeczywistym. W hipokampie (ryc. 3A) znacząco regulowane w górę geny odpowiedzialne za starzenie (grupy SAMR1 vs. SAMP8 leczone nośnikiem) obejmowały jeden gen związany z transpozonem (L1-ORF1, p <{11}}. 05), trzy geny odpowiedzi IFN-I (Ifna, Irf7 i Oas1, p <{2{25}}}}.05), dwa geny związane z AD (PS { {19}} i APP, p <{38}}.01) oraz trzy reprezentatywne geny SASP (Il6, Mmp3 i Pai1, p <{47}}, 01), podczas gdy znacznie -regulowane geny do traktowania 3TC (grupy SAMP8 traktowane nośnikiem vs. SAMP8 traktowane 3TC) obejmowały jeden gen związany z transpozonem (L 1- ORF2, p < 0, 05), dwa geny odpowiedzi IFN-I (Ifna i Oas1, p <0,001) i trzy reprezentatywne geny SASP (Il6, Mmp3 i Pai1, p <0,01). Podobne wyniki uzyskano w korze, chociaż regulacja w górę genu związanego z AD była zmniejszona przez leczenie 3TC w korze w porównaniu z hipokampem (p <0, 05; Ryc. 3B).

3.4|3TC łagodzi nieprawidłowości morfologiczne i utratę neuronów w hipokampie myszy SAMP8 wywołaną starzeniem

Zastosowaliśmy zarówno metody barwienia H & E, jak i Nissla, aby zbadać zmiany morfologiczne spowodowane przez 3TC w hipokampie, który był kluczowym obszarem poznania i pamięci. W porównaniu z grupą SAMR1 traktowaną nośnikiem, grupa SAMP8 traktowana nośnikiem wykazała zwiększoną szybkość klirensu neuronów hipokampa, nieznacznie zaburzony układ komórek, stężenie jądrowe stwierdzone w niektórych neuronach i łagodny obrzęk hipokampa. Uszkodzenia te uległy poprawie w grupach leczonych 3TC (ryc. 4A). Ubytki żywych komórek neuronalnych Nissl-dodatnich z typową zmianą neuropatologiczną zaobserwowano w grupie SAMP8 na podstawie barwienia Nissla, podczas gdy zmiany te zostały częściowo odwrócone w grupie SAMP8 traktowanej 3TC (ryc. 4B – C). Śmierć neuronów w hipokampie została również wykryta przez barwienie TUNEL z największą i najmniejszą ilością komórek TUNEL-dodatnich (zielony) obserwowanych odpowiednio w grupie SAMP8 traktowanej nośnikiem i grupie SAMR1 traktowanej nośnikiem, podczas gdy grupa SAMP8 traktowany 3TC został ujawniony znacznie mniej niż grupa SAMP8 traktowana nośnikiem (ryc. 4D – E).

3,5|Domniemane cele 3TC

Analiza farmakologii sieci ujawniła łącznie 269 białek jako przewidywane cele dla 3TC, przy czym 164 zidentyfikowano odpowiednio w bazie danych Pharmmapper i 105 w bazie danych ChEMBL (tabela uzupełniająca S3). Sieć PPI została skonstruowana w oparciu o geny docelowe 3TC przy użyciu bazy danych String z łącznie 32 rdzeniowymi węzłami w sieci zidentyfikowanymi jako kluczowe cele 3TC u myszy SAMP8 (ryc. 5A). Użyliśmy String 9.1, aby naśladować interakcje między kluczowymi białkami docelowymi 3TC, aby zidentyfikować trzy grupy białek o podobnych funkcjach (ryc. 5B).

3,6|Analiza wzbogacania kluczowych sieci docelowych 3TC

3.6.1|Analiza GO

Analiza wzbogacenia GO genów docelowych zidentyfikowanych podczas leczenia 3TC przy użyciu STRING ujawniła łącznie 55 0 procesów biologicznych z p <0, 05 (ryc. 6A; tabela dodatkowa S4), takich jak odpowiedź na kwaśne substancje chemiczne, odpowiedź na reaktywne formy tlenu i negatywną regulację procesu apoptozy. Analiza GO zidentyfikowała również łącznie 23 składniki komórkowe z p <0, 01, takie jak układ błony wewnętrznej, pęcherzyk cytoplazmatyczny, pęcherzyk, część cytoplazmatyczna i część błony komórkowej (tabela uzupełniająca S5), podczas gdy łącznie 69 funkcji molekularnych zidentyfikowanych przez Analiza GO została pogrupowana w sumie w 19 kategorii (tabela uzupełniająca S6). Warto zauważyć, że termin wiążący białko tau, z którym sądzono, że jest powiązanychoroba Alzheimera, wykazał istotny związek z 3TC (p <{1}},05).

3.6.2|Szlaki metaboliczne docelowych sieci 3TC

W sumie 109 znaczących ścieżek leczenia zostało przeszukanych za pomocą analizy KEGG (p <0.05; ryc. 6B; tabela dodatkowa S7) z wieloma ścieżkami związanymi z nowotworami, w tym szlaki w raku, chemiczna karcynogeneza, rak prostaty, proteoglikany w raku i mikroRNA w raku. Trzy szlaki, które okazały się być związane z zapaleniem nerwów, śmiercią komórek i transdukcją sygnału neuronalnego, obejmowały sygnalizację estrogenową (p <{12}},0001), kinazę fosforoinozytydową 3- i kinazę białkową B (PI3K/Akt) (p < 0,0001) oraz szlaki sygnałowe interakcji neuroaktywny ligand-receptor (p < 0,001).27-29

3.6.3|Tryb wiązania

Badania dokowania przeprowadzono między 3TC a trzema wybranymi potencjalnymi celami, tj. EGFR reprezentującym szlak sygnałowy estrogenu, AKT1 reprezentującym szlak sygnałowy P13K/Akt i ADRB2 reprezentujący szlak sygnałowy interakcji neuroaktywny ligand-receptor. Wyniki analizy trybu wiązania wykazały (ryc. 6C), że reszty aminokwasowe Thr854, Asn842, Arg841 i Glu762 białka receptorowego EGFR oddziaływały z małymi cząsteczkami ligandów 3TC, tworząc wiązania wodorowe, podczas gdy reszty aminokwasowe Lys55, Val40, Ala53, Met111, Val158, Asn114, Leu168, Ser155, Asp169, Lys153, Asn156s i Gly35 tworzyły oddziaływania hydrofobowe z małymi cząsteczkami ligandu 3TC. Reszty aminokwasowe Asp292, Glu191, His194, Glu198s i Thr195 białka receptorowego AKT1 tworzyły oddziaływanie wiązaniami wodorowymi z 3TC, podczas gdy reszty aminokwasowe Phe179, Leu295, Glu198 i Lys179 tworzyły oddziaływanie hydrofobowe z 3TC. Reszty aminokwasowe Asp331 i Phe332 z ADRB2 oddziaływały z 3TC, tworząc wiązanie wodorowe, podczas gdy reszty aminokwasowe Phe336, Ala335, Val54, Ala57, Ile58, Leu64, Asn69, Ile72 i Pro330 z ABRB2 tworzyły hydrofobowe oddziaływanie z 3TC. Te wyniki badań dokowania dostarczyły dowodów na wiązanie 3TC z celami, co było ważne dla zrozumienia mechanizmu działania leku. Następnie przeprowadziliśmy eksperymenty in vitro, aby zweryfikować wyniki analizy bioinformatycznej

FIGURA 3 Wpływ traktowania 3TC na ekspresję genów kandydujących w mysich tkankach mózgowych. Myszy traktowano nośnikiem lub 3TC w sposób ciągły przez 4 tygodnie. Dla wszystkich warunków ekspresja L1-ORF1 i L1-ORF2, trzech reprezentatywnych genów odpowiedzi IFN-I (Ifna, Irf7 i Oas1), dwóchGeny związane z chorobą Alzheimera(PS{0}} i APP) oraz trzy reprezentatywne geny SASP (Il6, Mmp3 i Pai1) w hipokampie (A) i korze mózgowej (B) oceniono metodą ilościowego PCR w czasie rzeczywistym z profilowaniem ekspresji genów pokazanych na histogramie. Test t-Studenta: *p < 0.05, **p < 0,01 i ***p < 0,001. ns: brak istotności statystycznej. Czarne gwiazdki lub „ns” oznaczają porównanie z grupą pojazdów SAMR1 plus. Czerwone gwiazdki lub „ns” oznaczają porównanie z grupą pojazdów SAMP8 plus.

3,7|3TC chroni komórki HT22 przed cytotoksycznością indukowaną przez FA poprzez regulację różnych cząsteczek

Aby zbadać wpływ 3TC jako inhibitora odwrotnej transkryptazy na starzejące się neurony in vitro, wywołaliśmy starzenie w komórkach HT22 za pomocą FA. Wyniki pokazały, że LINE -1 została aktywowana w starzejących się neuronach, a trend ten został odwrócony przez 3TC (ryc. 7A – B). Ponadto 3TC wykazało antagonistyczny wpływ na śmierć komórek indukowaną przez FA (Figura 7C). Zgodnie z oczekiwaniami, stymulacja komórek TH22 FA przez 24 godziny skutkowała znaczącym zahamowaniem ekspresji EGFR, p-AKT1 i ADRB2 (p <0.0 01) w porównaniu z nietraktowaną kontrolą , podczas gdy jednoczesne leczenie 3TC doprowadziło do znacząco zwiększonej ekspresji indukowanego przez FA EGFR, p-AKT1 i ADRB2 (p <0, 001; Ryc. 7D, E).

4|DYSKUSJA

Spadki funkcji poznawczych, zwłaszcza utrata pamięci, są zwykle związane z naturalnym starzeniem. Theefekty starzeniasą szczególnie widoczne w korze przedczołowej i hipokampie, obszarach mózgu, które są krytycznie zaangażowane w funkcje poznawcze i nastrój.30 Myszy SAMP8 pochodziły z linii SAM-P/2 jako szybko starzejący się mysi model demencji. Poprzednie badanie wykazało, że myszy SAMP8 wykazywały związany z wiekiem spadek zdolności poznawczych przy krótkim życiu, wykazując postępujące deficyty uczenia się i pamięci, a także neuropatologiczne cechy demencji w korze przedczołowej i hipokampie.31 Długość życia myszy SAMP8 wynosi prawie połowę tego SAMR1, które zastosowano jako kontrole dla SAMP8.32 W naszym badaniu myszy SAMP8 wybrano jako idealny model zwierzęcy do zbadania spadku funkcji poznawczych podczas starzenia, z homologicznymi normalnie rozwijającymi się myszami SAMR1 używanymi jako anty- grupa kontrolna starzenia

RYSUNEK {{0}} TC zmniejsza uszkodzenie neuronów w hipokampie myszy SAMP8. ( A ) Mikrofotografie skrawków hipokampa barwionych H & E dla każdej grupy myszy (słupek=50 μm). Czarne strzałki oznaczają skoncentrowane jądra, a niebieskie strzałki oznaczają obszary, w których neurony są poważnie utracone i zdezorganizowane. ( B ) Identyfikacja przeżycia neuronów przez barwienie Nissla w hipokampie (słupek=20 μm). (C) Ilość zdrowych komórek neuronalnych w każdym polu widzenia z gęsto wybarwionymi ciałami Nissla. ( D ) Obrazy komórek apoptotycznych zaznaczonych testem TUNEL (zielony) w każdej grupie myszy (słupek=20 μm). ( E ) Kwantyfikacja komórek TUNEL-dodatnich w każdym polu widzenia. Dane przedstawiono jako średnią ± SD. Test t-Studenta: ***p < 0,001. Czarne gwiazdki przedstawiają porównanie z grupą pojazdów SAMR1 plus. Czerwone gwiazdki oznaczają porównanie z grupą pojazdów SAMP8 plus.

Starzenie się zwykle powoduje utratę masy ciała z powodu zaniku kości, zaniku mięśni i dysfunkcji układu pokarmowego.33 Nasze wyniki wykazały, że 3TC częściowo złagodziło tendencję do utraty wagi. W porównaniu z myszami nietraktowanymi, myszy SAMP8 leczone 3TC wykazywały tendencję do zwiększania masy ciała wraz z wiekiem. Wyniki te są zgodne z wcześniej podanymi, sugerując, że 3TC poprawia zdrowie ciał myszy.34 W celu obiektywnej i dokładnej oceny wpływu leczenia 3TC na poprawęcechy starzeniamyszy rejestrowaliśmy wyniki starzenia podczas leczenia. Nasze wyniki pokazały, że wraz ze wzrostem czasu leczenia 3TC myszy SAMP8 wykazywały tendencję do spowalniania starzenia. Konkretnie, leczenie 3TC odegrało znaczącą rolę w poprawie połysku skóry, zmętnieniu rogówki i owrzodzeniu rogówki spowodowanym starzeniem się u myszy SAMP8. Wyniki te sugerują, że cel przeciwstarzeniowy 3TC istnieje na skórze i tkankach rogówki. Wcześniejsze badania potwierdziły, że L1 był używany jako cel do poprawy chorób zwyrodnieniowych spowodowanych starzeniem, podczas gdy inhibitory odwrotnej transkryptazy, w tym 3TC, były używane jako transpozycyjne inhibitory L1.13 Do tej pory molekularny mechanizm roli L1 w układzie nerwowym i możliwości leczenia chorób związanych z układem nerwowym, takich jak AD, poprzez regulację L1, nie zostały przekonująco wyjaśnione. Co więcej, badania sugerują, że rekombinacja genetyczna w genie APP może być kluczowym zdarzeniem w patogenezie sporadycznej AD, która jest rodzajem demencji.15 Rekombinacja genów neuronalnych nie została opisana, natomiast jej występowanie oraz uszkodzenia DNA i półprodukty RNA wymagają aktywności odwrotnej transkryptazy funkcji białek. Dlatego inhibitory odwrotnej transkryptazy, takie jak 3TC, mogą odgrywać rolę w zapobieganiu i leczeniu AD, które powoduje pogorszenie funkcji poznawczych. Te spekulacje zostały potwierdzone przez nasze wyniki eksperymentów z labiryntem wodnym Morrisa, badających wpływ 3TC na zdolności poznawcze u myszy SAMP8.

FIGURA 7 Eksperymenty in vitro potwierdziły kluczowe cząsteczki 3TC przeciwko degeneracji neuronów. Starzenie się mysich komórek neuronowych HT22 jest indukowane przez formaldehyd (FA). ( A ) Wykrywanie immunofluorescencyjne LINE -1 ORF1p w grupach kontrolnych, FA i FA plus 3TC (słupek=20 μm). (B) Kwantyfikacja analizy immunofluorescencyjnej w (A). (C) Kwantyfikacja przeżywających neuronów na pole ×400 w różnych grupach. (D) EGFR, p-AKT1 i ADRB2 wykryto za pomocą analizy Western blot. (E) Kwantyfikacja analizy Western blot w (D). Test t-Studenta: ***p < 0,001. Czarne gwiazdki oznaczają porównanie z grupą kontrolną. Czerwone gwiazdki oznaczają porównanie z grupą FA

Nasze wyniki testów labiryntu wodnego Morrisa wykazały, że po 5 dniach treningu pływackiego myszy SAMP8, które otrzymały doustnie 3TC, były w stanie znaleźć ukrytą platformę szybciej niż nieleczone myszy SAMP8. Biorąc pod uwagę, że myszy leczone 3TC wykazywały większą masę ciała, co może być związane z liczbą mięśni szkieletowych, rejestrowaliśmy prędkość pływania każdej grupy myszy w celu wyeliminowania efektu siły mięśni. Chociaż myszy przyjmujące 3TC pływały szybciej niż inne grupy pierwszego dnia treningu pływackiego, różnica nie utrzymywała się przez następne 4 dni. Wykluczamy zatem wpływ siły mięśniowej na wyniki testów w labiryncie wodnym. Podobnie, wyniki eksperymentu eksploracji kosmosu w dniu 6 pokazały, że myszy SAMP8 leczone 3TC wykazywały tendencję do bardziej aktywnego znajdowania pierwotnej platformy niż myszy nieleczone. Wyniki te sugerują, że leczenie 3TC poprawia spadki funkcji poznawczych i pamięci spowodowane starzeniem się u myszy SAMP8. Aby zbadać potencjalne mechanizmy molekularne 3TC poprawiające starzenie się mózgu, zastosowaliśmy ilościowy PCR w czasie rzeczywistym, aby zmierzyć poziomy mRNA genów kandydujących w tkankach hipokampa i kory mózgowej każdej grupy myszy. Nasze wyniki sugerują, że leczenie 3TC hamowało L1 indukowane przez starzenie się w mózgu i zmniejszało ekspresję genów związanych z IFN, SASP i AD, co wskazuje, że szlaki sygnałowe aktywowane przez starzenie zostały stłumione przez leczenie 3TC. Nasze wyniki sugerują, że 3TC może zwiększać inteligencję i fenotypy starzenia poprzez hamowanie transpozycji L1, aby ostatecznie złagodzić przewlekłe zapalenie mózgu spowodowane starzeniem. Zauważamy, że potrzebne są dalsze badania, aby zapewnić silne wsparcie dla tych molekularnych mechanizmów poprawy starzenia się mózgu poprzez leczenie 3TC ujawnione w tym badaniu. Obecnie w naszym laboratorium prowadzone są badania nad farmakologicznym mechanizmem działania inhibitorów odwrotnej transkryptazy na komórki nerwowe na modelach starzejących się komórek glejowych i neuronalnych in vitro.

Nasze wyniki eksperymentów barwienia HE i Nissla wykazały, że 3TC naprawił utratę neuronów w hipokampie spowodowaną przezstarzenie się, ostatecznie łagodząc neurodegenerację poprzez ratowanie neuronów przed śmiercią. Poza tym zaobserwowaliśmy więcej komórek apoptotycznych w hipokampie myszy SAMP8 w porównaniu z myszami SAMR1. Nasze wyniki wykazały ponadto, że leczenie 3TC znacznie zmniejszyło liczbę komórek apoptotycznych, prawdopodobnie z powodu bezpośredniego wpływu 3TC na białka związane ze szlakiem apoptotycznym lub inne cząsteczki znajdujące się w górę.

Uczenie się i pamięć to ważne zdolności poznawcze, które obejmują złożoną sieć funkcjonalnych obszarów mózgu współpracujących ze sobą w celu zarządzania i przetwarzania informacji. Dlatego wszelkie związki wykazujące wpływ na mózg należy traktować ostrożnie, mając w pełni zrozumiane ich potencjalne cele. Podejście oparte na farmakologii sieciowej to systematyczna technologia analityczna wykorzystywana do badania sieci interakcji wielu czynników, takich jak choroby, leki, geny i cele białkowe. Przeprowadziliśmy analizy farmakologii sieci, w tym analizy PPI i wzbogacania, w oparciu o łącznie 269 potencjalnych celów (z 32 celami głównymi) 3TC z adnotacjami przy użyciu baz danych Pharmmapper i ChEMBL. Nasze wyniki wykazały, że 3TC może odgrywać ważną rolę w utrzymaniu prawidłowych funkcji układu nerwowego zarówno poprzez sygnalizację estrogenową, jak i szlaki sygnałowe interakcji PI3K/Akt i neuroaktywny ligand-receptor, co dodatkowo wyjaśnia wpływ 3TC na ochronę normalnych funkcji nerwowych i hamowanie śmierci komórek neuronalnych. Wybrano reprezentatywne cząsteczki w odpowiednich szlakach, aby przeprowadzić dokowanie molekularne i eksperymenty in vitro w celu potwierdzenia wyników analizy bioinformatycznej. Aby dostarczyć więcej dowodów na poparcie tych spekulowanych mechanizmów molekularnych 3TC działających synergistycznie z układem nerwowym, konieczne są dalsze badania w celu zidentyfikowania dokładnych składników zaangażowanych i regulowanych w tych szlakach.

Jako częśćTerapii antyretrowirusowej(ART), 3TC był szeroko badany w ostatnich latach i został zatwierdzony do leczenia przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B (HBV).35 Należy zauważyć, że jeśli 3TC jest stosowany w leczeniuzwiązane ze starzeniem zmiany neurodegeneracyjne, należy wziąć pod uwagę jego toksyczność farmakologiczną ze względu na słaby układ odpornościowy w populacjach starszych i chorych na raka. Badania wykazały, że częste działania niepożądane 3TC obejmują infekcje górnych dróg oddechowych, nudności, wymioty, bóle brzucha i biegunkę. Dlatego kliniczne zastosowanie 3TC powinno być bardzo ostrożne. Obecnie 3TC może być wykorzystywane jako narzędzie farmakologiczne do badania mechanizmów molekularnych, ale nie jako domniemana terapia. Podsumowując, nasze badanie po raz pierwszy wykazało, że 3TC poprawia funkcje poznawcze myszy SAMP8 poprzez odwrócenie procesu starzenia się mózgu, dostarczając eksperymentalnych dowodów na zastosowanie inhibitorów odwrotnej transkryptazy jako potencjalnych metod leczenia chorób neurodegeneracyjnych.

POTWIERDZENIE

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (81670942, 81470704 i 81972057).

KONFLIKT INTERESÓW Autorzy oświadczają, że nie mają konfliktu interesów.

BIBLIOGRAFIA

1. Baulac S, Lu H, Strahle J i in. Zwiększona ekspresja DJ{1}} pod wpływem stresu oksydacyjnego i wMózg choroby Alzheimera. Mol Neurodegener. 2009;4:12.

2. Delgado-Lara DL, González-Enríquez GV, Torres-Mendoza BM, et al. Wpływ podawania melatoniny na geny zegarowe PER1 i BMAL1 u pacjentów zChoroba Parkinsona. Firma Biomed Pharmacother. 2020;129:110485.

3. Agatonovic-Kustrin S, Czajnik C, Morton DW. Podejście molekularne w opracowywaniu leków na chorobę Alzheimera. Firma Biomed Pharmacother. 2018;106:553-565.

4. Khosla S, Farr JN, Tchkonia T, Kirkland JL. Rola starzenia się komórek w starzeniu się i chorobach endokrynologicznych. Nat Rev Endocrinol. 2020;16:263-275.

5. Zolfaghari MA, Karimi A, Kalantari E i in. Badanie porównawcze długoprzeplatanej immunoreaktywności białka pierwiastka -1 w nowotworach skóry. Rak BMC. 2020;20:567.

6. Sae-Lee C, Biasi J, Robinson N i in. Wzory metylacji DNA LINE-1 i Alu dla przedobjawowej demencji w cukrzycy typu 2. PLoS Jeden. 2020;15:e0234578. 7. Baeken MW, Moosmann B, Hajieva P. Aktywacja retrotranspozonu przez uszkodzone mitochondria w neuronach. Biochem Biophys Res Commun. 2020;525:570-575. 8. Jones RB, Garrison KE, Wong JC, Duan EH, Nixon DF, Ostrowski MA. Analogowe nukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy w różny sposób hamują retrotranspozycję ludzkiej LINE-1. PLoS Jeden. 2008;3:e1547