Tworzenie pamięci zależy zarówno od specyficznych dla synaps modyfikacji siły synaptycznej, jak i specyficznego dla komórek wzrostu pobudliwości

Kontakt: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

Abstrakcyjny

The modification of synaptic strength produced by long-term potentiation (LTP) is widely thought to underlie memory storage. Indeed, given that hippocampal pyramidal neurons have>10,000 niezależnie modyfikowalnych synaps, potencjał przechowywania informacji przez modyfikację synaptyczną jest ogromny. Jednak ostatnie prace sugerują, że globalne zmiany w pobudliwości neuronalnej za pośrednictwem CREB również odgrywają kluczową rolę w tworzeniu pamięci. Ponieważ te globalne zmiany mają skromną zdolność przechowywania informacji w porównaniu z plastycznością synaptyczną, ich znaczenie dla funkcji pamięci pozostaje niejasne. Tutaj dokonujemy przeglądu nowo pojawiających się dowodów na zależną od CREB kontrolę pobudliwości i omawiamy dwa możliwe mechanizmy. Po pierwsze, zależna od CREB przejściowa zmiana w pobudliwości neuronalnej pełni funkcję alokacji pamięci, zapewniając, że pamięć jest przechowywana w sposób, który ułatwia skuteczne łączenie zdarzeń z bliskością czasową (godziny). Po drugie, te zmiany mogą sprzyjać tworzeniu się składania komórek podczas fazy konsolidacji pamięci. Nie jest jasne, czy takie globalne zmiany pobudliwości i lokalne mechanizmy synaptyczne są komplementarne. Tutaj twierdzimy, że te dwa mechanizmy mogą współpracować w celu promowania użytecznej funkcji pamięci.

Wyjaśnienie mechanizmów molekularnych, komórkowych i sieciowych, które leżą u podstaw uczenia się i pamięci, było głównym celem współczesnej neuronauki. W ważnym, wczesnym wykładzie Donald Hebb zaproponował, że skojarzenia tworzące pamięć są przechowywane za pomocą zależnych od aktywności zmian siły synaps!. Wiele późniejszych prac wykazało, że synapsy w rzeczywistości ulegają wzmocnieniu zależnemu od aktywności, zgodnie z wizją Hebba, i robią to za pośrednictwem LTP (oraz procesu komplementarnej długotrwałej depresji (LTD))3. W kanonicznej postaci LTP występującej w synapsach hipokampa CAI, indukcja LTP zależy od konkretnego typu receptora glutaminianu, NMDAR, oraz od biochemicznej kaskady inicjowanej i podtrzymywanej przez obfite białko synaptyczne, zależną od wapnia/kalmoduliny, kinazę białkową II (CaMKII)3 . Co ważne, modyfikacje genetyczne, które zakłócają funkcję NMDAR lub CaMKII, nie tylko blokują LTP, ale także powodują głębokie deficyty w uczeniu się i przechowywaniu pamięci. I odwrotnie, prawie wszystkie mutacje poprawiające pamięć również wzmacniają LTP. Inne prace wykazały, że LTP, raz wywołane podczas uczenia się7, może być dwukierunkowo modyfikowane przez stymulację podobną do LTD/LTP, prowadząc w ten sposób zarówno do zmniejszenia, jak i ponownego pojawienia się zachowań sterowanych pamięcią8. Neurony piramidowe hipokampa mają więcej niż 10 000 synaps, a ponieważ każda synapsa może być niezależnie modyfikowana przez LTP (tj. LTP jest specyficzne dla synapsy), nawet pojedynczy neuron ma imponującą pojemność przechowywania informacji. Co więcej, analiza obliczeniowa pokazuje, że modyfikacja siły synaptycznej przez LTP jest wystarczająca do wytworzenia pamięci rozproszonej w sieciach neuronowych10 Podsumowując, odkrycia te doprowadziły do ​​rozpowszechnionego poglądu, że LTP pośredniczy w przechowywaniu pamięci.

Istnieje jednak coraz więcej dowodów na to, że zmiany specyficzne dla synaps nie są jedynym rodzajem zmiany neuronalnej niezbędnej do funkcjonowania pamięci. Warto zauważyć, że modyfikacja globalnych właściwości neuronalnych również odgrywa ważną rolę w uczeniu się i pamięci. Dowody na takie zmiany uzyskano początkowo w preparatach bezkręgowców wykorzystanych do badania stymulacji presynaptycznej2, która leży u podstaw krótkotrwałej sensytyzacji behawioralnej. Ułatwienie to obejmuje wzrost pobudliwości presynaptycznej spowodowany zmniejszeniem K plus przewodnictwo3. Inne prace wykazały, że kondycjonowanie Hermissendala zwiększyło pobudliwość neuronów poprzez zmniejszenie przewodnictwa K*. Badanie zmian pobudliwości związanych z uczeniem się zostało następnie rozszerzone na kręgowce5 i jest obecnie poparte wieloma liniami dowodowymi16-19. W tej perspektywie opisujemy te dowody, jak również kluczową rolę czynnika transkrypcyjnego CREB (białko wiążące element reagujący na cAMP) w tym procesie. Następnie zajmujemy się pytaniem, dlaczego neurony kręgowców, które mogą przechowywać duże ilości informacji poprzez modyfikację swoich licznych synaps, modyfikują również globalne właściwości komórkowe poprzez regulację transkrypcyjną. Opisujemy dwie koncepcje, w jaki sposób modyfikacje synaptyczne i transkrypcyjne wnoszą różny wkład niezbędny do całego procesu tworzenia pamięci.

Działanie produktów cistanche i cistanche: poprawa pamięci i zdolności uczenia się

Rola czynnika transkrypcyjnego CREB w pamięci

Wczesne prace nad bezkręgowcami wskazywały na znaczenie regulacji transkrypcji w pamięci20. Doprowadziło to do zainteresowania CREB, ponieważ ulega on aktywacji zależnej od fosforylacji, która utrzymuje się przez wiele godzin w hipokampie kręgowców po indukcji LTP² i nauce2. Znaczenie CREB dla pamięci zostało teraz zademonstrowane poprzez dwukierunkową manipulację funkcją CREB2324. Badacze zastosowali różne metody, aby negatywnie modulować CREB, w tym knockdown CREB (w szczególności izoformy a/6), zakłócenie CREB za pośrednictwem oligodeoksynukleotydów antysensownych, interferencję RNA i ukierunkowaną mutację genetyczną23, 25-27. Te manipulacje niezmiennie prowadzą do deficytów pamięci. Odwrotnie, wzrost poziomu aktywnego CREB prowadzi do poprawy pamięci22,8,29.

Druga fala postępu w zrozumieniu funkcji CREB powstała dzięki nowo opracowanym narzędziom, które umożliwiły bezpośrednią wizualizację i manipulację komórkami pośredniczącymi w przechowywaniu pamięci („komórki śladu pamięci”). Jedna z powstałych metod wykorzystuje fakt, że komórki podlegające silnej aktywności, jak to ma miejsce podczas tworzenia pamięci, syntetyzują podwyższone poziomy klasy białek regulatorowych określanych jako geny wczesne natychmiastowe (IEG; np. cFos i arc). Od dawna wiadomo, że białka te ulegają ekspresji w komórkach aktywowanych podczas uczenia się, a ich ekspresję można wykorzystać do identyfikacji śladowych komórek pamięci30 Eksperymenty wykazały, że zwiększenie poziomów CREB w podzbiorze komórek zwiększa prawdopodobieństwo, że te komórki zostaną włączone do ślad pamięciowy, podczas gdy zmniejszanie poziomów CREB miało odwrotny skutek31,32. U wytresowanych zwierząt komórki z nadekspresją CREB mają wyższą ekspresję IEG niż sąsiednie komórki. Co ważne, zależne od CREB wzrosty ekspresji IEG nie występują u niewytrenowanych myszy!. Wyniki te pokazują, że względne poziomy CREB mogą wpływać na to, które neurony są włączone do śladu pamięciowego, zjawisko określane jako alokacja pamięci. Kolejne badania wykazały, że hamowanie ß, a tym samym wykazało, że komórki z nadekspresją CREB negatywnie wpływają na przypominanie pamięci3133-35 konieczność tych komórek do odzyskiwania pamięci.

Dowody na to, że CREB moduluje pobudliwość komórek

Jakim mechanizmem CREB może kontrolować alokację pamięci? Ponieważ LTP zależy od poziomu depolaryzacji w neuronach postsynaptycznych, CREB może działać poprzez zwiększanie pobudliwości neuronalnej, a tym samym zwiększanie włączania neuronów do śladu pamięciowego. Ta możliwość została przetestowana na kilka sposobów. W jednym zestawie eksperymentów uzyskano zapisy wewnątrzkomórkowe z komórek, które wykazywały nadekspresję CREB. Jak pokazano na ryc. 1, ta sama wielkość impulsu prądowego wytworzyła więcej potencjałów czynnościowych w komórkach z nadekspresją CREB niż w pobliskich neuronach, które nie nadeksprymowały CREB (patrz również pozycje literaturowe 32,43637. Nadekspresja CREB powodowała również mniejszy -hiperpolaryzacja (AHP) po ciągu potencjałów czynnościowych. Ponieważ takie AHP są generowane przez kanały Kt38, wydaje się prawdopodobne, że zwiększona pobudliwość komórek wykazujących ekspresję CREB jest przynajmniej częściowo spowodowana zmniejszoną przewodnością Kt. Mogą również wystąpić zmiany pobudliwości, które zależą od zmian w tłumaczeniu39, ale są one poza zakresem tego przeglądu, ponieważ nie dotyczą CREB.

Inny rodzaj eksperymentu wykorzystano do bezpośredniego sprawdzenia, czy manipulacja pobudliwością komórki jest wystarczająca, aby wpłynąć na włączenie komórki do śladu pamięciowego. W badaniach tych użyto wektorów wirusowych do zwiększenia pobudliwości poprzez redukcję funkcji kanału K plus (tj. poprzez ekspresję dominujących negatywnych form dwóch kanałów Kt zaangażowanych w AHP: KCNQ2 i KCNQ32). Komórki wyrażające zmutowane kanały rzeczywiście były preferencyjnie przydzielone do śladu pamięci, jak wskazuje zwiększone poziomy łuku białka IEG w stosunku do tych w sąsiednich niezainfekowanych neuronach. Kanał K't Wśród komórek Kir2.1 prawdopodobieństwo, że komórki były aktywne, zmniejszyło się około pięciokrotnie w porównaniu z komórkami, które nie wyrażały białka, a to doprowadziło do zmniejszenia włączania do śladu pamięciowego. Dalsze eksperymenty wykazały znaczenie zmian pobudliwości na poziomie behawioralnym: kiedy opsyna z funkcją kroku została użyta do zwiększenia pobudliwości podzbioru neuronów ciała migdałowatego tuż przed warunkowaniem tonu, kolejne eksperymenty behawioralne wykazały, że neurony te zostały przydzielone do przechowywania szoku tonowego jako SOCiation40.

Podsumowując, wyniki te pokazują, że główną funkcją CREB jest zwiększanie pobudliwości neuronalnej.1,42 i tym samym modulowanie alokacji neuronów do śladu pamięciowego. To wzmocnienie pobudliwości przez silną aktywność neuronalną stoi w sprzeczności z modyfikacjami przewodnictwa wewnętrznego i synaptycznego, które są homeostatyczne, to znaczy, gdy silna aktywność neuronalna prowadzi do zmniejszenia pobudliwości45. Rodzi to pytanie, jaką funkcję może pełnić wzmocnienie pobudliwości przez CREB. W modelach sieci neuronowych wzmocnienie transmisji przez LTP jest wystarczające do wytworzenia funkcji pamięci, więc co dodaje zależne od CREB wzmocnienie pobudliwości? Jedną z możliwości jest alokacja, ale jaka jest użyteczność alokacji? Te pytania zostały omówione w następnej sekcji.

Funkcje ogólnokomórkowego wzrostu pobudliwości

Poniżej najpierw opisujemy jedną hipotezę dotyczącą roli zależnych od uczenia się zmian w globalnej pobudliwości, która ma istotne wsparcie eksperymentalne. Następnie przedstawiamy drugą i bardziej spekulacyjną możliwość. Hipotezy te nie wykluczają się wzajemnie.

Działanie produktów cistanche i cistanche: poprawa pamięci i zdolności uczenia się

Hipoteza alokacji do połączenia

Jak opisano powyżej, wzrost ilości aktywowanego CREBen zwiększa pobudliwość, a tym samym obciąża alokację neuronów w śladzie pamięciowym. Zgodnie z hipotezą alokacji do powiązania44 zmiany te tworzą powiązanie między wspomnieniami zdarzeń, które następują w odstępie kilku godzin, a powiązanie to pełni ważną funkcję. Jak opisano powyżej, początkowy etap uczenia się prowadzi do wzrostu ilości CREB w neuronach kodujących pamięć, który trwa godzinami. Wynikający z tego wzrost pobudliwości prowadzi do rekrutacji wielu z tych neuronów do kodowania nowej pamięci powstałej w okresie zwiększonej pobudliwości. W rezultacie dwie pamięci zakodowane blisko siebie w czasie są kodowane przez nakładające się zespoły neuronów; w ten sposób te dwie pamięci są ze sobą powiązane, a to powiązanie może być podstawą przywoływania oddzielnych zdarzeń, które mają miejsce w ciągu kilku godzin (ryc. 2a).

Niedawne badanie wykazało, że nakładające się zespoły neuronów hipokampa rzeczywiście wychwytują wspomnienia kontekstów eksplorowanych w bliskim czasie4. Aby bezpośrednio określić, czy nakładające się komórki kodują dwa konteksty, autorzy wykorzystali miniaturowy mikroskop fluorescencyjny zamontowany na głowie do monitorowania przejściowych zmian wapnia w neuronach CA w hipokampie myszy, gdy myszy badały różne konteksty. Nastąpiło większe nakładanie się zespołów neuronalnych aktywowanych przez te konteksty, gdy oba konteksty były badane w tym samym dniu (w odstępie 5 godzin), w przeciwieństwie do różnych dni (w odstępie 7 dni) (ryc. 2b). Stanowi to bezpośrednie wsparcie dla idei, że nakładające się zespoły neuronalne kodują wspomnienia powstałe blisko czasu. Konsekwencją tego neuronowego nakładania się jest to, że te wspomnienia stają się behawioralnie powiązane; stwierdzono, że gdy jeden z kontekstów wywoływał reakcję strachu, myszy również bały się powiązanego kontekstu, mimo że nigdy nie doświadczyły niczego nieprzyjemnego w tym kontekście (ryc. 2c).

Dalsze poparcie dla hipotezy alokacji do połączenia uzyskano poprzez manipulację określoną frakcją wspólnych neuronów dla dwóch wspomnień. Badania te po raz pierwszy wykazały, że wspólny zespół ciała migdałowatego koduje dwie słuchowe wspomnienia strachu, które są nabywane blisko czasu (w ciągu 6 godzin) i że te wspomnienia są ze sobą powiązane. Badacze wykazali specyficzną rolę takich wspólnych zespołów neuronalnych poprzez ich wyciszenie, co wpłynęło na interakcję behawioralną dwóch zadań zależnych od ciała migdałowatego, ale nie kolidowało z odzyskiwaniem poszczególnych zadań47.

Hipoteza alokacji do połączenia zakłada, że ​​zależny od CREB wzrost pobudliwości zwiększa prawdopodobieństwo, że komórka zostanie pobudzona podczas czasowo bliskiego kodowania innych wspomnień, tym samym łącząc wspomnienia poprzez wzmocnienie ich łączności synaptycznej. Jak zauważono, zależne od CREB wzrosty pobudliwości są niehomeostatyczne. Tak więc istnieje obawa, że ​​ten wzrost pobudliwości może wzmocnić LTP i że wzmocnione odpowiedzi mogą zwiększyć prawdopodobieństwo późniejszego LTP, potencjalnie prowadząc do niekontrolowanego nasilenia. Jednak siła synaptyczna jest nasycalna4849, a wynikający z tego limit LTP może rozwiać obawy o niekontrolowane wzbudzenie.

Hipoteza konsolidacji zespołu

Many cells may represent similar information (for example, a place in the environment). During learning, these cells will fire together, and connections among them will be strengthened, thereby forming a stable memory ensemble. We now know that this strengthening will fade unless synapses undergo additional changes after learning, in a process termed consolidation. These consolidation processes, which include stabilization of synapses that were potentiated during learning (synaptic consolidation)and transfer of information from the hippocampus to the cortex(systems consolidation), occur during periods of rest and sleep that follow the learning events. During these periods,100-ms-long events termed sharp-wave ripples(SWRs) take place in the hippocampus. Analysis of neural firing patterns during SWRs shows that they replay recent memory>0-2. Ta powtórka ma kluczowe znaczenie dla tworzenia stabilnej pamięci, ponieważ określone zakłócenie SWR prowadzi do silnych deficytów pamięci53-55. Wydaje się prawdopodobne, że zaangażowanie neuronów w SWR będzie wzmocnione przez wzrost pobudliwości (patrz także odn. 3). To prowadzi nas do sugestii, że inną funkcją zależnego od CREB wzrostu pobudliwości jest wzmocnienie konsolidacji niezbędnej do stabilnego tworzenia pamięci.

Mechanizmy i selektywność aktywacji CREB

Jeśli CREB odgrywa ważną rolę w alokacji i konsolidacji pamięci, jego aktywacja powinna być w dużej mierze ograniczona do komórek, które brały udział w uczeniu się i muszą być włączone do zespołu pamięci. Potencjały czynnościowe nie są wiarygodnym wskaźnikiem zdarzeń związanych z uczeniem się, ponieważ mogą wynikać z aktywności wcześniej wzmocnionych synaps.

Podobnie zdarzenia LTP w synapsie nie są wiarygodnym wskaźnikiem, że komórka powinna być częścią nowego zespołu, ponieważ LTP może wystąpić w gałęzi dendrytycznej bez somatycznych skoków sodu57,58. Rozpalenie ognia w komórce, a tym samym możliwość włączenia do zespołu, może wymagać, aby wiele rozgałęzień uległo plastyczności synaptycznej. Zatem może być pożądane, aby CREB był preferencyjnie aktywowany, gdy w dendrycie występują zarówno zdarzenia uczenia się, jak i wystarczająco silna depolaryzacja, aby spowodować odpalenie. Warto zatem zauważyć, że istnieje znaczna złożoność szlaków prowadzących do aktywacji zależnej od CREB (ryc. 3): kaskada kinazy kalmodulinowej łączy somatyczne potencjały czynnościowe z aktywacją CREB59,60, podczas gdy dyfuzja ERK z dendrytu do somy łączy plastyczność synaptyczną z Aktywacja CREB61. Jedną z intrygujących możliwości jest to, że szlaki te wykonują obliczenia biochemiczne niezbędne do oznaczenia komórek, które muszą zostać włączone do zespołu.

Działanie produktów cistanche i cistanche: poprawa pamięci i zdolności uczenia się

Dyskusja

W dziedzinie uczenia się i pamięci brakowało spójnego poglądu na to, dlaczego i jak pamięć zależy zarówno od specyficznych dla synaps zmian siły synaps, jak i od globalnych zmian funkcji neuronów. Ostatnie postępy technologiczne umożliwiły bezprecedensową wizualizację i kontrolę procesów obwodowych leżących u podstaw pamięci, a uzyskane odkrycia potwierdzają pogląd, że zachodzą globalne zmiany w pobudliwości i wnoszą krytyczny wkład w pamięć. Obserwacje te kwestionują standardowe modele, które przypisują funkcję pamięci wyłącznie modyfikacji synaptycznej. Przedstawiamy dwie hipotezy dotyczące specyficznej roli zależnych od CREB zmian w globalnej pobudliwości w pamięci, które wykraczają poza tradycyjne poglądy; jeden (alokacja do połączenia) ma teraz bezpośrednie wsparcie, podczas gdy drugi (model konsolidacji zespołowej) jest zbudowany na obserwacjach eksperymentalnych, ale nie został jeszcze bezpośrednio przetestowany. Pomimo różnic koncepcyjnych między tymi modelami, dzielą one szeroki obraz całego procesu pamięci — widok, który obejmuje zdarzenia podczas kodowania i konsolidacji, a tym samym wykracza poza procesy, które są bezpośrednio odpowiedzialne za ostateczne przechowywanie pamięci. W modelu alokacji do połączenia, zależne od CREB zmiany w pobudliwości dodają zupełnie nową funkcjonalność do systemu pamięci: zdolność jednej pamięci do selektywnego kojarzenia się z innymi pamięciami w tym samym czasie. W modelu konsolidacji zespołu dodatkową funkcjonalnością jest ulepszenie konsolidacji — ulepszenie, które jest specyficzne dla komórek śledzenia pamięci i jest ostatecznie niezbędne do utworzenia stabilnego zespołu.

Żaden z proponowanych modeli nie zakłada, że ​​zmiany transkrypcyjne faktycznie leżą u podstaw samego przechowywania pamięci, a zatem modele te są zgodne z przejściowym charakterem zmian CREB i uczenia się oraz LTP. Jest to ważny punkt, ponieważ często sugeruje się, że przełączanie transkrypcji może pozwolić na bardziej stabilne przechowywanie pamięci długoterminowej niż przełączniki synaptyczne, które są zależne tylko od procesów post-translacyjnych. Podkreślamy, że dane dotyczące CREB nie potwierdzają tej sugestii; chociaż transkrypcja zależna od CREB wydaje się być niezbędna do tworzenia stabilnych wspomnień (zwłaszcza w modelu konsolidacji zespołu), sama w sobie nie jest stabilnym mechanizmem przechowywania informacji, a zatem nie może pośredniczyć w pamięci długotrwałej. Ta ważna funkcja może polegać na stabilnych zmianach w synapsie (ale patrz odn., 62, 63) lub na zmianach transkrypcyjnych związanych z uczeniem się innych niż te, w których pośredniczy CREB64,65 (o potencjalnej użyteczności hipotetycznych długoterminowych zmian w pobudliwości patrz sygn. 66).

Podsumowując, twierdzimy, że każdy ogólny model systemu pamięci musi teraz obejmować zarówno trwałe zmiany synaps, jak i przejściowe zmiany w globalnej pobudliwości. Takie podwójne mechanizmy nie powinny być postrzegane jako sprzeczne. Zmiany transkrypcyjne zależne od CREB działają raczej na rzecz promowania stabilnych modyfikacji synaptycznych w sposób, który wytwarza przydatne połączenia czasowe.

Działanie produktów cistanche i cistanche: poprawa pamięci i zdolności uczenia się

Bibliografia

1. Hebb, DO. Organizacja zachowania: teoria neuropsychologiczna. Wiley; Nowy Jork: 1949.

2. Bliss TV, Collingridge GL. Synaptyczny model pamięci: długotrwałe wzmocnienie w hipokampie. Natura. 1993; 361:31–39. [PubMed: 8421494]

3. Bliss TVP, Collingridge GL. Ekspresja LTP zależnego od receptora NMDA w hipokampie: mostkowanie podziału. Mózg Mola. 2013; 6:5. [PubMed: 23339575]

4. Nakazawa K, McHugh TJ, Wilson MA, Tonegawa S. Receptory NMDA, umieszczają komórki i pamięć przestrzenną hipokampa. Nat Rev Neurosci. 2004; 5:361–372. [PubMed: 15100719]

5. Giese KP, Fedorov NB, Filipkowski RK, Silva AJ. Autofosforylacja w Thr286 kinazy alfa wapniowo-kalmodulinowej II w LTP i uczenie się. Nauki ścisłe. 1998; 279:870–873. [PubMed: 9452388]

6. Rossetti T i in. Eksperymenty z wymazywaniem pamięci wskazują na kluczową rolę przechowywania w pamięci CAMKII. Neuron. 2017; 96:207-216. [PubMed: 28957669]

7. Lee YS, Silva AJ. Biologia molekularna i komórkowa wspomaganego poznania. Nat Rev Neurosci. 2009; 10:126–140. [PubMed: 19153576]

8. Nabavi S, et al. Inżynieria pamięci za pomocą LTD i LTP. Natura. 2014; 511:348–352. [PubMed: 24896183]

9. Matsuzaki M, Honkura N, Ellis-Davies GCR, Kasai H. Strukturalne podstawy długotrwałego wzmocnienia pojedynczych kolców dendrytycznych. Natura. 2004; 429:761–766. [PubMed: 15190253]

10. Hopfield JJ. Neurony ze stopniowanymi odpowiedziami mają zbiorcze właściwości obliczeniowe, takie jak neurony dwustanowe. Proc Natl Acad Sci USA. 1984; 81:3088–3092. [PubMed: 6587342]

11. Morris RGM, et al. Elementy neurobiologicznej teorii hipokampa: rola zależnej od aktywności plastyczności synaptycznej w pamięci. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2003; 358:773–786. [PubMed: 12744273]

12. Castellucci V, Kandel ER. Facylitacja presynaptyczna jako mechanizm uczulenia behawioralnego w Aplysia. Nauki ścisłe. 1976; 194:1176-1178. [PubMed: 11560]

13. Siegelbaum SA, Camardo JS, Kandel ER. Serotonina i cykliczny AMP zamykają pojedyncze kanały K plus w neuronach czuciowych Aplysia. Natura. 1982; 299:413–417. [PubMed: 6289122]

14. Alkon DL. Zmiany prądów membranowych podczas uczenia. J Exp Biol. 1984; 112:95–112. [PubMed: 6150967]

15. Disterhoft JF, Coulter DA, Alkon DL. Specyficzne dla kondycjonowania zmiany błony neuronów hipokampa królika mierzone in vitro. Proc Natl Acad Sci USA. 1986; 83:2733–2737. [PubMed:3458232]

Działanie produktów cistanche i cistanche: poprawa pamięci i zdolności uczenia się