Istniejąca wcześniej odporność komórek T na SARS-CoV-2 w nienaświetlonych zdrowych kontrolach w Ekwadorze, jak wykryto za pomocą testu uwalniania interferonu gamma COVID{4}}

ABSTRAKCYJNY

Tło: Badania odpowiedzi immunologicznej komórek T przeciwko SARS-CoV{2}} są ważne dla zrozumienia statusu immunologicznego poszczególnych osób lub populacji. W tym przypadku używamy prostego, taniego i szybkiego testu stymulacji krwi pełnej — testu uwalniania interferonu gamma (IGRA) — do badania odporności komórek T na SARS-CoV-2 u rekonwalescentów z COVID-19 oraz nienaświetlone zdrowe kontakty z Quito w Ekwadorze. Metody: Wytwarzanie interferonu gamma (INF-g) mierzono w heparynizowanej krwi rekonwalescentów i osób nieeksponowanych po 24-godzinnej stymulacji białkiem SARS-CoV-2 Spike S1, białkiem domeny wiążącej receptor (RBD) lub odpowiednio białko nukleokapsydu (NP). Obecność przeciwciał przeciwko białku IgG-RBD w obu badanych grupach określono za pomocą „wewnętrznego” testu ELISA. Wyniki: Jak zmierzono na podstawie produkcji INF-g, 80 procent rekonwalescentów z COVID{20}}, wszyscy seropozytywni IgG-RBD, miało silną odpowiedź limfocytów T.

Jednak nieoczekiwanie u 44 procent nienaświetlonych zdrowych osób kontrolnych, wszystkie seronegatywne IgG-RBD, wystąpiła silna specyficzna dla wirusa odpowiedź limfocytów T z COVID{4}} IGRA, prawdopodobnie z powodu wcześniejszego narażenia na powszechne koronawirusy wywołujące przeziębienie lub inne antygeny wirusowe lub bakteryjne. Wnioski i dyskusja: Wysoki odsetek nienarażonych zdrowych osób z istniejącą wcześniej odpornością sugeruje, że część populacji Ekwadoru może mieć reaktywne komórki T SARS-CoV{8}}. Biorąc pod uwagę, że technika IGRA jest prosta i można ją łatwo zwiększyć w badaniach, w których potrzebna jest duża liczba pacjentów, ta COVID{10}} IGRA może służyć do ustalenia, czy odpowiedź samych komórek T reprezentuje ochronną odporność na SARS-CoV -2 infekcji w badaniu populacyjnym. © 2021 Autorzy. Opublikowane przez Elsevier Ltd w imieniu Międzynarodowego Towarzystwa Chorób Zakaźnych.

Jednocześnie, gdy nasza odporność jest niska, istnieje wiele sposobów na poprawę odporności, spożywanie pokarmów, które mogą ją wzmocnić, takich jak cistanche, polisacharydy, białka, aminokwasy i inne substancje zawarte w cistanche często regulują pracę organizmuisystem immunologiczny.

Kliknij produkt w proszku ekstraktu cistanche tubulosa

Wstęp

Odpowiedź immunologiczna na infekcję SARS-CoV-2 obejmuje nie tylko wytwarzanie przeciwciał, ale infekcja wyzwala również odpowiedź komórek T u pacjentów (Lipsitch i in., 2020, Ni i in., 2020). Ogólnie rzecz biorąc, określenie obecności i wielkości specyficznej odpowiedzi komórek T pamięci na tę infekcję koronawirusem przeprowadza się za pomocą testu ELISPOT poprzez ustalenie liczby limfocytów, które wytwarzają IFN-g po stymulacji antygenami lub peptydami specyficznymi dla choroby (Ni i in., 2020, Pai i in., 2014, Abate i in., 2013, Braun i in., 2020, Grifono i in., 2020, LeBert i in., 2020, Sekine i in., 2020).

W tej technice jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) są izolowane ze świeżej heparynizowanej krwi przez wirowanie w gradiencie gęstości; wydzielanie cytokin przez poszczególne limfocyty T oznacza się ilościowo pod mikroskopem lub za pomocą specjalnego aparatu – czytnika płytek ELISPOT. Test ELISPOT jest techniką „wyłącznie dla laboratoriów badawczych”, która jest bardzo pracochłonna, wymagająca technicznie, stosunkowo droga i nie może być łatwo stosowana w laboratorium klinicznym ani stosowana w badaniach populacyjnych. Ze względu na koszty, infrastrukturę i wymagania laboratoryjne potrzebne do wykonania testu, jego użycie w warunkach ograniczonych zasobów, takich jak Ekwador, może być minimalne.

Komórkowe odpowiedzi immunologiczne można również określić za pomocą prostszego testu: testu uwalniania interferonu gamma (IGRA). Ten test, badanie krwi in vitro, określa ilościowo cytokiny wydzielane przez limfocyty T (tj. interferon gamma (IFN-g); jednak inne cytokiny, takie jak TNF lub IL-2, można również oznaczać ilościowo) po stymulacji krwi pełnej (nie tylko izolowane limfocyty) ze specyficznymi antygenami (Pai i in., 2014, Abate i in., 2013). Wydzielana cytokina IFN-g jest mierzona za pomocą testu ELISA, techniki łatwo dostępnej w większości laboratoriów, a wyniki są odczytywane za pomocą czytnika płytek ELISA. IGRA znalazły zastosowanie w laboratoriach klinicznych i są wykorzystywane do określania utajonej infekcji Mycobacterium tuberculosis (MTB), a także do pomiaru odporności komórkowej specyficznej dla wirusa cytomegalii (CMV) i przewidywania zakażenia CMV u biorców przeszczepów (Pai i wsp. , 2014, Abate i in., 2013). Te testy IGRA zostały szeroko ocenione i wykazano, że w porównaniu z testem ELISPOT wykazują podobne możliwości przewidywania infekcji MTB lub CMV. Co więcej, dostępnych jest i szeroko wykonywanych kilka komercyjnych i oznaczonych znakiem FDA lub CE testów do wykrywania odporności na gruźlicę lub CMV.

W niniejszym badaniu badamy zastosowanie COVID{0}} IGRA i oceniamy wielkość uwalniania IFN-g u rekonwalescencyjnych pacjentów z COVID{2}} i zdrowych osób nieleczonych wcześniej COVID{3}} w odpowiedzi na specyficzne antygeny wirusa SARS-CoV-2: białko RBD; część S1 białka Spike; lub białko nukleokapsydu (N). Dodatkowo określamy obecność przeciwciał IgG specyficznych dla SARS-CoV-2 u tych uczestników za pomocą „wewnętrznego” testu ELISA (Amanat i in., 2020, Guevara i in., 2021). Wykazaliśmy, że znaczny odsetek nienarażonych dawców posiada reaktywne komórki T SARS-CoV{13}} i omawiamy te wyniki.

Materiał i metody

Rekonwalescente z COVID{0}}, zdrowi kontrole i otoczenie

Badanie to przeprowadzono w Quito w Ekwadorze we wrześniu 2020 r. Nie zastosowano żadnych metod statystycznych do wstępnego określenia wielkości próby. Tabela 1 przedstawia charakterystykę 32 pacjentów w tym badaniu: trzynastu rekonwalescentów z COVID-19, wszyscy z łagodnymi objawami/objawami COVID{5}} i pozytywną diagnozą RT-PCR w czerwcu 2020 r.; i 17 nienaświetlonych zdrowych kontroli. Ci zdrowi kontrolni byli niezwykle ostrożni podczas pandemii, unikali kontaktu z innymi ludźmi i nie zgłaszali żadnych typowych dla okresu pandemii objawów COVID{10}}, takich jak gorączka, uporczywy kaszel, lub utrata węchu lub smaku. Do badania włączono także dwóch bezobjawowych nosicieli SARS-CoV-2. Te dwie osoby nigdy nie wykazywały żadnych objawów choroby COVID{13}}; jednak technika RT-PCR została na nich przeprowadzona jako wymóg uzyskania pozwolenia na pracę w czerwcu 2020 r. i zakończyła się pozytywnymi diagnozami.

Serologia

Serologię i IGRA dla wszystkich pacjentów i kontroli przeprowadzono w ciągu ostatnich dwóch tygodni września 2020 r., trzy miesiące po diagnozie RT-PCR rekonwalescentów. Aby określić obecność przeciwciał IgG swoistych dla koronawirusa w naszej grupie badawczej, zastosowano „wewnętrzny” test ELISA IgG SARS-CoV -2 Receptor Binding Domain (RBD) IgG (9, 10).

Test uwalniania interferonu gamma (IGRA)

W przypadku IGRA pobrano heparynizowaną próbkę krwi (4 ml) i podzielono na porcje po 250 ml i stymulowano odpowiednio 2 mg/ml białka RBD (procedura izolacji z pozycji literaturowej 9) lub 2 mg/ml dostępnego w handlu nukleokapsydu (N) białko lub białko Spike (S1) (ViroGen, numery katalogowe: odpowiednio 00,221-V i 00,226-V). Krzywą dawka-stężenie-odpowiedź dla krwi od pacjentów IGRA-dodatnich i IGRA-ujemnych zastosowano do określenia optymalnego stężenia antygenów do stymulacji w IGRA. Przy stężeniu 2 ug/ml stwierdzono maksymalną odpowiedź IFN-g we krwi pacjentów z COVID{15}} bez stymulacji u niezainfekowanych osób kontrolnych. Dla każdego uczestnika włączono niestymulowaną kontrolę (NIL) i zbadaliśmy 250 ml próbki krwi z mitogenem fitohemaglutyniny (PHA), kontrolę pozytywną w celu oceny wskaźnika odpowiedzi cytokinowej próbki krwi. Stymulację prowadzono w 96-dołkowej płaskodennej płytce ELISA w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Pobrano osocze i określono produkcję IFN-g za pomocą testu ELISA ludzkiego IFN-g (MaxTM Standard Set Biolegend nr kat. 430,101).

Wyniki

Test RBD IgG ELISA wykazał, że wszyscy pacjenci z objawami COVID{{0}} (pozytywni w RT-PCR) byli dodatni na obecność przeciwciał IgG przeciwko białku RBD trzy miesiące po diagnozie RT-PCR. Dwóch bezobjawowych pacjentów RT-PCR dodatnich i wszyscy zdrowi nienaświetleni pacjenci kontrolni byli seronegatywni w tym teście ELISA (patrz Tabela 1). Wyniki stymulacji krwi pełnej w teście COVID-19 IGRA przedstawiono na rycinie 1. Silną indukcję produkcji IFN-g stwierdzono u 80 procent pacjentów z objawami COVID-19 z wszystkie trzy antygeny, ale białko N i białko S były najsilniejszymi stymulatorami odpowiedzi IFN-g (ryc. 1 A, B, C). Dwóch bezobjawowych, ale RT-PCR-dodatnich pacjentów (pacjenci 14 i 15), obaj bez swoistych przeciwciał SAR-CoV -2, również wykazało silną indukowalną odpowiedź immunologiczną komórek T. Spośród pacjentów, którzy nie mieli wcześniej COVID{19}}, 45% wykazywało odporność indukowaną komórkami T. Odpowiedź u tych zdrowych nienaświetlonych osób kontrolnych z odpowiedzią komórek T nie różniła się statystycznie istotnie pod względem wielkości od rekonwalescencji pacjentów z COVID{23}} dla któregokolwiek ze stymulujących antygenów (wartość p=0, 271, 0,437, i 0,719 odpowiednio dla białek RBD, N i S1).

Rycina 1. Wytwarzanie IFN-g po stymulacji krwi pełnej rekonwalescencyjnych pacjentów z COVID{2}} i zdrowych nienarażonych osób kontrolnych białkiem RBD, N lub S1.

Wyniki stymulacji rekonwalescentów i kontroli odpowiednio białkiem RBD, N lub S1 pokazano na ryc. 1A, B i C. Na ryc. 1D odpowiedzi INF-g każdego pacjenta i na trzy antygeny są pogrupowane. Pacjenci z potwierdzoną infekcją COVID{4}} są ponumerowani od 1 do 15, z czego 14 i 15 pacjentów nie miało żadnych objawów. Osoby w wieku 16–33 lat nie miały wcześniej-19 COVID.

Po 24 godzinach stymulacji oznaczono stężenie IFN-g w osoczu przy użyciu dostępnego w handlu zestawu opartego na teście immunoenzymatycznym z ludzkim IFN-g (Biolegend nr kat. 43{10}},101). Wielkość stymulacji wyrażono jako gęstość optyczną przy 450 nm (OD450) dla krwi stymulowanej antygenem minus OD450 dla krwi bez stymulacji antygenem. OD 1,0 odpowiadało około 400 pg/ml IFN-g. Fitohemaglutyninę (PHA) zastosowano jako mitogen w końcowym stężeniu 5 mg/ml w IGRA w celu oceny jakości i zdolności odpowiedzi krwi. Wszyscy pacjenci i kontrole wykazywali maksymalne wytwarzanie cytokiny przez ten mitogen ze średnią gęstością optyczną (OD450) 2,54 (SD=0,13), co odpowiada około 1000 pg/ml IFN-g. Nie było różnicy w medianie poziomu IFN-g w niestymulowanej krwi rekonwalescentów i zdrowych osób z grupy kontrolnej (OD450=0,38, SD=0,14 vs OD450=0,32. SD=0.16). Te wyniki nie są wyświetlane. Na każdym wykresie narysowano poziomą linię reprezentującą wartość odcięcia dla stymulacji. Wartość tę określono, obliczając średnią plus dwa odchylenia standardowe odpowiedzi dziewięciu osób (pacjenci 16, 18, 19, 22, 27–31) z grupy kontrolnej o najniższej produkcji INF-g po stymulacji.

dyskusja i wnioski

Korzystając z łatwego do wykonania testu krwi pełnej, który ocenia odpowiedzi limfocytów T, stwierdziliśmy, że większość rekonwalescentów i znaczna część zdrowych nienarażonych osób miała specyficzną i silną odpowiedź limfocytów T określoną przez wytwarzanie INF-g po stymulacji z antygenami specyficznymi dla SARS-CoV{6}} (ryc. 1). Kilka badań, we wszystkich wykorzystujących test ELISPOT, wykazało obecność odpowiedzi limfocytów T u większości lub wszystkich rekonwalescentów z COVID{9}} (Braun i in., 2020, Grifono i in., 2020, LeBert i in. , 2020, Sekine i in., 2020, Moderbacher i in., 2020, Mateus i in., 2020, Peng i in., 2020).

Jednak jeśli chodzi o odpowiedź komórek T u zdrowych, nienaświetlonych kontroli, odnotowano wskaźniki odpowiedzi między 28 a 50 procent (Doshi, 2020, de Vries, 2020, Lipsitch i in., 2020, Sagar i in., 2020), a kilka badania wykazują brak odpowiedzi limfocytów T u pacjentów z grupy kontrolnej nieleczonych wcześniej COVID{8}} (de Vries, 2020, Moderbacher i in., 2020, Schwarzkopf i in., 2021). Większość z tych badań przeprowadzono za pomocą testu ELISPOT, ale we Włoszech i USA IGRA był również używany do wykrywania odpowiedzi komórek T SARS-CoV{13}} (Petrone i in., 2020, Murugesan i in. ., 2020). W obu badaniach wykryto specyficzną odpowiedź limfocytów T u rekonwalescentów; jednak IGRA nie wykrył odpowiedzi INF-g u zdrowych osób nienaświetlonych.

Istniejąca wcześniej odporność komórek T na SARS-CoV-2 u osób nieleczonych wcześniej z COVID{4}} została omówiona w kilku publikacjach (Altmann i Boyton, 2020, Dosho i in., 2020, de Vries, 2020, Sette i Crotty, 2020). Powód, dla którego specyficzna odpowiedź limfocytów T COVID{9}} może zostać wykryta u zdrowej, nienaświetlonej osoby, pozostaje niejasny i jest przedmiotem spekulacji. Większość badań ELISPOT z udziałem osób nieleczonych wcześniej z COVID{11}} wykorzystywała próbki krwi ludzkiej pobrane przed odkryciem wirusa SARS-CoV-2 w 2019 r., a więc przed jakąkolwiek możliwością narażenia. Z tego powodu te badania ELISPOT wykazały, że odpowiedź komórek T u nienarażonych zdrowych osób prawdopodobnie pochodzi z wcześniejszego kontaktu z krążącymi koronawirusami „przeziębienia” (Grifoni i in., 2020, Matheus i in., 2020) lub wcześniejszej ekspozycji na grypę i/lub wirusy CMV (Mahajan i in., 2020) lub inne antygeny wirusowe lub drobnoustrojowe (Tan i in., 2020). W naszym badaniu wykorzystaliśmy krew pobraną podczas pandemii od ochotników, którzy sami zgłosili zerowy kontakt, byli seronegatywni pod względem antygenu RBD COVID{21}} i nigdy nie wykazywali żadnych objawów COVID{22}}.

Dlatego nie możemy wykluczyć, że odpowiedź limfocytów T u niektórych zdrowych osób kontrolnych, które nie miały „naiwnego” COVID{1}}, pochodzi z bezobjawowych infekcji wirusem SARS-CoV-2. Przykładem tego są pacjenci 14 i 15 z naszego badania. Osoby te zostały sklasyfikowane jako pacjenci z COVID-19 z powodu pozytywnego wyniku RT-PCR; jednakże były one bezobjawowe i nie rozwinęły odpowiedzi przeciwciał przeciwko białku RBD, ale oba wykazywały silną odpowiedź komórek T.

Możliwe, że po kolonizacji nosogardzieli SARS-CoV-2 układ odpornościowy tych dwóch bezobjawowych pacjentów pozostawił u nich odpowiedź wyłącznie z komórek T pamięci i nie wykryto przeciwciał swoistych dla SARS-CoV-2 wywołany. Innym wyjaśnieniem jest to, że odpowiedź komórek T pochodzi z wcześniejszej infekcji podobnej do korony, a istniejąca wcześniej odpowiedź immunologiczna komórek T chroniła tych dwóch pacjentów przed rozwojem bardziej inwazyjnego wzorca choroby. Istniejące wcześniej reaktywne krzyżowo komórki T mogą być istotne w wyjaśnianiu niektórych różnic we wskaźnikach infekcji lub patologii (Le Bert i in., 2020, Sagar i in., 2020). Jeśli chodzi o kohortę naiwnych kontroli, wykluczyliśmy, że ta grupa zawiera znaczną liczbę osób zakażonych SARSCoV-2 z niewykrytą bezobjawową infekcją, głównie dlatego, że wszystkie integrandy grupy kontrolnej są IgG seronegatywne dla antygenu RBD.

Innym powodem jest to, że częstość występowania infekcji w Ekwadorze jest stosunkowo niska. W czasie przeprowadzania tego badania, we wrześniu 2020 r., Ekwador zgłosił około 200 000 potwierdzonych przypadków COVID{3}} (około 1,1 procent populacji). Oczywiście rzeczywista częstość występowania infekcji mogła być kilka razy wyższa, ale mimo to jest nieprawdopodobne, aby 45 procent tej grupy kontrolnej zostało zakażonych, a zatem patrzymy na odpowiedź komórek T specyficzną dla SARS-CoV{ {9}} infekcja.

Podsumowując, odkrycie wysokiego odsetka nienarażonych zdrowych osób z istniejącą wcześniej odpornością w Quito w Ekwadorze budzi oczekiwania, że ​​znaczna część naszej populacji może mieć komórki T reagujące na SARS-CoV-2, ponieważ wcześniejszej ekspozycji na grypę, wirusy CMV lub koronawirusy powodujące przeziębienie. Przyszłe badania powinny mieć na celu ustalenie, czy wcześniej istniejąca odpowiedź immunologiczna jest ochronna i/lub może przezwyciężyć cięższą chorobę COVID{6}} lub przyczynia się do szybszego powrotu do zdrowia.

Znaczenie i ograniczenia tego badania

Nasze badanie wykazało, że COVID{0}} IGRA jest użytecznym i czułym nowym narzędziem, które może ocenić narażenie na koronawirusy lub reaktywność krzyżową z podobnymi wirusami poprzez określenie uwalniania IFN-g po stymulacji antygenami specyficznymi dla wirusa. Technika jest prosta, stosunkowo tania i może być stosowana w laboratorium klinicznym. Z pewnością nie dotyczy to testu ELISPOT. Co więcej, test IGRA można łatwo skalować w badaniach populacyjnych i badaniach, w których wymagana jest duża liczba pacjentów. Wraz z serologią, IGRA może być wykorzystany do badania przesiewowego zarówno przeciwciał, jak i odpowiedzi limfocytów T u poszczególnych pacjentów, aby lepiej zrozumieć odporność na poziomie populacji i określić wcześniej istniejącą odporność u osób seronegatywnych.

Ważnym ograniczeniem naszego badania jest to, że próba badawcza nie jest reprezentatywna dla populacji. Nie zastosowano metod statystycznych do wstępnego określenia wielkości próby. Co więcej, nasz test nie różnicował produkcji IFN-g w komórkach CD4 plus lub CD8 plus, ale można rozważyć stymulację zdefiniowanymi peptydami CD8(plus) i CD4(plus) (Grifoni i in., 2020, Peng i in. , 2020) i został wykorzystany w IGRA opisanych w Petrone i in., 2020 oraz Murugesan i in., 2020). Za pomocą tego IGRA można również zmierzyć indukcję innych cytokin (Petrone i in., 2020). Podobnie IGRA może być wykorzystany do obserwacji po szczepieniu w celu określenia rozwoju odpowiedzi limfocytów T u zaszczepionych osób lub może być wykorzystany do określenia, czy obecność reagujących krzyżowo limfocytów T pamięci jest związana z odpornością ochronną i czy może zmniejszyć objawy choroby wywołane zakażeniem SARS-CoV-2 (Sagar i in., 2020).

Akceptacja etyczna i zgoda na uczestnictwo

Krew pobierano po uzyskaniu świadomej pisemnej zgody. Komisja Etyki Ministerstwa Zdrowia Ekwadoru zatwierdziła protokół badania 004–2020.

Konflikt interesów

Autorzy oświadczają, że nie mają sprzecznych interesów.

Autorskie Wkłady

Projekt badania; JHW i GE; Gromadzenie danych i eksperymenty laboratoryjne: GE, AG, JC, AMR i MMV; Analiza danych; JHW, GE i ET; Pisanie: JHW, GE i ET.

Podziękowanie

Wyrażamy naszą wdzięczność wszystkim darczyńcom i personelowi medycznemu zaangażowanemu w tę pracę, zwłaszcza Sandrze Vivero i Sandrze Fonseca, za pomoc w pobraniu próbek. Badanie to było wspierane przez fundusz badawczy z Universidad de las Américas. Sustainable Sciences Institute, San Francisco, Kalifornia, USA, oraz Fundacja „Por Todos” w Ekwadorze dostarczyły białko RBD i „wewnętrzny” test ELISA. Podziękowania dla Howarda E. Takiffa i Flora Pujola (IVIC, Wenezuela), Pauliny E. Andrade (USFQ, Ekwador) i Lilly Verhagen (UMC, Holandia) za owocne dyskusje.

Bibliografia

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L, et al. Porównanie testu cytomegalowirusa (CMV) z enzymatycznym immunosorbentem i kwantyfikatorem CMV uwalniania interferonu gamma w ocenie ryzyka zakażenia CMV u biorców przeszczepu nerki. J Clin Microbiol 2013;51(8):2501–7.

Altmann DM, Boyton RJ. SARS-CoV-2 Odporność komórek T: specyficzność, funkcja, trwałość i rola w ochronie. Sci Immunol 2020;5(49)eabd6160.

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M i in. Test serologiczny do wykrywania serokonwersji SARS-CoV-2 u ludzi. Nat Med 2020;26:1033–6.

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F i in. Limfocyty T reagujące na SARS-CoV-2- u zdrowych dawców i pacjentów z COVID{2}}. Przyroda 2020;587:270–4.

de Vries RD. Komórki T specyficzne dla SARS-CoV{1}}u nienarażonych ludzi: obecność krzyżowo reagujących komórek pamięci nie jest równoznaczna z odpornością ochronną. Sig Transduct Target Ther 2020;5:224.

Doshi P. Covid{0}}: czy wiele osób ma wcześniej istniejącą odporność? BMJ 2020;370: m3563.

Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, Mateus J, Dan JM, Moderbacher CR i in. Cele odpowiedzi komórek T na koronawirusa SARS-CoV-2 u ludzi z chorobą COVID{2}} i osób nienarażonych. Komórka 2020;181(7)1489–501.

Guevara A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. Tani test ELISA SARS-CoV-2 rRBD do wykrywania statusu serologicznego w ekwadorskiej populacji z COVID{3}}. Am J Trop Med Hyg [39_TD$DIFF]2021.

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A i in. SARS-CoV{1}} specyficzna odporność komórek T w przypadkach COVID{2}} i SARS oraz niezakażone kontrole. Przyroda 2020;584(7821):457–62.

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. Reaktywne krzyżowo limfocyty T pamięci i odporność stada na SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol 2020.

Mahajan S, Kode V, Bhojak K, Magdalene CM, Lee K, Manoharan M i in. Immunodominujące epitopy komórek T z antygenu kolczastego SARS-CoV{2}} ujawniają silną wcześniej istniejącą odporność komórek T u osób nienarażonych. bioRxiv 2020.

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM i in. Selektywne i krzyżowe epitopy komórek T SARS-CoV{1}} u nienaświetlonych ludzi. Nauka 2020;370 (6512):89–94.

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D i in. Specyficzna dla antygenu odporność adaptacyjna na SARS-CoV-2 w ostrym COVID{3}} oraz powiązania z wiekiem i ciężkością choroby. komórka 2020; S0092-8674(20):31235–6.

Murugesan K, Jagannathan P, Pham TD, Pandey S, Bonilla HF, Jacobson K i in. Test uwalniania interferonu gamma do dokładnego wykrywania odpowiedzi limfocytów T SARS-CoV-2. Clin Infect Dis 2020;ciaa1537.

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H i in. Wykrywanie odporności humoralnej i komórkowej swoistej dla SARS-CoV-2- u osób rekonwalescentów z COVID{2}}. Odporność 2020;52(6)971–7.

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, et al. Testy uwalniania interferonu gamma do wykrywania infekcji Mycobacterium tuberculosis. Clin Microbiol Rev 2014;27(1):3–20.

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D i in. Szeroka i silna pamięć limfocytów T CD4 plus i CD8 plus indukowana przez SARS-CoV{3}} u osób rekonwalescentów w Wielkiej Brytanii po COVID{4}}. NatImmunol 2020.

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T i in. Badanie krwi pełnej w celu zmierzenia swoistej odpowiedzi na SARS-CoV-2-u pacjentów z COVID{2}}. Clin Microbiol Infect 2020.

Sagar M, Reifler K, Rossi M, Miller NS, Sinha P, White L i in. Niedawna endemiczna infekcja koronawirusem jest związana z łagodniejszym COVID{0}}. J Clin Invest 2020.

Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D, Klump H, Heinold A, Heinemann FM i in. Odporność komórkowa u rekonwalescentów z COVID{0}} z zakażeniem potwierdzonym metodą PCR, ale z niewykrywalnymi swoistymi IgG SARS-CoV-2-. Emergowa choroba zakaźna. 2021;27(1).

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A i in. Silna odporność limfocytów T u rekonwalescentów z bezobjawowym lub łagodnym COVID{2}}. Komórka 2020;183(1)158–68.

Sette A, Crotty S. Istniejąca wcześniej odporność na SARS-CoV-2: wiadome i niewiadome. Nat Rev Immunol. 2020;20(8)457–8.

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. Istniejącej wcześniej reakcji krzyżowej z SARS-CoV{4}}, w której pośredniczą limfocyty T, nie można wytłumaczyć wyłącznie wcześniejszą ekspozycją na endemiczne ludzkie koronawirusy. bioRxiv 2020;2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com