Sygnalizacja cząsteczek ludzkich komórek skóry jako celów kosmetologii iniekcyjnej

Proszę o kontaktoscar.xiao@wecistanche.compo więcej informacji

Wstęp:Starzenie się skóry to naturalny proces, którego nie da się zatrzymać. Istnieje jednak wiele sposobów na złagodzenie przedwczesnego starzenia się skóry i zmniejszenie objawów, które już się pojawiły. Jednym z nich jest podskórne podawanie preparatów zawierających kombinację kwasu hialuronowego, aktywnych aminokwasów i peptydów zapewniających kliniczny efekt przeciwstarzeniowy. Celem niniejszych badań jest zbadanie in vitro nowych cząsteczek sygnałowych o działaniu przeciwstarzeniowym i wpływie wypełniaczy kwasu hialuronowego na ich ekspresję.

Metody:Badania przeprowadzono z wykorzystaniem kultur komórkowych ludzkiej skóry twarzy: 1)mieszanej hodowli keratynocytów i fibroblastów ludzkiej skóry twarzy oraz 2)hodowli keratynocytów ludzkiej skóry twarzy wzbogaconej komórkami Merkla. Do identyfikacji markerów starzenia wykorzystano immunocytochemię, mikroskopię konfokalną i Western blot.

Wyniki:HA-Y i HA-S aktywowały ekspresję Klotho w przypadku starzenia się mieszanej hodowli keratynocytów ludzkiej skóry i komórek Merkel. Wzrost ekspresji MTH-1 wraz ze starzeniem się kultur dostarcza dowodów na aktywację mechanizmów obronnych przeciwko reaktywnym formom tlenu, które gromadzą się wraz ze starzeniem, pod wpływem HA-S i HA-Y. Po dodaniu do hodowanych komórek zarówno HA-S, jak i HA-Y wystąpił statystycznie uzasadniony wzrost w obszarze ekspresji markerów receptora 1A i 1B melatoniny.

Wniosek:Badania te wykazały, że badane wypełniacze wykazują działanie biologiczne, świadczące o stymulacji procesów naprawczych w skórze pod ich kontrolą. Słowa kluczowe: starzenie się skóry, kwas hialuronowy, aktywne aminokwasy, kolagen, procesy naprawcze, kloto, zegar, komórki Merkla

Wstęp

Na rynku co roku pojawia się wiele produktów kosmetycznych, ale tylko nieliczne powstały w oparciu o najnowsze osiągnięcia nauki i techniki, wykorzystując wiedzę z zakresu fizjologii i biochemii skóry oraz złożone interakcje międzykomórkowe.purytanie witamina cGłównymi składnikami dzisiejszych innowacyjnych kosmetyków są ekstrakty roślinne i składniki otrzymywane metodami biotechnologii i bioinżynierii, w tym peptydy, kompleksy peptydowe, oligo- i polisacharydy, witaminy, enzymy i antyoksydanty. Na innowacyjność produktów medycznych Novacutan składa się rozwiązanie technologiczne o nazwie HOPAAB (Hyaluronate Optically Pure Amino Acid Bond), połączenie kwasu hialuronowego, aktywnych aminokwasów i peptydów. HOPAAB to kompleks optycznie czystych aminokwasów wbudowanych w strukturę sieci kwasu hialuronowego, który aktywuje ekspresję cząsteczek sygnałowych prowadzących do zmian w metabolizmie, funkcji i rozwoju uszkodzonych komórek Kwas hialuronowy jest unikalnym biopolimerem o właściwościach hydrofilowych i działaniu nawilżającym skórę.

Kliknij tutaj, aby dowiedzieć się więcej

Geriatrzy przewidują wydłużenie życia w Rosji z obecnych 73,5 lat do 80,1 lat do 2030 r. Utrata atrakcyjności fizycznej często prowadzi do spadku samooceny i jakości życia, zwłaszcza w wieku 35-60 lat, a to grupa ludzi jest najbardziej zainteresowana poprawą swojego wyglądu. HA-Y i HA-S podaje się różnym grupom wiekowym: podczas gdy HA-Y może być stosowany u młodszych pacjentów powyżej 25 roku życia w celu zwalczania cieni pod oczami i poprawy nawilżenia skóry, HA-S ma podwójne stężenie aminokwasy, zwalcza zmarszczki i zapewnia efekt liftingu, może być stosowany u pacjentów w wieku od 35 do 65 lat.

W niezależnym laboratorium w Belgii (StratiCELL SA) przeprowadzono badania wpływu preparatów HA-Y i HA-S na różne środowiskowe markery starzenia stresu oksydacyjnego (światło niebieskie, promieniowanie UVA/UVB, pył miejski i promieniowanie podczerwone). Badania stresu oksydacyjnego mają na celu podkreślenie możliwych skutków ochronnych w różnych trudnych warunkach w dwóch modelach, eksplantach ludzkiej skóry ex-vivo i jednowarstwowych hodowlach in vitro normalnych ludzkich fibroblastów skóry (NHDF). Działanie ochronne testowanych produktów oceniano wobec wzrostu liczebności dimerów pirymidyny cyklobutenu (CPD) w części naskórkowej eksplantów skóry ex-vivo po napromieniowaniu UVA/UVB; wpływ światła niebieskiego na ekspresję genów z fibroblastów NHDF; wpływ zanieczyszczeń (kurz miejski, UbD) na ekspresję genów w fibroblastach NHDF; oraz wzrost produkcji reaktywnych gatunków tlenu (ROS) przez fibroblasty NHDF po napromieniowaniu podczerwonym-A. Podczas tego badania pojawiły się pewne interesujące odkrycia, na przykład korzystny wpływ wypełniaczy HA na wywołany niebieskim światłem stres oksydacyjny; regulacja w górę białka transkryptu 3 indukowanego uszkodzeniem DNA (DDIT-3) w testach pyłu miejskiego itp.

Wypełniacze HA zawierają składniki aktywne klinicznie skuteczne, które są dobrze udokumentowane.sistancheNa przykład wolne aminokwasy przyczyniają się do poprawy równowagi wodno-białkowej skóry, utrzymując elastyczność skóry. Peptydy działają rewitalizująco na uszkodzoną skórę, a wprowadzenie składników nawilżających daje oczekiwany efekt nawilżenia i skutkuje napięciem skóry i poprawą cery.3

Peptydy stanowią znakomity przykład wielofunkcyjnych środków, które są szeroko stosowane przez czołowych światowych producentów kosmetyków. Peptydy nie tylko skutecznie walczą ze zmianami skórnymi związanymi z wiekiem, ale także zapewniają ochronę przed szkodliwymi czynnikami.”

Celem tego badania jest zbadanie wpływu jednego produktu na bazie HA do wstrzykiwania (zapakowanego w strzykawkę jako sterylny roztwór gotowy do użycia) na ekspresję cząsteczek sygnałowych potencjalnych geroprotektorów w hodowlach komórek skóry twarzy.

Materiały i metody

Badanie przeprowadzono przy użyciu kultur komórkowych ludzkiej skóry twarzy:1-mieszana hodowla keratynocytów i fibroblastów ludzkiej skóry twarzy oraz 2-hodowla keratynocytów ludzkiej skóry twarzy wzbogacona komórkami Merkel. Drugi obiekt modelowy został wybrany ze względu na jego unikalną subpopulację. Komórki Merkla to neuroendokrynne komórki skóry zlokalizowane w zewnętrznych warstwach mieszków włosowych, w warstwie kolczystej i podstawnej naskórka oraz w błonach śluzowych. Funkcje endokrynologiczne komórek Merkla są związane z różnymi czynnikami wzrostu i zlokalizowanymi tam neuropeptydami. Ponieważ komórki Merkel zawierają bombezynę, wazoaktywne polipeptydy jelitowe, czynniki wzrostu nerwów i metenkefalinę, mają one wpływ troficzny na wzrost przydatków skóry i nerwów.

cistanche może przeciwdziałać starzeniu

Kultury komórkowe zostały wyekstrahowane z próbek skóry dorosłych uzyskanych podczas okrągłych operacji liftingu twarzy (kobiety urodzone w latach 1973, 1971 i 1967). Komisja Etyki Instytutu Bioregulacji i Gerontologii w Sankt Petersburgu zatwierdziła wszystkie aspekty projektu badania, a wszyscy uczestnicy otrzymali pisemną zgodę. Badanie zostało przeprowadzone zgodnie z Deklaracją Helsińskich Zasad Etycznych. W celu oceny ekspresji markerów wieku przeprowadzono hodowlę do pasażu 2 („młode” komórki) i pasażu 6 („stare” komórki) dla hodowli mieszanej keratynocytów i fibroblastów oraz do pasażu 1 i pasażu 3 dla hodowli wzbogaconej Komórki Merkla. Te punkty kontrolne zostały wybrane ze względu na trudności w utrzymaniu komórek Merkel i keratynocytów w hodowli oraz ich ograniczony potencjał proliferacyjny.

Wypełniacz Y (HA-Y) z kwasem hialuronowym (2,3% wodny roztwór nieusieciowanego HA 1,4 MDa zawierający argininę, walinę, treoninę, fenyloalaninę, glicynę, kwas glutaminowy, prolinę i metioninę); i wypełniacz S kwasu hialuronowego (HA-S) (2,3% wodny roztwór 1,4 MDa nieusieciowanego HA zawierającego argininę, walinę, treoninę, fenyloalaninę, glicynę, kwas glutaminowy, prolinę i metioninę). Środek podawano począwszy od pasażu 1. W celu określenia optymalnego stężenia do analizy wypełniacza HA przeprowadzono wstępny eksperyment ustalania dawki.co to jest cistanche?Zgodnie z pomiarem żywotności komórek 3% wypełniacza HA wybrano z pięciu stężeń. Środek podawano przy każdym pasażu.

Badanie obejmowało 3 grupy:

1-grupa kontrolna (średni kwas=hialuronowy);2-podawanie HA-Y; 3-administracja HA-S.

Analiza immunocytochemiczna

Do badań immunocytochemicznych zastosowano następujące pierwotne przeciwciała monoklonalne: kolagen typu I (1:150, Abcam), elastyna (1:50, Abcam), AP-1(1:200, Sigma), Klotho (1: 250, Abcam), MTH-1 (1:1000, Abcam), receptor melatoniny 1A (1:200, Abcam), receptor melatoniny 1B (1:100, Abcam), zegar (1:100, Abcam ), cytokeratyna 20 (1:150, Dako). Drugorzędowe przeciwciała skoniugowane z Alexa Fluor 488 i 647 (1:1000, Abcam) zastosowano do mikroskopii immunofluorescencyjnej. Mikroskopię konfokalną przeprowadzono przy użyciu mikroskopu Olympus FV 1000 (Japonia).

Ponieważ badanie dotyczyło unikalnych komórek skóry Merkel, aby potwierdzić istnienie subpopulacji tych komórek w hodowli, użyliśmy specjalnego markera cytokeratyny-20. Zastosowaliśmy metodę podwójnego znakowania przy użyciu przeciwciał przeciwko cytokeratyny-20(zielona fluorescencja) oraz przeciwciał przeciwko Klotho (czerwona fluorescencja). Obszar ekspresji obliczono w odniesieniu do komórek Merkel, które były immunododatnie wobec komórek CK-20.

Analiza Western Blot

Wszystkie komórki poddano lizie na lodzie za pomocą zestawu frakcjonującego białka subkomórkowego zawierającego koktajl inhibitora proteazy (Thermo Fisher, USA). Lizaty białek rozdzielono metodą elektroforezy w żelu dodecylosiarczan sodu-poliakrylamid (SDS-PAGE) i przeniesiono na membrany nitrocelulozowe (Invitrogen, USA ).

Membranę blokuje się komercyjnym zestawem iBindTM Solution Kit (Invitrogen, USA), a następnie inkubuje się z pierwszorzędowymi i drugorzędowymi przeciwciałami przy użyciu urządzenia iBind (Invitrogen, USA) przez 2 godziny. W tym badaniu zastosowano przeciwciała królicze anty-Klotho (1:1000, Abcam), królicze anty-AP-1(1:500, Sigma), królicze anty- -aktyna (1:5000,Abcam ) i drugorzędowe przeciwciało sprzężone z peroksydazą chrzanową (HRP-) (przeciwkrólicze IgG; 1:10000; Invitrogen). Intensywność każdego prążka określono ilościowo za pomocą oprogramowania iBright Analysis Software (Invitrogen).

Analiza statystyczna danych eksperymentalnych obejmowała obliczenie średniej arytmetycznej, odchylenia standardowego i przedziałów ufności dla każdej próbki. Porównanie grup przeprowadzono przy użyciu kryterium U Manna-Whitneya.

Wyniki badań in vitro właściwości geroochronnych wypełniaczy na bazie HA

Wyniki badań przeprowadzonych na hodowli skóry ludzkiej wzbogaconej komórkami Merkla

Wraz z dłuższym czasem hodowli forma komórek znakowanych CK-20 zmieniła się z zaokrąglonej na bardziej spłaszczoną i dendrytyczną w ciągu 3-8 dni. W ciągu 8 dni po rozpoczęciu hodowli komórki Merkel nie wykazywały żadnych oznak dezorganizacji jądrowej charakterystycznej dla apoptozy.

Przetwarzanie statystyczne danych analizy morfometrycznej dla ekspresji markera Klotho w grupie kontrolnej (z podaniem kwasu hialuronowego) nie wykazało różnic między pasażami 1 i 3. Po podaniu HA-S w pasażu 1 obszar ekspresji wyniósł 5,28±0.74 procent, podczas gdy w pasażu 3 prawie podwoił się do 9.23±0.89 procent. Podobny obraz zaobserwowano w grupie z podawaniem HA-Y, gdzie ekspresja Klotho wraz z wiekiem wzrosła 2-krotnie. W ten sposób HA-Y i HA-S aktywowały ekspresję Klotho w przypadku starzenia się mieszanej hodowli keratynocytów ludzkiej skóry i komórek Merkel.

Inną cząsteczką sygnalizacyjną, która zapobiega starzeniu się, jest melatonina (MT).Cistanche przeciw starzeniuWażną cechą melatoniny jest jej zdolność do kontrolowania podziału komórek. MT hamuje mitozę komórek poprzez opóźnienie metafazy podziału.

Badaliśmy również ekspresję receptorów melatoniny. Po dodaniu do hodowanych komórek zarówno HA-S, jak i HA-Y wystąpił statystycznie uzasadniony wzrost w obszarze ekspresji markera receptora melatoniny 1A.

Poniżej znajdują się mikrofotografie (Figura 1) przedstawiające ekspresję markera receptora 1A melatoniny. Należy zauważyć, że czerwoną fluorescencję obserwowano nie tylko w komórkach Merkla, ale także w keratynocytach, chociaż była ona bardziej eksprymowana w komórkach Merkla, które miały działanie troficzne na rosnące przydatki skóry i nerwy.

Analiza danych dotyczących względnego obszaru ekspresji receptorów melatoniny 1B wykazała, że ​​w pasażu 1 nie było statystycznie istotnych różnic między grupą kontrolną a grupą, której podawano HA-Y/HA-S, natomiast w pasażu 3 względne powierzchnia ekspresji receptora markera MelRIB wzrosła o 4 procent z wynikami badania przeprowadzonego na mieszanej hodowli ludzkich fibroblastów i keratynocytów

Kolejnym etapem badań było badanie właściwości geroochronnych nowych leków HA-Y i HA-S na mieszanej hodowli ludzkich fibroblastów i keratynocytów. Do badań wybrano następujące markery immunohistochemiczne: elastyna, Klotho, MTH1, AP-1, zegar (dane w tabeli 1).

Do zbadania aktywności syntetycznej komórek zastosowano przeciwciała przeciwko elastynie. Najbardziej charakterystyczne dla fotostarzenia skóry są zmiany we włóknach elastycznych.

W stanie normalnym (grupa kontrolna) wraz ze starzeniem się hodowli skóry zaobserwowano spadek ekspresji elastyny ​​przez fibroblasty skóry ludzkiej. W grupach z podaniem HA-Y i HA-S zaobserwowano podobny obraz, jednak ekspresja markera elastyny ​​w „młodszych” hodowlach komórkowych z HA-Y i HA-S przewyższała ekspresję w próbkach kontrolnych o {{ 4}},17 i 00,26 razy. Wystąpił również statystycznie ważny wzrost obszaru ekspresji elastyny ​​dla próbek „starszych” hodowli komórkowych z HA-Y i HA-S odpowiednio o {{10}}.14 i 0,19 razy, jako w porównaniu z próbkami kontrolnymi.

Działanie HA-Y i S w mieszanej hodowli fibroblastów i keratynocytów ludzkiej skóry wyzwala aktywność syntezy komórek, o czym świadczy wyższa ekspresja elastyny ​​zarówno w pasażu 3, jak i pasażu 6 (Figura 2).

AP{{0}} lub białko aktywatorowe-1 to czynnik transkrypcyjny, który reguluje ekspresję genów w odpowiedzi na różne bodźce. Takie bodźce obejmują cytokiny, czynniki wzrostu, stres oraz różne infekcje bakteryjne i wirusowe. „6 Badanie to wykazało statystycznie uzasadniony wzrost średniego obszaru ekspresji AP-1 w próbkach kontrolnych „starszych” kultur komórkowych w porównaniu z „młodszymi” kulturami komórkowymi; natomiast w grupach eksperymentalnych wraz ze starzeniem się hodowli zaobserwowano spadek ekspresji znacznika AP-1 o 0,2 razy w przypadku HA-Y i 0,24 razy w przypadku HA-S , w porównaniu z grupą kontrolną.

Wystąpił również statystycznie ważny wzrost w obszarze ekspresji MTH{{0}} dla próbek „starszych” hodowli komórkowych z HA-Y i HA-S o 0.1{{12 }} i 0.11 razy, odpowiednio, w porównaniu z próbkami kontrolnymi. Wyższa ekspresja MTH-1 w „starszych” kulturach zapewnia nadtlenek (H2O2). Analiza względnego obszaru ekspresji Klotho w mieszanej hodowli ludzkich fibroblastów i keratynocytów wykazała statystycznie ważny wzrost średniego obszaru ekspresji Klotho w „starszych” hodowlach komórkowych z HA-Y i HA-S odpowiednio o 0,72 i 0,73 razy , w porównaniu z próbkami kontrolnymi. Wyniki te potwierdzono analizą Western blot. Ekspresja białka miała ten sam tryb, jak pokazano na rysunku 3. Wyższa ekspresja Klotho pod wpływem HA-Y i HA-S świadczy o zwiększonej odporności na stres oksydacyjny, co jest szczególnie ważne w profilaktyce starzenia i ekspozycji na promieniowanie UV .

Przeprowadzając analizę immunocytochemiczną, uwidoczniono marker CLOCK w cytoplazmie fibroblastów. Wystąpił statystycznie uzasadniony spadek względnego obszaru ekspresji CLOCK w próbkach kontrolnych w hodowli starzejących się komórek fibroblastów, podczas gdy w przypadku dodawania HA-Y i HA-S do hodowli komórkowych różnica między „młodszymi” i „starszymi” kulturami wyrównane. Stwierdzono również, że w hodowli fibroblastów w pożywce z HA-Y nastąpił wzrost względnej powierzchni ekspresji w pasażu 6 o 1,9 raza w porównaniu z grupą kontrolną. HA-S miał następujący wpływ na hodowlę fibroblastów: jego podanie zwiększyło ekspresję CLOCK 1,5 raza w pasażu 3 i 2 razy w pasażu 6.

Dyskusja

Według badania „Podrabiane produkty w medycynie estetycznej: spojrzenie lekarza i konsumenta” (2019, przeprowadzone przy udziale Merz Rosja i BrandMonitor), przemyt podrabianych towarów jest szacowany przez ekspertów na 200 mln dolarów. Podrabiane produkty nie tylko oznaczają straty dla producentów, ale mogą powodować nieodwracalne szkody dla zdrowia. Dlatego wprowadzenie na rynek nowego rosyjskiego rewitalizatora wtryskowego przetestowanego w wiodących laboratoriach w Belgii i Rosji ma kluczowe znaczenie.

Poniżej wymienione cechy markerów badanych w niniejszej pracy obejmują działanie geroprotekcyjne, ich wpływ na homeostazę skóry oraz zmianę ich ekspresji indukowaną przez preparaty HA-Y i HA-S.

Podawanie wypełniaczy HA zwiększa ekspresję białka Klotho w hodowli komórek Merkel i keratynocytów. Ponieważ białko to zwiększa odporność na stres oksydacyjny i reguluje cykl komórkowy, jego wyższa ekspresja jest korzystnym czynnikiem spowalniającym procesy starzenia w hodowli komórkowej. Klotho jest białkiem transbłonowym; jego nadekspresja wydłuża żywotność komórek. Brak tego białka u myszy knockout powoduje ich przyspieszone starzenie.8 Większość prac opisujących funkcje Klotho bada rolę tego białka w mechanizmach tłumienia różnych związanych z wiekiem patologii układu nerwowego, naczyniowego i nerkowego”. Jeśli chodzi o jego wpływ na starzenie się fibroblastów, doświadczenia in vitro wykazały, że w przypadku uszkodzenia DNA Klotho przyczynia się do opóźnienia starzenia się komórek w pierwotnych ludzkich komórkach fibroblastów MRC-5 poprzez szlak apoptotyczny (p53/{{8 }}zależny)." Utrata aktywności Klotho w pierwotnych komórkach fibroblastów MRC-5 prowadzi do fenotypu przedwczesnego starzenia, który zależy od białka p53 stymulującego kolejny czynnik CDK p21 zależny od p-53-. Ten wynik wskazuje na zaangażowanie Klotho w ibitowanie procesu starzenia poprzez ścieżkę wrażliwą na p53/p21-. Z powyższego wynika, że ​​aktywacja ekspresji Klotho pod wpływem HA-Y i HA-S może chronić komórki przed przedwczesnym starzeniem się.

Wykazano, że HA-Y i HA-S mają pozytywny wpływ na ekspresję receptorów dla melatoniny typu 1A i 1B w hodowli komórek Merkla i keratynocytów. HA-Y stymulował ekspresję receptora mel-atoniny 1B w starzejącej się kulturze znacznie bardziej niż HA-S. Melatonina jest silnym przeciwutleniaczem. Bezpośrednie działanie antyoksydacyjne melatoniny realizowane jest poprzez dezaktywację wolnych rodników powstających podczas aktywności komórek. Ponadto, stymulując syntezę komórkowych enzymów antyoksydacyjnych, hormon ten chroni jądrowe DNA przed utlenianiem wolnorodnikowym.

Kilka badań na zwierzętach laboratoryjnych wykazało, że melatonina ma działanie przeciwnowotworowe, onkostatyczne. W eksperymencie aktywacja funkcji szyszynki lub egzogenne podawanie melatoniny prowadziło do niższego wskaźnika występowania guza, podczas gdy pinealektomia miała stymulujący wpływ na wzrost guza. "

Jak wszystkie inne hormony, melatonina działa poprzez specjalne receptory 2 typów: receptory melatoniny 1A (MelRIA) i receptory melatoniny 1B (MelRIB).cistanche beneficiosMelRIA i MelRIB zostały znalezione i w pełni scharakteryzowane w siatkówce, jądrze nadskrzyżowaniowym, mięśniówce macicy, łożysku, komórkach ziarnistych i ciałku żółtym, komórkach odpornościowych, przewodzie pokarmowym i skórze.

Działanie HA-Y i HA-S w mieszanych hodowlach ludzkich komórek skóry wyzwala syntetyczną aktywność komórek, o czym świadczy wyższa ekspresja elastyny ​​zarówno w „młodszych” jak i „starszych” kulturach przy podawaniu tych leków do pożywki . Elastoza odnosi się do zmian zwyrodnieniowych w tkance skórnej ze zwiększonym odkładaniem materiału elastynowego. Oczywistą tego oznaką jest elastoza, czyli pojawienie się połączeń z amorficznego materiału elastynowego. Oprócz promieni słonecznych na włókna elastyny ​​mogą wpływać zmiany w funkcjonowaniu układu nerwowego, hormonalnego, immunologicznego oraz przemiany materii. Tym samym żeńskie hormony płciowe (estrogeny) przyczyniają się do utrzymania jędrności i elastyczności skóry, stymulując syntezę przez fibroblasty włókien kolagenu, elastyny ​​i kwasu hialuronowego. Gwałtowny spadek poziomu estrogenów u kobiet w okresie menopauzy może skutkować odwodnieniem skóry i powstaniem zmarszczek. Jednocześnie wraz z wiekiem następuje wzrost produkcji cytokin przeciwzapalnych, które mogą powodować zmiany zapalne, a następnie degradację kolagenu, elastyny ​​i innych elementów skóry.

Marker ekspresji AP-1 wzrastał wraz z wiekiem, natomiast pod wpływem HA-Y i HA-S obniżał się do poziomu kultury „młodszej”. AP-1 może regulować ekspresję i funkcję regulatorów cyklu komórkowego, takich jak cyklina Dl, cyklina A, cyklina E, p53, p21Cipl, p16Ink4a i p19ARF, tym samym odgrywając ważną rolę w procesach proliferacji komórek.

Stwierdzono, że AP-1 bierze udział w procesach zmniejszania syntezy kolagenu typu I podczas fotostarzenia. Dzieje się to następująco: słoneczne promieniowanie UV wytwarza reaktywne formy tlenu (ROS), które aktywują czynnik wzrostu i receptory cytokin na fibroblastach skóry. Aktywowane receptory stymulują elementy kaskady sygnałowej p38 i JNK;MAPK, a następnie c-Fos i c-Jun łączą się, tworząc AP-1, który stymuluje transkrypcję metaloproteinazy macierzy (MMP) (MMP).18 Wyższa ekspresja MTH{ {10}} w „starszych” kulturach dostarcza dowodów na aktywację mechanizmów obronnych przeciwko reaktywnym formom tlenu, które gromadzą się wraz ze starzeniem, pod działaniem HA-S i HA-Y.

Obecnie istnieje niewiele badań, które analizują MTH-1 jako marker starzenia. Ponieważ funkcją tego enzymu jest hydroliza utlenionych puryn, jest on bezpośrednio zaangażowany w regulację starzenia poprzez reaktywne formy tlenu (ROS). Tym zajmuje się większość badań dotyczących MTH-1. Yoshimura i inni” wykazali na hodowli ludzkich fibroblastów, że MTH-1 może naprawić uszkodzenia DNA spowodowane oksydacją nadtlenkiem (H2O2).

The Clock marker expression was higher in a mixed culture of fibroblasts and keratinocytes when adding HA-Y to the medium. This marker regulates cell metabolism, being a kind of "intracellular clock" that regulates the activities of the cell.>Taki wzrost przyczynił się do wydłużenia życia zarówno kultur fibroblastów, jak i całego organizmu.

Ekspresja genów Clock i Perl w ludzkich komórkach skóry, takich jak keratynocyty, melanocyty i fibroblasty skóry, potwierdza obecność w nich rytmów okołodobowych.20 Rytmy okołodobowe to mechanizmy adaptacyjne żywych organizmów, związane ze zmianą dnia i nocy, którego głównym celem jest regulacja metabolizmu. W badaniach porównano rytmy dobowe w różnych typach komórek skóry i stwierdzono, że skóra jest nie tylko pod wpływem centralnego zegara jądra nadskrzyżowaniowego, ale także posiada własne, samoregulujące się rytmy dobowe, specyficzne dla każdego typu komórek (keratynocyty, melanocyty i fibroblasty).2

Białko CLOCK bierze udział w regulacji ekspresji genów ICAM-I, VCAM-I i CCL-2 związanych z adhezją komórek.22 Wpływ niedoboru białka CLOCK na starzenie się badano na myszach. Funkcjonowanie rytmu dobowego w zegarze centralnym nie ustało, ponieważ czynnik transkrypcyjny CLOCK można było zastąpić NPAS2, ale w częściach peryferyjnych taka zamiana jest niemożliwa. „Należy podkreślić, że skóra jest również organem obwodowym.

Wnioski

Uzyskane wyniki wskazują, że kuracja wypełniaczem do twarzy z kwasem hialuronowym wpływa na ekspresję markerów przeciwstarzeniowych, a tym samym na hepatoprotekcję. Testy na kulturach komórkowych wykazują aktywację działania syntetycznego, zwiększone właściwości antyoksydacyjne komórek skóry oraz ochronę przed przedwczesnym starzeniem się komórek pod wpływem wypełniaczy HA （Novacutan®）.R

Ten artykuł pochodzi z Dermatologii klinicznej, kosmetycznej i badawczej