Działania przeciwdepresyjne i poprawiające funkcje poznawcze tradycyjnego chińskiego zioła Cistanche

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Dongfang Wang,1 Haizhen Wang,2 i Li Gu2

1. Wstęp

Depresja i związane z nią zaburzenia nastroju, szacuje się, że 12-17 procent populacji doświadcza przynajmniej jednego epizodu w życiu, należą do głównych przyczyn upośledzenia umysłowego i są uważane za jeden z głównych problemów zdrowia publicznego na świecie [1]. Szczególnie istotne jest to, że znaczna część pacjentów z depresją cierpi z powodu utraty pamięci, problemów z koncentracją, zmniejszenia energii lub zmęczenia, utraty zainteresowania lub przyjemności z hobby i zajęć, trudności ze snem, wczesnego przebudzenia lub nadmiernego snu. Chociaż substraty neuronalne nieprawidłowości w depresji i powiązanych zespołach są niejasne, ogólnie przyjmuje się, że upośledzenie neuroplastyczności i odporności komórkowej powoduje patofizjologię depresji, a skuteczne leczenie może zależeć od interwencji poziomu neuroprzekaźników [2]. Podejście do leków na depresję zasadniczo opiera się na klasycznym systemie monoaminowym

hipoteza, która głosi, że rozregulowanie monoamin, zwłaszcza serotoniny (5-HT) i norepinefryny (NE) przyczynia się do patogenezy depresji, a interwencja układu neuroprzekaźników za pomocą agonistów dopaminy i dopaminy-noradrenergicznych modulatorów złagodziłaby objawy dużej depresji zaburzenia [3]. Chociaż powszechnie przepisywane, skuteczność lecznicza leków przeciwdepresyjnych jest wątpliwa, a efektu ubocznego nie można zignorować, ponieważ znaczna część pacjentów nie reaguje na manipulację układem monoaminowym [4]. Ostatnio nowe teorie patogenezy depresji wskazują, że wiele systemów, w tym szlaki zapalne, szlak stresu oksydacyjnego, oś podwzgórze-przysadka-nadnercza (HPA), system metaboliczny i bioenergetyczny, szlaki neurotroficzne, system glutaminianowy, system opioidowy i układu cholinergicznego są ściśle związane z wystąpieniem depresji [3]. Dowody wskazują, że interwencja z wieloma celami przyniosła lepszą skuteczność niż interwencja z jednym celem [5]. Pilnie potrzebne są nowe terapie oparte na teorii wielosystemowej dysregulacji.

Podobno produkty ziołowe spożywały ponad połowę populacji USA [6]; Na całym świecie rośnie zainteresowanie i zapotrzebowanie na zioła lub produkty ziołowe jako uzupełniający sposób leczenia depresji. Stwierdzono, że wiele roślin leczniczych wykazuje korzystne działanie łagodzące depresję. Zioła, które mają działanie hamujące depresję i poprawiające funkcje poznawcze, obejmują rokitnik [7], Ginkgo biloba [8], Piper nigrum [9], Hypericum perforatum [10], Griffonia simplicifolia [11]. Skojarzone podawanie kwasu ferulowego i piperyny wykazywało u myszy synergistyczne działanie przeciwdepresyjne poprzez manipulowanie układem monoaminergicznym [7]. Albiflorin charakteryzował się wysokim selektywnym powinowactwem do receptorów i transporterów neuroprzekaźników oraz istotnie zwiększonym zewnątrzkomórkowym stężeniem 5-HT i NE w podwzgórzu swobodnie poruszających się szczurów [12]. Zioło lecznicze Melissa officinalis L. łagodziło depresyjne zachowania myszy, wywierając wpływ na poziom neuroprzekaźników serotoninergicznych [13]. Te zioła lub wywary, opracowane jako alternatywne lekarstwa na depresję, pomagają złagodzić objawy depresji i stanowią nowe źródło dla rozwijającego się leku przeciwdepresyjnego.Herb CistancheGatunki, rozpowszechnione na suchych ziemiach i pustyniach w północnej części Chin, są tradycyjnymi ziołami medycyny chińskiej i są szeroko stosowane w leczeniu różnych chorób od ponad 1000 roku w Chinach. Wielokrotna skutecznośćzioło Cistanchewywar waha się między właściwościami afrodyzjakowymi [14], immunoprotekcyjnymi [15], antyoksydacyjnymi [16] i hepatoprotekcyjnymi [17]. Odwary z C. deserticola indukują jądrowe enzymy steroidogenne [18], promują odpowiedź erekcji prącia i skracają okres utajenia reakcji erekcji u wykastrowanych szczurów [19].Herb Cistanchedonoszono, że hamuje aktywność neuronów dopaminergicznych poprzez regulację genów hamujących apoptozę i czynników neurotroficznych [20]. Odwary z C. tubulosa poprawiły dysfunkcję poznawczą powodowaną przez A 1-42 poprzez blokowanie odkładania amyloidu i ożywiły cholinergiczną i hipokampalną funkcję neuronów dopaminergicznych [21]. Właściwości neuroprotekcyjneziołowe Cistancheimplikuje potencjał terapeutyczny w chorobach poznawczych. Depresja jest powszechnym mieszanym trybem reakcji emocjonalnych, którego częstymi objawami są zapominanie i pogorszenie funkcji poznawczych [22].Herb Cistanchebył powszechnie stosowany jako tradycyjna medycyna chińska w leczeniu zapomnienia; ponadto niedawne doniesienie pokazuje, że podawanie mąki kukurydzianej u wczesnej dorosłości uzupełnionej C. tubulosa jest korzystne dla promocji długowieczności oraz poprawy uczenia się i pamięci związanej z węchami w modelu Drosophila bezkręgowców [23]. Fakty te wskazują na poprawiające funkcje poznawcze właściwości zioła Cistanche; W tym badaniu po raz pierwszy scharakteryzowaliśmy właściwości przeciwdepresyjne i ich związek z czynnościami poprawiającymi funkcje poznawcze w modelu ssaków poprzez regulację układu monoaminowego i osi HPA. Rozświetlenie właściwości przeciwdepresyjnych i wstępnego mechanizmu działania ziela Cistanche może poszerzyć spektrum stosowaniazioło Cistanche, który mógłby zostać opracowany jako alternatywny lek na depresję.

2. Materiały i metody

2.1. Przygotowanie materiału roślinnego i wywaru. C. deserticola YC

Ma został uzyskany z Autonomicznego Regionu Nei Mongol w Chinach; C. tubulosa uzyskano z Regionu Autonomicznego Xinjiang Uygur w Chinach. Przed wywarem zioło (C. deserticola YCMa lub C. tubulosa) zostało poddane inspekcji w celu wykrycia zawartości echinakozydu i werbaskozydu za pomocą HPLC (wysokosprawna chromatografia cieczowa) (Milford, MA, Waters, USA) i kwalifikującego się produktu (zgodnie z do Farmakopei Chińskiej Republiki Ludowej) został wykorzystany do eksperymentów na zwierzętach. Odwar uzyskano w oparciu o metodę parowania wody opracowaną przez Centrum Badań Inżynierii Żywności i Zdrowia Ministerstwa Edukacji Państwowej Uniwersytetu Sun Yat-sena. Wysuszony Cistanche deserticola YCMa o masie 125 g został zmiażdżony i przesiany przez sito 120-mesh, a następnie proszek rozpuszczono w 3 l ultraczystej wody, podgrzano

w 100∘C przez 2 h, następnie schłodzono do temperatury pokojowej i przesiano; supernatant zawracano. Osad następnie rozpuszczono w 2 l ultraczystej wody, a następnie ogrzewano przez 1,5 godziny i schłodzono, jak wspomniano powyżej, w celu zawrócenia supernatantu; osad użyto następnie do recyklingu supernatantu. Zawartość całego supernatantu wzbogacono na obrotowych wyparkach próżniowych w 60∘C; ostatecznie stężenie surowego leku ustalono na 0,5 g/ml i produkt przechowywano w temperaturze -20∘C.

2.2. Test echinakozydowy i werbaskozydowy za pomocą analizy HPLC.

Do pomiaru jakościowego i ilościowego oznaczenia echinakozydu i werbaskozydu zastosowano HPLC (wysokosprawna chromatografia cieczowa); werbaskozyd (czystość > 93 procent) i echinakozyd (czystość > 93 procent) zakupiono z National Institutes for Food and Drug Control (Pekin, Chiny) i zastosowano jako standardową kontrolę.

2.3. Opieka nad zwierzętami i prowadzenie eksperymentów.

Osobnikami były samce myszy Kunming SPF (wolne od specyficznych patogenów) o wadze 21∼25 gramów, dostarczone przez Medical Experimental Animal Center z prowincji Guangdong. Zwierzęta trzymano w plastikowych klatkach (dziesięć na klatkę); warunki otoczenia ustawiono w następujący sposób: wilgotność 40–70 procent, temperatura pokojowa 21 ± 1∘C oraz okres 12h:12h światło-ciemność. Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Zwierząt Uniwersytetu Sun Yat-sen.

2.4. Test zawieszenia ogona.

Test zawieszenia ogona przeprowadzono zgodnie z protokołem opisanym przez Cryan et al. [24] ze skromnymi zmianami. Krótko, w dniu 21 myszy zawieszono za ogon na metalowej szubienicy uwiązanej nylonowym cewnikiem, z głową na wysokości 50 mm od podłogi. Myszy zawieszono na haczyku na taśmach samoprzylepnych 10∼20 mm od końca ogona i izolowano akustycznie i wizualnie za pomocą klap. Rejestrowano ruchy ciała myszy, a ruchy oddechowe ignorowano. Przed dniem eksperymentu myszy zawieszono na 8 minut w celu adaptacji.

3. Wyniki

3.1. Oznaczanie zawartości głównych składników bioaktywnych w próbkach C. deserticola YCMa i C. tubulosa. Glikozydy fenyloetanoidowe, takie jak echinakozyd i werbaskozyd, są ogólnie uważane za główne składniki bioaktywne; stąd zawartość echinakozydu i werbaskozydu w próbkach YCMa C. deserticola i C.tubulosa oznaczono metodą HPLC. Chromatogramy HPLC pokazano na Figurze 1, a wyniki pokazują, że całkowita zawartość glikozydów fenyloetanoidowych z C. deserticola YCMa była w przybliżeniu dwa razy większa niż z C. tubulosa. Wagi echinakozydu i werbaskozydu stanowią odpowiednio 1,27 ± 0.009 procent i 00,52 ± 0.0{ {21}}3 procent proszku wytworzonego z C. deserticola YCMa i 19,81 ± 0,66 procent i 2,45 ± 0,12 procent proszku wytworzonego z C. tubulosa. Masy echinakozydu i werbaskozydu stanowią odpowiednio 0,90 ± 00,001 procent i 0,20 ± 0,001 procent wywaru C. deserticola YCMa oraz 5,90 ± 0,12 procent i 0,54 ± 0,05 procent proszku przygotowanego z C. tubulosa (tabela 1).

3.2. Odwar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa złagodził poziom stresu i depresji. Test zawieszenia za ogon (TST) jest szybką i klasyczną metodą oceny przeciwdepresyjnego działania leków u myszy [24]; w tych badaniach stan unieruchomienia, spowodowany krótkotrwałym i nieuniknionym stresem zawieszenia za ogon, został wykorzystany jako cecha odzwierciedlająca poziom depresji myszy. Sprawdziliśmy, czy wywar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa może odwrócić bezruch i sprzyjać występowaniu zachowań związanych z ucieczką. W porównaniu z grupami kontrolnymi okres bezruchu grupy stresowej wzrósł o 27,4 procent; w porównaniu do grup stresowych, grupy leczone średnim, wysokim stężeniem wywaru z ziół C. deserticola YCMa wykazały statystycznie istotny spadek okresu bezruchu po 44,1% i 56,1%; grupy leczone średnim, wysokim stężeniem

Wywar z ziela C. tubulosa wykazał statystycznie istotny spadek okresu bezruchu o 41,9% i 47,7% (Rysunek 2). Wyniki te wskazują, że wywar z C. deserticola YCMa i C.tubulosa może zmniejszyć poziom stresu i depresji u myszy, a wywar z C. deserticola YCMa wykazywał nieco wyższą skuteczność niż wywar z C.tubulosa.

3.3. Odwar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa poprawił uczenie przestrzenne i pamięć myszy. Osoby (zarówno młodzież, jak i dorośli) dotknięte depresją są podatne na trudności w uczeniu się [28]; wykazano, że wywar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa łagodzi poziom stresu i depresji; następnie zdecydowaliśmy się ocenić, czy wywar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa może wpływać na przestrzenne uczenie się i pamięć za pomocą modelu labiryntu wodnego Morrisa, który jest szeroko stosowany w ocenie przestrzennego uczenia się i funkcji pamięci powiązanego obszaru mózgu [29]. . Ślady ruchu są podzielone na cztery podczas opóźnienia wyszukiwania; trajektoria linii prostej pokazała, że ​​myszy dokładnie określiły pozycję platformy ratunkowej, trajektoria tendencji pokazała, że ​​myszy wykazywały zasadniczo prawidłową orientację, a trajektoria typu kanciastego pokazała, że ​​myszy albo były we wczesnym okresie treningu, albo cierpiały na demencję, próbując lokalizować miejsce docelowe na podstawie instynktu; losowa trajektoria przeszukiwania wykazała, że ​​myszy mają niską zdolność pozycjonowania i bezcelowo przeszukiwały miejsce docelowe. Dane zostały zebrane zgodnie z kryteriami.

Wpływ wywarów C. deserticola YCMa i C. tubulosa na zdolność uczenia się przestrzeni i zdolność zapamiętywania u myszy poddanych stresowi powstrzymującemu przedstawiono na rycinie 3. Po teście zawieszenia za ogon, myszy wykazały znacznie wydłużony okres utajenia. W porównaniu z grupami stresu, myszy leczone umiarkowanymi, wysokimi dawkami C. deserticola YCMa i niskimi, wysokimi dawkami wywaru C. tubulosa wykazały skrócony okres utajenia; częstotliwość, z jaką myszy pływały po ukrytej platformie, była istotnie podwyższona w grupach leczonych umiarkowanymi, wysokimi dawkami wywaru YCMa z C. deserticola. Wyniki te wskazują, że zestresowane myszy odniosły korzyści z podania wywaru z ziół Cistanche i wykazały poprawę przestrzennego uczenia się i pamięci.

3.4. Odwar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa obniżył aktywność oksydazy monoaminowej. MAO katalizuje deaminację oksydacyjną amin, takich jak tyramina, katecholamina i 5-hydroksytryptamina (5-HT) w mózgu i tkankach obwodowych; hamowanie aktywności MAO skutkuje skutecznością przeciwdepresyjną [30]. Próbowaliśmy wyjaśnić działanie przeciwdepresyjne C. deserticola YCMa i C. tubulosa; następnie określono aktywność MAO w mózgu. Po teście zawieszenia za ogon, aktywność MAO uległa znacznej regulacji w górę; aktywność MAO w grupach leczonych zawiesiną ogona, a następnie umiarkowaną, wysoką dawką

wywar z C. deserticola YCMa wykazał znaczny spadek o około 13,9% ∼ 12,3%; aktywność MAO w grupach traktowanych zawiesiną z ogona, a następnie wywar z C. tubulosa w wysokich dawkach, wykazała znaczny spadek o około 13,2% (Figura 4). Dane wykazały, że wywar z C. deserticola YCMa i C. tubulosa może hamować aktywność MAO i może przyczyniać się do działania przeciwdepresyjnego.

efekt, a wywar z C. deserticola YCMa wykazał większą skuteczność niż wywar z C. tubulosa.

3.5. Podawanie wywaru z C. deserticola YCMa i C. tubulosa spowodowało zwiększenie centralnego stężenia dopaminy i zmniejszenie stężenia kortykosteronu w surowicy. Poziom DA i NE w

mierzono ośrodkowy układ nerwowy w celu określenia pobudliwości nerwów. Po 4 tygodniach testu zawieszania ogona, w porównaniu z grupami stresu, poziom DA w grupach traktowanych umiarkowaną dawką C. deserticola YCMa znacznie wzrósł w każdej o 43,5%; poziom DA w grupach leczonych umiarkowaną dawką C. tubulosa był również znacząco podwyższony (Figura 5(a)). Poziom NE był nieznacznie podwyższony w grupach traktowanych wywarem z obu ziół w porównaniu z grupami stresu i nie stwierdzono statystycznej różnicy (Rysunek 5(b)). Wyniki te mogą wyjaśniać molekularny mechanizm działania przeciwdepresyjnego zioła Cistanche.

Hormon adrenokortykotropowy (ACTH), hormon polipeptydowy wytwarzany i wydzielany przez przedni płat przysadki mózgowej, stymuluje sekrecję glikokortykosteroidu działając na korę nadnerczy, strefę pęczkową [31]; kortykosteron, hormon steroidowy wytwarzany przez korę nadnerczy, bierze udział w regulacji procesów fizjologicznych, takich jak zwiększanie energii, reakcja odpornościowa i reakcje na stres [32], dlatego postanowiliśmy zbadać wpływ wywaru z ziół na oś HPA. Zmierzono też stężenie ACTH i kortykosteronu w surowicy. Po 4 tygodniach testu zawieszenia za ogon, stężenie ACTH i kortykosteronu w grupie stresowej uległo znacznemu podwyższeniu (ryc. 6). Nie zaobserwowano znaczących zmian w grupach leczonych wywarami z ziół Cistanche w porównaniu z grupą stresową (Rysunek 6 (a)). W porównaniu z grupą stresującą, stężenie kortykosteronu w surowicy w grupach leczonych umiarkowanymi, wysokimi dawkami wywaru YCMa C. deserticola było znacznie obniżone; stężenie kortykosteronu w grupach leczonych wysokimi dawkami C. tubulosa było obniżone, ale nie do znaczącej różnicy statystycznej C. deserticola YCMa i C. tubulosa mogą zmniejszać stężenie kortykosteronu w surowicy i mogą brać udział w regulacji osi HPA i wywaru C. Deserticola YCMa wykazał większą skuteczność niż C. tubulosa.

4. Dyskusja

W tym badaniu zdefiniowano działanie przeciwdepresyjne oraz poprawę pamięci i uczenia się zioła Cistanche, co może rzucić nowe światło na działanie ziela Cistanche i dać wskazówki do poszerzenia zakresu terapeutycznego zastosowania. Wcześniejsze badania pokazują, że ziele Cistanche jest wielofunkcyjnym chińskim lekiem o działaniu biologicznym o działaniu przeciwstarzeniowym, przeciwutleniającym, estrogennym, antyosteoporotycznym, afrodyzjaktycznym i przeciwzapalnym [33]. Herb Cistanche został uznany za lek na niedoczynność nerek, niepłodność i przewlekłe zaparcia (Komitet Farmakopei Chin, 2010). Odwar z ziela Cistanche składa się z olejków lotnych, nielotnych glikozydów fenyloetanoidowych (PeG), irydoidów, lignanów, alditoli, oligosacharydów i polisacharydów. Echinakozyd i werbaskozyd są ogólnie uważane za główne składniki bioaktywne [34]. Istnieją cztery główne gatunki Cistanche, w tym C. deserticola YCMa, C. tubulosa, Cistanche Sinensis G. Beck i Cistanche salsa var. albiflorashi i in. [35]; wybraliśmy YCMa C. deserticola i C. tubulosa jako nasz model do określenia zawartości PeGs, a YCMa C. deserticola posiadał wyższą zawartość PeGs (ryc. 1), co może wyjaśniać wyższą skuteczność YCMa C. deserticola. Wyniki wskazują, że zawartość głównych składników bioaktywnych decyduje o skuteczności zioła Cistanche.

Wcześniejsze badania wskazują, że produkty ziołowe Cistanche są korzystne w leczeniu zaburzeń neurodegeneracyjnych poprzez regulację w górę czynnika wzrostu nerwów (NGF) w hipokampie myszy [36, 37], ale nie doniesiono o żadnych badaniach na temat działania przeciwdepresyjnego i uczenia poznawczego działania zioła Cistanche w modele ssaków. W tym badaniu wywar z ziela Cistanche okazał się skuteczny w łagodzeniu poziomu stresu i znacznie zwiększa zachowanie przeżywalności w teście zawieszenia ogona (ryc. 2) oraz poprawia zdolność uczenia się przestrzennego i pamięć w modelu labiryntu wodnego (ryc. 3). Lin i in. udowodnili, że ziele Cistanche poprawiało pamięć węchową w modelu muszki owocowej [23]; skupiliśmy nasze badania na działaniu przeciwdepresyjnym i przyjęliśmy inny model zwierzęcy; wynik dowiódł, że zioło Cistanche poprawiło wariant funkcji poznawczych, a mianowicie zdolność przestrzennego uczenia się u myszy. Zgodnie z teorią monoamin, doświadczanie stresu i depresja są ściśle powiązane z poziomem neuroprzekaźników monoaminowych w mózgu, takich jak DA, NE, 5-HT i epinefryna [38]. Odkryliśmy, że wywar z ziół Cistanche może osłabić aktywność MAO (Rysunek 4) i zwiększyć centralne stężenie DA (Rysunek 5(a)). Co zaskakujące, centralne stężenie 5-HT zostało obniżone przez leczenie wywarami z ziół Cistanche (dane nie pokazane), ponieważ wcześniejsze badania wykazały, że obniżona ośrodkowa aktywność 5-HT jest związana z depresją [39]. Rozregulowanie osi podwzgórze-przysadka-nadnercza jest często związane z depresją [40], interwencja w układ receptora glukokortykoidowego (GR) skutecznie odwróciła fenotyp depresyjny u myszy [41] i stwierdziliśmy, że ziele Cistanche znacząco łagodziło poziom surowicy

stężenie CORT (Figura 6(b)). Modulacja układu monoaminowego i osi HPA przyczynia się do przeciwdepresyjnego działania ziela Cistanche. Echinakozyd mógł swobodnie przekraczać barierę krew-mózg i oddziaływać na centralny układ nerwowy [42], co może wyjaśniać, dlaczego wywar z ziela Cistanche miał działanie przeciwdepresyjne. Po raz pierwszy scharakteryzowaliśmy właściwości antydepresyjne i ich związek z czynnościami poprawiającymi funkcje poznawcze w modelu mysim i zbadaliśmy wstępny mechanizm. Mechanizm działania przeciwdepresyjnego Cistanche nie został jednak wyjaśniony na poziomie molekularnym i potrzebne są dalsze badania, aby wyjaśnić kompleksowy mechanizm działania przeciwdepresyjnego zioła Cistanche.

Biorąc pod uwagę, że wywar z ziół Cistanche jest mieszaniną związków, może istnieć wiele sposobów, aby wywar z ziół Cistanche wywierał działanie przeciwdepresyjne i poprawiał zdolność uczenia się. Stres oksydacyjny wpływa na wiele funkcji komórkowych neuronów, a nadprodukcja reaktywnych form tlenu (ROS) powoduje uszkodzenie komórek, apoptozę i śmierć [43]. Echinakozyd wyekstrahowany z łodyg C. salsa wykazuje działanie neuroprotekcyjne poprzez zmniejszenie produkcji ROS i apoptozy za pośrednictwem mitochondriów [44]; Za działanie neuroprotekcyjne może częściowo odpowiadać akteozyd, niezwykle silny związek antyoksydacyjny [45]. Oprócz tradycyjnej metody wywaru, zastosowanie nowoczesnych metod farmaceutycznych, takich jak kapsułki glikozydowe o kontrolowanym uwalnianiu, może wzmocnić efekt wywaru z ziół, ponieważ składniki bioaktywne mogą być trawione i rozkładane w przewodzie pokarmowym [37].

5. Wnioski

W tym badaniu odkryliśmy, że wywary z C. deserticola

YCMa i C. tubulosa wykazywały działanie przeciwdepresyjne i poprawiały przestrzenne uczenie się i zdolność zapamiętywania w modelu mysim, a wywary C. deserticola YCMa i C. tubulosa miały istotny wpływ na oś HPA;

C. deserticola YCMa wykazywał silniejszą funkcję farmakologiczną. C. deserticola i C. tubulosa mogą potencjalnie zostać opracowane jako alternatywne leki na depresję.

Bibliografia

[1] RC Kessler, KA McGonagle, S. Zhao i wsp., „Czas występowania zaburzeń psychicznych DSM-III-R w ciągu życia i 12-miesiąca w Stanach Zjednoczonych: wyniki National Comorbidity Survey”, Archives of General Psychiatria, tom. 51, nie. 1, s. 8–19 1994.

[2] HK Manji, GJ Moore, G. Rajkowska i G. Chen, „Neuroplastyczność i odporność komórkowa w zaburzeniach nastroju”, Psychiatria Molekularna, tom. 5, nie. 6, s. 578–593, 2000.

[3] JD Rosenblat, RS McIntyre, GS Alves, KN ​​Fountoulakis i AF Carvalho, „Poza monoaminami – nowe cele dla depresji opornej na leczenie: kompleksowy przegląd”, Current Neuropharmacology, tom. 13, nie. 5, s. 636–655, 2015.

[4] K. Wilson i P. Mottram, „Porównanie skutków ubocznych selektywnych inhibitorów wychwytu zwrotnego serotoniny i trójpierścieniowych leków przeciwdepresyjnych u starszych pacjentów z depresją: metaanaliza”, International Journal of Geriatric Psychiatry, tom. 19, nie. 8, s. 754–762, 2004.

[5] S. Vezmar, B. Miljkovic´, K. Vucˇic´evic´ i wsp., „Farmakokinetyka i skuteczność fluwoksaminy i amitryptyliny w depresji”, Journal of Pharmacological Sciences, tom. 110, nie. 1, s. 98–104, 2009.

[6] CH Halsted, "Suplementy diety i żywność funkcjonalna: dwie strony medalu?" American Journal of Clinical Nutrition, tom. 77, s. 1001S–1007S, 2003.

[7] J.-S. Tian, ​​CC. Liu, H. Xiang i in., „Badanie przeciwdepresyjnego działania oleju z nasion rokitnika poprzez podejście metabolomiczne oparte na GC-MS w połączeniu z analizą wielowymiarową”, Food and Function, tom. 6, nie. 11, s. 3585–3592, 2015.