5.2. Analiza olejków eterycznych

Izolację olejków eterycznych metodą hydrodestylacji prowadzono w aparacie typu Clevenger przez 3 godziny [64].

Glikozyd cistanche może również zwiększać aktywność SOD w tkankach serca i wątroby oraz znacznie zmniejszać zawartość lipofuscyny i MDA w każdej tkance, skutecznie wymiatając różne reaktywne rodniki tlenowe (OH-, H₂O₂, itp.) i chroniąc przed uszkodzeniami DNA spowodowanymi przez rodniki OH. Glikozydy fenyloetanoidowe Cistanche mają silne zdolności wymiatania wolnych rodników, wyższą zdolność redukującą niż witamina C, poprawiają aktywność SOD w zawiesinie plemników, zmniejszają zawartość MDA oraz mają pewien wpływ ochronny na funkcję błony plemników. Polisacharydy Cistanche mogą zwiększać aktywność SOD i GSH-Px w erytrocytach i tkankach płuc eksperymentalnie starzejących się myszy wywołaną przez D-galaktozę, a także zmniejszać zawartość MDA i kolagenu w płucach i osoczu oraz zwiększać zawartość elastyny, mają dobry efekt zmiatania DPPH, przedłuża czas niedotlenienia u starzejących się myszy, poprawia aktywność SOD w surowicy i opóźnia fizjologiczną degenerację płuc u doświadczalnie starzejących się myszy Eksperymenty z degeneracją morfologiczną komórek wykazały, że Cistanche ma dobrą zdolność przeciwutleniającą i ma potencjał, aby być lekiem do zapobiegania i leczenia chorób związanych ze starzeniem się skóry. Jednocześnie echinakozyd w Cistanche ma znaczną zdolność do wychwytywania wolnych rodników DPPH i może wychwytywać reaktywne formy tlenu, zapobiegać degradacji kolagenu wywołanej przez wolne rodniki, a także ma dobry wpływ naprawczy na uszkodzenia anionów wolnych rodników tyminy.

Kliknij Suplement Cistanche Tubulosa

【Więcej informacji: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Analizy olejów przeprowadzono zarówno metodą chromatografii gazowej (GC), jak i chromatografii gazowej/spektrometrii masowej (GC/MS). Analizy GC przeprowadzono przy użyciu chromatografu gazowego (Agilent 7890A, Palo Alto, CA, USA), wyposażonego w 30 m × 0,25 mm średnicy wewnętrznej z 0,25 µm stacjonarnej grubość warstwy HP{6}} kolumna kapilarna (Agilent J&W, Santa Clara, CA, USA). Zastosowano następujący program temperaturowy: od 60 ◦C do 246 ◦C z szybkością 3 ◦min−1, a następnie utrzymywano w 246 ◦C przez 20 min (całkowity czas analizy 82 min). Inne warunki pracy były następujące: gaz nośny hel (czystość większa lub równa 99,9999 procent — Air Liquide, Mediolan, Włochy); szybkość przepływu, 1,0 ml.min-1; temperatura wtryskiwacza, 250 ◦C; temperatura detektora 300 ◦C. Wstrzyknięto 1 µl rozcieńczonej próbki (1:100 w n-heksanie, w/w) ze stosunkiem podziału 1:20, stosując autosampler (Agilent, Model 7683B, Santa Clara, CA, USA).

Analizy GC-MS przeprowadzono przy użyciu chromatografu gazowego (Agilent 6890N, Santa Clara, CA, USA) wyposażonego w 30 m × 0,25 mm id ze stacjonarną grubością warstwy 0,25 µm HP{ {7}} kolumna kapilarna ms (Agilent J&W, Santa Clara, CA, USA) sprzężona z selektywnym detektorem masowym wyposażonym w urządzenie do jonizacji elektronów, EI, oraz analizator kwadrupolowy (Agilent 5973, Santa Clara, CA, USA). Program temperaturowy i warunki działania chromatografii (z wyjątkiem detektora) były takie same jak w przypadku GC-FID. Warunki MS były następujące: temperatura linii przesyłowej MS 240°C; temperatura źródła jonów EI, 200 ◦C przy energii jonizacji 70 eV; temperatura kwadrupolowa 150 ◦C; szybkość skanowania, 3,2 skanów.s-1 przy zakresie skanowania m/z (30 do 480). Do obsługi i przetwarzania chromatogramów i widm masowych zastosowano oprogramowanie MSD ChemStation (Agilent, wersja E.01.00.237, Santa Clara, CA, USA). Związki zidentyfikowano przez porównanie ich widm masowych z danymi biblioteki NIST02 systemu GC/MS i bibliotekami Adamsa [32,33]. Wyniki zostały dodatkowo potwierdzone przez porównanie z porządkiem elucji związków z ich wskaźnikami retencji na fazach semipolarnych, o których mowa w literaturze [32]. Wskaźniki retencji składników wyznaczono w odniesieniu do czasów retencji szeregu n-alkanów (dwóch mieszanek wzorcowych C8–C20 i C21–C40) z interpolacją liniową [65]. Procent poszczególnych składników obliczono na podstawie powierzchni pików GC bez korekty współczynnika odpowiedzi FID. Wyniki przedstawiono jako procent poszczególnych pików ± odchylenie standardowe dwóch niezależnych przebiegów chromatograficznych.

5.3. Działanie przeciwgrzybicze

Działanie przeciwgrzybicze olejku eterycznego S. cacaliifolia oceniano wobec grzybów nitkowatych i drożdży. Trzy kliniczne szczepy dermatofitów wyizolowane z paznokci i skóry (Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 i Microsporum canis FF1) oraz cztery szczepy typu dermatofitów z Colección Espanõla de Cultivos Tipo (T. mentagrophytes var. interdigital CECT 2958, T. rubrum CECT 2794, T. verrucosum CECT 2992 i M. gypseum CECT 2908), jeden szczep typu Cryptococcus neoformans (C. neoformans YPO186), dwa kliniczne szczepy Candida wyizolowane z nawracających przypadków infekcji sromowo-pochwowej (C. krusei LF33, C. guillermondii MAT23) i trzy szczepy typu Candida (C. albicans ATCC 10231, C. tropicalis YPO128 i C. paraphimosis ATCC 90018). Wszystkie szczepy przechowywano w bulionie dekstrozowym Sabourauda z 20% gliceryną w temperaturze -80°C i przed każdym testem hodowano na agarze dekstrozowym Sabourauda (SDA) lub agarze z dekstrozą ziemniaczaną (PDA), aby zapewnić optymalne warunki wzrostu i czystość.

Do określenia minimalnych stężeń hamujących (MIC) i minimalnego stężenia śmiertelnego (MLC) oleju zastosowano metodę mikrorozcieńczeń w bulionie zgodnie z protokołem referencyjnym Instytutu Standardów Klinicznych i Laboratoryjnych (CLSI) M38-A2 [66] lub M27-A3 [67] odpowiednio dla grzybów nitkowatych i drożdży. MIC było najniższym stężeniem, przy którym nie zaobserwowano wzrostu w zaszczepionych probówkach, podczas gdy MLC było najniższym stężeniem, przy którym nie zaobserwowano wzrostu po zaszczepieniu SDA wszystkich probówek ujemnych. Uwzględniono również kontrolę negatywną (pożywka nie inokulowana) i pozytywną (pożywka inokulowana z 1% DMSO).

5.4. Działanie przeciwzapalne

RAW 264.7, linię komórkową makrofagów mysich białaczek uzyskaną z American Type Culture Collection (ATCC TIB{2}}), hodowano zgodnie z wcześniejszymi doniesieniami naszej grupy [22].

Wytwarzanie NO mierzono, określając ilościowo akumulację azotynów w supernatantach hodowli, stosując odczynnik Griessa [68]. Komórki (0,6 × 106 komórek/dołek) hodowano w 48-dołkowych płytkach hodowlanych. Po całonocnej stabilizacji makrofagi traktowano wstępnie przez 1 godzinę olejkiem eterycznym (0.{26}}8–1,25 µl/ml) rozcieńczonym w DMSO, a następnie aktywowano 50 ng/ml LPS przez 24 godz. Przeprowadzono kontrolę pozytywną (makrofagi stymulowane LPS) i kontrolę negatywną (makrofagi nietraktowane). Po tym okresie inkubacji równe objętości supernatantów z hodowli i odczynnik Griessa [1:1 0,1% (wag./obj.) dichlorowodorku N-(1-}naftylo)etylenodiaminy i 1% (wag./obj.) sulfanilamidu zawierającego 5% ( w/v) H3PO4] mieszano i inkubowano przez 30 minut w ciemności. Absorbancję przy 550 nm rejestrowano w automatycznym czytniku płytek (Agilent, Santa Clara, CA, USA), a stężenie azotynów określano z krzywej wzorcowej azotynu sodu. Nasza grupa wykazała już, że DMSO w maksymalnym zastosowanym stężeniu (0,4 procent) jest pozbawione działania przeciwzapalnego i cytotoksycznego (dane nie pokazane).

RAW 264,7 (1,2 × 106 komórek/dołek) hodowano w płytkach 6-dołkowych i pozostawiono do ustabilizowania na 12 godzin. Następnie komórki inkubowano z olejkiem eterycznym (0,64 µl/ml) przez 1 godzinę, a następnie aktywowano LPS (50 ng/ml) przez 24 godziny. Uwzględniono kontrolę negatywną (komórki nietraktowane) i kontrolę pozytywną (komórki traktowane tylko LPS). Lizaty komórkowe przygotowano w sposób opisany wcześniej przez Zuzarte i in. [22].

Analizę Western blot przeprowadzono w celu zmierzenia poziomów białka indukowalnej syntazy tlenku azotu (iNOS) i cyklooksygenazy {{0}} (COX{1}}). Białka rozdzielono przez elektroforezę na SDS-poliakryloamidzie 10 procent (obj./obj.), przy 130 V przez 1,5 godziny i przeniesiono na membrany z fluorku poliwinylidenu (wcześniej aktywowane metanolem) przy 400 mA przez 3 godziny. Po zablokowaniu niespecyficznych IgG 5% (wag./obj.) mlekiem w TBS-T przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej, błony inkubowano ze swoistymi przeciwciałami przeciwko iNOS (1:500; R & D Systems) lub COX{{15} } (1:5000; Abcam, Cambridge, Wielka Brytania) przez noc, w temperaturze 4°C. Następnie membrany płukano przez 30 minut TBS-T (10 minut, 3 razy) i inkubowano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę z drugorzędowymi przeciwciałami (1:40, 000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX , USA) skoniugowane z peroksydazą chrzanową. Kompleksy immunologiczne wykrywano za pomocą skanera chemiluminescencyjnego (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, USA). Błony sondowano przeciwciałem przeciw tubulinie (1:20 000; Sigma), aby zagwarantować załadowanie równoważnej ilości białka. Oznaczenie ilościowe białka przeprowadzono przy użyciu oprogramowania ImageLab w wersji 6.1.0 (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA).

5.5. Migracja komórek

NIH 3T3, linia komórek embrionalnych fibroblastów myszy (ATCC CRL -1658), hodowano w sposób opisany wcześniej w naszej grupie [69].

5.5.2. Test migracji komórek

Migrację komórek przeprowadzono za pomocą testu zarysowania rany, jak opisali Martinotti i współpracownicy [70] z niewielkimi modyfikacjami. Pokrótce, fibroblasty NIH 3T3 wysiano w ilości 2,5 x 105 komórek/ml w płytkach 12-dołkowych. Po 24 godzinach wzrostu zarysowano monowarstwę komórek za pomocą końcówki pipety 20–200 µl. Odłączone komórki usunięto przez przemycie komórek sterylnym PBS 1x. Do wszystkich płytek dodano DMEM z 2% surowicą, w obecności lub nieobecności olejku eterycznego. Za pomocą mikroskopu z kontrakcją fazową uzyskano obrazy 0, 12 i 18 godzin po zadrapaniu, a obszar rany zmierzono za pomocą oprogramowania ImageJ/Fiji. Przedstawione wyniki uzyskano za pomocą następującego równania

5.6. Żywotność komórek

Wpływ różnych stężeń olejku eterycznego na żywotność zarówno makrofagów, jak i fibroblastów przeprowadzono za pomocą testu redukcji resazuryny. Pokrótce, makrofagi ({{0}},6 x 106 komórek/ml) lub fibroblasty (1,25 x 105 komórek/ml) wysiano w płytkach 48-dołkowych. Po całonocnej stabilizacji dodawano różne stężenia olejku eterycznego (0,08–1,25 µl/ml) rozcieńczonego w DMSO na 24 godziny. Pod koniec eksperymentu usunięto pożywkę i dodano świeżą pożywkę zawierającą resazurynę (1:10) na 1 h lub 4 h, odpowiednio dla makrofagów i fibroblastów. Absorbancję przy 570 nm z filtrem odniesienia 620 nm zarejestrowano w automatycznym czytniku płytek (Agilent, Santa Clara, CA, USA). Żywotność komórek określono za pomocą następującego równania:

gdzie AbsExp to absorbancja (różnica między 570 a 620 nm) w różnych warunkach doświadczalnych, a AbsCT to absorbancja w komórkach kontrolnych (bez olejku eterycznego).

5.7. Starzenie indukowane etopozydem 

Starzenie oceniano przy użyciu dostępnego w handlu zestawu do barwienia beta-galaktozydazy zgodnie z protokołem producenta (Cell Signaling Technology). Pokrótce, 2,5 x 104 fibroblastów wysiano w 12- płytkach studzienkowych i pozostawiono do przylegania przez noc. Następnie indukowano starzenie przez inkubację komórek z 12,5 µM etopozydu przez 24 godziny. Usunięto etopozyd i komórki przemyto PBS 1x. Następnie komórki pozostawiono do regeneracji na 72 godziny w DMEM pod nieobecność lub w obecności olejku eterycznego S. cacaliifolia i codziennie oceniano zmiany morfologii. Po 72 godzinach komórki utrwalano przez 15 minut przy użyciu 1x roztworu utrwalającego (dostarczonego w zestawie handlowym), a następnie przemywano PBS i inkubowano przez noc z roztworem barwiącym beta-galaktozydazy w suchym inkubatorze w temperaturze 37°C bez dopływu CO2. Różne pola oglądano pod mikroskopem pod kątem rozwoju niebieskiego zabarwienia i fotografowano w celu analizy obrazu (8 obrazów na stan). Wyraźne zabarwienie na niebiesko wskazywało na aktywność beta-galaktozydazy. Analizę ilościową przeprowadzono za pomocą ImageJ i obliczono procent starzejących się komórek do wszystkich komórek.

5.8. Analiza statystyczna

Wyniki przedstawiono jako wartości średnie ± SEM (błąd standardowy średniej) z co najmniej trzech niezależnych eksperymentów przeprowadzonych w dwóch powtórzeniach. Istotność statystyczną testów przeciwzapalnych, żywotności komórek i starzenia określono za pomocą jednokierunkowej analizy wariancji (ANOVA), a następnie testu post-hoc Dunnetta z użyciem oprogramowania GraphPad Prism w wersji 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, Kalifornia, Stany Zjednoczone). W przypadku testów migracji komórek istotność statystyczną określono za pomocą dwukierunkowej analizy ANOVA, a następnie testu wielokrotnego porównania Sydáka. Uznano, że wartość p < 0,05 reprezentuje istotne różnice.

Autorskie Wkłady:Konceptualizacja, LS i AM; walidacja, AS, MJG, MTC i SP; analiza formalna, JMA-S., MJG, AP i DF; dochodzenie, JMA-S., AM i AP; zasoby, AM, WE, MTC i LS; przechowywanie danych, AP; pisanie — przygotowanie pierwotnego szkicu, JMA-S., AP i AM; pisanie — recenzja i redagowanie, MTC, LS i AM; wizualizacja, JMA-S.; nadzór, LS i AM; administracja projektami, LS; pozyskanie finansowania, LS i MTC Wszyscy autorzy przeczytali i zaakceptowali opublikowaną wersję manuskryptu.

Finansowanie:Ta praca została sfinansowana przez COMPETE 2020 — Program Operacyjny na rzecz Konkurencyjności i Internacjonalizacji oraz portugalskie fundusze krajowe za pośrednictwem FCT — Fundação para a Ciência ea Tecnologia, w ramach projektów UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 i LA/P/0058/2020.

Oświadczenie o dostępności danych:Dane będą dostępne na żądanie.

Konflikt interesów:Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Bibliografia

1. Bongomin, F.; Gago, S.; Oladele, R.; Denning, D. Globalne i wielonarodowe rozpowszechnienie chorób grzybiczych — oszacowanie precyzji. J. Fungi 2017, 3, 57. [CrossRef] [PubMed]

2. Campoy, S.; Adrio, JL Środki przeciwgrzybicze. Biochem. Farmacja. 2017, 133, 86–96. [CrossRef] [PubMed]

3. Gupta, AK; Cooper, aktualizacja EA w terapii przeciwgrzybiczej dermatofitozy. Mycopathologia 2008, 166, 353–367. [Odnośnik]

4. Matiz, C.; Friedlander, SF Zakażenia i ropnie tkanki podskórnej. W zasadach i praktyce chorób zakaźnych u dzieci; Elsevier: Amsterdam, Holandia, 2012; s. 454–462.e3.

5. de Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, Nowy Jork; Sotto, Minnesota; Luiz, FG; Belda Júnior, W.; de Sousa, MdGT; Benard G.; Criado, PR Toll-like Receptors (TLR) 2 i 4 Ekspresja keratynocytów od pacjentów z miejscową i rozsianą grzybicą skóry. Ks. Inst. Med. trop. São Paulo 2015, 57, 57–61. [CrossRef] [PubMed]

6. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard G.; Sousa, MGT Trichophyton Rubrum wywołuje reakcje fagocytarne i prozapalne w ludzkich monocytach poprzez receptor Toll-Like 2. Przód. Mikrobiol. 2019, 10, 2589. [Odsyłacz]

7. Słońce, SC. Niekanoniczny szlak NF-B w odporności i stanach zapalnych. Nat. Wielebny Immunol. 2017, 17, 545–558. [CrossRef] [PubMed]

8. Sharma, A.; Gupta, S. Ochronna manifestacja herbonanoceutyków jako środków przeciwgrzybiczych: możliwy kandydat na lek do zakażenia dermatofitycznego. Nauka o zdrowiu. Rep. 2022, 5. [CrossRef]

9. Guo, S.; DiPietro, LA Czynniki wpływające na gojenie się ran. J. Dent. Rez. 2010, 89, 219–229. [Odnośnik]

10. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. Skład chemiczny i działanie przeciwgrzybicze olejków eterycznych Lavandula Viridis LHér. J. Med. Mikrobiol. 2011, 60, 612–618. [Odnośnik]

11. Martinez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins, poseł; Lopes, L.; Rossi, A. Dermatophyte Odporność na leki przeciwgrzybicze: mechanizmy i prospekt emisyjny. Przód. Mikrobiol. 2018, 9, 1108. [Odsyłacz]

12. Mourad, A.; Idealnie, JR Wojna z kryptokokozą: przegląd przeciwgrzybiczego arsenału. pam. Inst. Oswaldo. Cruz. 2018, 113, e170391. [CrossRef] [PubMed]

13. McCarthy, MW; Kontoyiannis, DP; Cornely, OA; Doskonale, JR; Walsh, TJ Nowi agenci i cele leków, aby sprostać wyzwaniom opornych grzybów. J. Zarażać. Dis. 2017, 216, S474–S483. [CrossRef] [PubMed]

14. Vonkeman, ON; van de Laar, MAFJ Niesteroidowe leki przeciwzapalne: działania niepożądane i zapobieganie im. Semin. Artretyzm. Katar. 2010, 39, 294–312. [CrossRef] [PubMed]

15. Bakkali, F.; Averbeck, S.; Averbeck, D.; Idaomar, M. Biologiczne skutki olejków eterycznych Przegląd. Chemia spożywcza. Toksykol. 2008, 46, 446–475. [CrossRef] [PubMed]

16. Christaki, E.; Bonos, E.; Giannenas, I.; Florou-Paneri, P. Rośliny aromatyczne jako źródło związków bioaktywnych. Rolnictwo 2012, 2, 228–243. [Odnośnik]

17. Edris, AE Potencjał farmaceutyczny i terapeutyczny olejków eterycznych i ich lotnych składników: przegląd. Fitoteria. Rez. 2007, 21, 308–323. [CrossRef] [PubMed]

18. Pinto, E.; Vale-Silva, L.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L. Działanie przeciwgrzybicze olejku goździkowego z Syzygium Aromaticum na gatunki Candida, Aspergillus i Dermatophyte. J. Med. Mikrobiol. 2009, 58, 1454–1462. [Odnośnik]

19. Pinto, E.; Hrimpeng, K.; Lopes, G.; Waz, S.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L. Działanie przeciwgrzybicze olejku eterycznego Ferulago Capillaris przeciwko gatunkom Candida, Cryptococcus, Aspergillus i Dermatophyte. Eur. J. Clin. Mikrobiol. Infekować. Dis. 2013, 32, 1311–1320. [Odnośnik]

20. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-de-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Ro-drigues, A.; Martinezde-Oliveira, J. Przeciwgrzybicze działanie olejku eterycznego z Thymus Pulegioides na gatunki Can-dida, Aspergillus i Dermatophyte. J. Med. Mikrobiol. 2006, 55, 1367–1373. [Odnośnik]

21. Valente, J.; Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Lopes, MC; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Przeciwgrzybicze, przeciwutleniające i przeciwzapalne działanie Oenanthe Crocata L. Olejek eteryczny. Chemia spożywcza. Toksykol. 2013, 62, 349–354. [CrossRef] [PubMed]

22. Zuzarte M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Nowe spojrzenie na potencjał przeciwzapalny i profil bezpieczeństwa olejków eterycznych Thymus Carnosus i Thymus Camphoratus oraz ich głównych związków. J. Etnofarmakol. 2018, 225, 10–17. [Odnośnik]

23. Walker, JB; Sytsma, KJ; Treutlein, J.; Wink, M. Salvia (Lamiaceae) nie jest monofiletyczna: implikacje dla systematyki, promieniowania i ekologicznych specjalizacji szałwii i plemienia Mentheae. Jestem. J. Bot. 2004, 91, 1115–1125. [CrossRef] [PubMed]

24. Su, C.-Y.; Ming, Q.-L.; Rahman, K.; Han, T.; Qin, L.-P. Salvia miltiorrhiza: tradycyjne zastosowania lecznicze, chemia i farmakologia. Podbródek. J. Nat. Med. 2015, 13, 163–182. [CrossRef] [PubMed]

25. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. Właściwości farmakologiczne szałwii lekarskiej i jej składników. J Tradycja. Komplement. Med. 2017, 7, 433–440. [Odnośnik]

26. Afonso, AF; Alves-Silva, JM; Pereira, Oregon; Cardoso, SM Korzystne działanie roślin szałwii: korelacja ze składnikami bioaktywnymi. W ostatnich postępach w roślinach leczniczych, tom 44: Fitoterapia III; Govil, JN, Pathak, M., wyd.; Studium Press: Nowe Delhi, Indie, 2016; s. 161–198.

27. Salimikia, I.; Aryanpour, M.; Abdollahi, M.; Abdolghaffari, A.; Samadi, N.; Monsef-Esfahani, H. Fitochemiczne i gojące się rany efekty metanolowego ekstraktu z Salvia Multicaulis Vahl. w Szczur. Planta Med. 2016, 81, S1 – S381. [Odnośnik]

28. Gali-Muhtasib, H.; Hilan, C.; Khater, C. Tradycyjne zastosowania Salvia Libanotica (szałwia wschodniośródziemnomorska) i wpływ jej olejków eterycznych. J. Etnofarmakol. 2000, 71, 513–520. [CrossRef] [PubMed]

29. Hamidpour, M.; Hamidpour, R.; Hamidpour, S.; Shahlari, M. Chemia, farmakologia i lecznicze właściwości szałwii (szałwii) w zapobieganiu i leczeniu chorób, takich jak otyłość, cukrzyca, depresja, demencja, toczeń, autyzm, choroby serca i rak. J Tradycja. Komplement. Med. 2014, 4, 82–88. [Odnośnik]

30. Askari, SF; Avan, R.; Tayarani-Najaran, Z.; Sahebkar, A.; Eghbali, S. Irański gatunek szałwii: aktualizacja fitochemiczna i farmakologiczna. Fitochemia 2021, 183, 112619. [Odsyłacz]

31. Davidse, G.; Sousa Sánchez, M.; Knapp, SD; Chian Cabrera, F. Rubiaceae i Verbenaceae. 4(2): I-XVI, 1-533. W Flora Mesoamericana; Davidse, G., Sousa Sánchez, M., Knapp, SD, Chian Cabrera, F., wyd.; Missouri Botanical Garden: St. Louis, MO, USA, 2012; s. 402–403.

32. Adams, RP Identyfikacja składników olejków eterycznych metodą chromatografii gazowej/kwadrupolowej spektroskopii masowej, wyd. 4; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, USA, 2007.

33. Biblioteka widm masowych NIST/EPA/NIH 2005.

34. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. Lipopolisacharyd aktywuje szlak sygnałowy NF-KB za pośrednictwem receptora Toll-like 4 (TLR4) i odpowiedź prozapalną w ludzkich perycytach. J. Biol. chemia 2014, 289, 2457–2468. [Odnośnik]

35. Scrima, M.; Melito, C.; Merola, F.; Iorio, A.; Vito, N.; Giori AM; Ferravante, A. Ocena działania gojenia się ran wodno-alkoholowego ekstraktu części nadziemnej Salvia Haenkei na modelach eksperymentalnych in vitro i in vivo. Clin. kosmetyk. badać. Skóra właściwa 2020, 13, 627–637. [CrossRef] [PubMed]

36. Farahpour, MR; Pirkhezr, E.; Ashrafian, A.; Sonboli, A. Przyspieszone gojenie przez miejscowe podawanie olejku Salvia Officinalis na zakażony model rany Pseudomonas Aeruginosa i Staphylococcus Aureus. Biomed. Farmakoterapeuta. 2020, 128, 110120. [Odsyłacz]

37. Matic, I.; Revandkar, A.; Chen, J.; Bisio, A.; Dall'Acqua, S.; Cocetta, V.; Brun, P.; Mancino, G.; Milanese, M.; Mattei, M.; i in. Identyfikacja szałwii Haenkei jako środka gerosupresyjnego za pomocą zintegrowanego testu przesiewowego Senes-science-screening. Starzenie się 2016, 8, 3223–3240. [Odnośnik]

38. Park, CH; Shin, SH; Lee, EK; Kim, DH; Kim, M.-J.; Roh, SS; Yokozawa, T.; Chung, HY Lithospermat magnezu B z Salvia Miltiorrhiza BUNGE Łagodzi zapalenie nerek i starzenie wywołane starzeniem poprzez wytwarzanie reaktywnego tlenu za pośrednictwem oksydazy NADPH. Fitoteria. Rez. 2017, 31, 721–728. [Odnośnik]

39. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni S.; Mancianti, F.; Ebani, VV; Giannecchini S.; Pistelli, L. Substancje lotne i działanie przeciwgrzybicze, przeciwbakteryjne i przeciwwirusowe południowoafrykańskiej Salvia Spp. Olejki eteryczne uprawiane w jednolitych warunkach. Cząsteczki 2021, 26, 2826. [CrossRef] [PubMed]

40. Abu-Darwish, MS; Cabral, C.; Ali, Z.; Wang, M.; Khan, SI; Jakub, MR; Jain, SK; Tekwani, BL; Zulfiqar, F.; Khan, IA; i in. Salvia Ceratophylla L. z południa Jordanii: nowe spojrzenie na skład chemiczny i aktywność biologiczną. Nat. Szturchać. Bioperspektywa. 2020, 10, 307–316. [CrossRef] [PubMed]

41. Taarit, MB; Msaada, K.; Hosni K.; Chahed, T.; Marzouk, B. Skład olejków eterycznych szałwii werbeny rosnącej dziko w Tunezji. J. Food Biochem. 2010, 34, 142–151. [Odnośnik]

42. Viljoen, AM; Gono-Bwalya, A.; Kamatou, GPP; Basser, KHC; Demirci, B. Skład olejków eterycznych i chemotaksonomia Salvia Stenophylla i jej sojuszników S. Repens i S. Runcinata. J. istota. Rez. oleju 2006, 18, 37–45. [Odnośnik]

43. Pinto, E.; Salgueiro, LR; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Gonçalves, MJ Wrażliwość in vitro niektórych gatunków drożdży i grzybów nitkowatych na olejki eteryczne z szałwii lekarskiej. uprawa ind. Szturchać. 2007, 26, 135–141. [Odnośnik]

44. Tosun, A.; Khan, S.; Kim, Y.; Calín-Sánchez, A.; Hysenaj, X.; Carbonell-Barrachina, A. Skład olejków eterycznych i działanie przeciwzapalne Salvia Officinalis L (Lamiaceae) w makrofagach Murin. trop. J. Pharm. Rez. 2014, 13, 937. [Odsyłacz]

45. Abu-Darwish, MS; Cabral, C.; Ferreira IV; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Al-bdour, TH; Sal-gueiro, L. Olejek eteryczny z szałwii lekarskiej (Salvia Officinalis L.) z Jordanii: ocena bezpieczeństwa w komórkach ssaków i jego potencjał przeciwgrzybiczy i przeciwzapalny. Biomed. Rez. Int. 2013, 2013, 1–9. [Odnośnik]

46. ​​Leporini, M.; Bonesi, M.; Loizzo, MR; Passalacqua, NG; Tundis, R. Olejek eteryczny z Salvia Rosmarinus Spenn. z Włoch jako źródło związków prozdrowotnych: profil chemiczny i działanie hamujące działanie przeciwutleniające i cholinoesterazy. Rośliny 2020, 9, 798. [CrossRef]

47. Choi, JK; Och, H.-M.; Lee, S.; Kwon, TK; Shin, TY; Rho, MC; Kim, S.-H. Salvia Plebeia tłumi zmiany skórne podobne do atopowego zapalenia skóry. Jestem. J. Chin. Med. 2014, 42, 967–985. [Odnośnik]

48. Fahed, L.; Stien, D.; Ouaini, N.; Eparvier, V.; el Beyrouthy, M. Różnorodność chemiczna i aktywność przeciwdrobnoustrojowa olejków eterycznych Salvia multicaulis Vahl. chemia bioróżnorodni. 2016, 13, 591–595. [Odnośnik]

49. Juliano, C.; Marchetti, M.; Campagna, P.; Usai, M. Aktywność przeciwdrobnoustrojowa i skład chemiczny olejku eterycznego z Helichrysum Microphyllum Cambess. subsp. Tyrrhenicum Bacch., Brullo & Giusso Zebrane w południowo-zachodniej Sardynii. saudyjski. J. Biol. nauka 2019, 26, 897–905. [CrossRef] [PubMed]

50. On, X.; Zhang, L.; Chen, J.; Sui, J.; Yi, G.; Wu, J.; Ma, Y. Korelacja między składem chemicznym a działaniem przeciwgrzybiczym olejku eterycznego Clausena Lansium przeciwko Candida spp. Cząsteczki 2019, 24, 1394. [CrossRef]

51. Ruiz-Vásquez, L.; Ruiz Mesia, L.; Caballero Ceferino, HD; Ruiz Mesia, W.; Andrés, MF; Diaz, CE; Gonza-lez-Coloma, A. Potencjał przeciwgrzybiczy i chwastobójczy olejków eterycznych Piper z peruwiańskiej Amazonii. Rośliny 2022, 11, 1793. [CrossRef] [PubMed]

52. Fontenelle, ROS; Morais, SM; Brito, EHS; Brilhante, RSN; Cordeiro, RA; Nascimento, NRF; Kerntopf, MR; Sidrim, JJC; Rocha, MFG Działanie przeciwgrzybicze olejków eterycznych z gatunku Croton z brazylijskiego biomu Caatinga. J. Appl. Mikrobiol. 2008, 104, 1383–1390. [CrossRef] [PubMed]

53. Mathela, C.; Joshi, S. Przeciwutleniające i przeciwbakteryjne działanie olejku eterycznego z liści i jego składników, furanodienonu i curzerenonu z Lindera Pulcherrima (Nees.) Benth. Były Hak. F. Farmakognozja. Rez. 2012, 4, 80. [Odsyłacz]

54. Serra, E.; Hidalgo-Bastida, L.; Verran, J.; Williams, D.; Malic, S. Działanie przeciwgrzybicze komercyjnych olejków eterycznych i biocydów przeciwko Candida albicans. Patogeny 2018, 7, 15. [CrossRef]

55. Burstein, VL; Beccacece, I.; Guasconi L.; Mena, CJ; Cervi, L.; Chiapello, LS Odporność skóry na dermatofity: od eksperymentalnych modeli infekcji do chorób człowieka. Przód. immunol. 2020, 11, 605644. [Odsyłacz]

56. Genci´c, MS; Aksic, JM; Živkovičc Stošič, MZ; Randjelović, PJ; Stojanović, Nowy Meksyk; Stojanović-Radic, ZZ; Radulovic, NS Łączenie przeciwdrobnoustrojowego i przeciwzapalnego działania olejku eterycznego z nieśmiertelnika z jego składem chemicznym — wzajemne oddziaływanie między głównymi i drugorzędnymi składnikami. Chemia spożywcza. Toksykol. 2021, 158, 112666. [CrossRef] [PubMed]

57. A´cimović, M.; Ljujic, J.; Vulic, J.; Zheljazkov, VD; Pezo, L.; Varga, A.; Tumbas Šaponjac, V. Helichrysum Ital-icum (Roth) G. Don Olejek eteryczny z Serbii: skład chemiczny, klasyfikacja i aktywność biologiczna — czy może to być odpowiednia nowa uprawa dla Serbii? Agronomia 2021, 11, 1282. [Odsyłacz]

58. Amorim, JL; Simas, DLR; Pinheiro, MMG; Moreno, DSA; Alviano, CS; da Silva, AJR; Dias Fernandes, P. Właściwości przeciwzapalne i charakterystyka chemiczna olejków eterycznych z czterech gatunków cytrusów. PLoS ONE 2016, 11, e0153643. [Odnośnik]

59. Ascari, J.; de Oliveira, MS; Nunes DS; Granato, D.; Scharf, DR; Simionatto, E.; Otuki, M.; Soley, B.; Heiden, G. Skład chemiczny, działanie przeciwutleniające i przeciwzapalne olejków eterycznych z męskich i żeńskich okazów Baccharis punctulata (Asteraceae). J. Etnofarmakol. 2019, 234, 1–7. [Odnośnik]

60. Singh, P.; Singh, S.; Kapoor, IPS; Singh, G.; Isidorov, V.; Szczepaniak, L. Skład chemiczny i działanie przeciwutleniające olejku eterycznego i oleożywic z kłączy Curcuma Zedoaria, część -74. Biologia Żywności. 2013, 3, 42–48. [Odnośnik]

61. Jena S.; Ray, A.; Banerjee, A.; Sahoo, A.; Nasim, N.; Sahoo, S.; Kar, B.; Patnaik, J.; Panda, komputer osobisty; Nayak, S. Skład chemiczny i aktywność przeciwutleniająca olejku eterycznego z liści i kłączy Curcuma Angustifolia Roxb. Nat. Szturchać. Rez. 2017, 31, 2188–2191. [Odnośnik]

62. Andjičc, M.; Božin, B.; Draginic, N.; Koˇcovic, A.; Jeremic, JN; Tomovic, M.; Milojevic Šamanović, A.; Kladar, N.; ˇCapo, I.; Jakovljevic, V.; i in. Formułowanie i ocena preparatów miejscowych na bazie olejku eterycznego Helichrysum Italicum do gojenia się ran u szczurów z cukrzycą. Pharmaceuticals 2021, 14, 813. [Odsyłacz]

63. Ahlina, FN; Nugraheni, N.; Salsabila, IA; Haryanti S.; Dai, M.; Meiyanto, E. Ujawnienie odwrotnego efektu ekstraktu Galangal (Alpinia Galanga L.) przeciwko stresowi oksydacyjnemu w przerzutowych komórkach raka piersi i normalnych komórkach fibroblastów, przeznaczonych jako środek chemioterapeutyczny i przeciwstarzeniowy. Azjatycki Pac. J. Rak Poprzednia 2020, 21, 107–117. [Odnośnik]

64. Rada Europy. Farmakopea Europejska, wyd. 7; Dyrekcja ds. Jakości Leków i Opieki Zdrowotnej Rady Europy: Strasburg, Francja, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

65. van den Dool, H.; Kratz, PD Uogólnienie systemu indeksu retencji, w tym chromatografia z liniowym programowaniem temperatury gaz-ciecz. J. Chromatograf. 1963, 11, 463–471. [Odnośnik]

66. Instytut Norm Klinicznych i Laboratoryjnych. metoda referencyjna do oznaczania wrażliwości grzybów strzępkowych na środki przeciwgrzybicze w rozcieńczeniu bulionu; Zatwierdzona norma M38-A2, wyd. 2; Instytut Standardów Klinicznych i Laboratoryjnych: Wayne, PA, USA, 2008; ISBN 1-56238-668-9.

67. Instytut Norm Klinicznych i Laboratoryjnych. metoda referencyjna do oznaczania wrażliwości drożdży na środki przeciwgrzybicze w rozcieńczeniu bulionu; Zatwierdzona norma M27-A3, wyd. 3; Instytut Standardów Klinicznych i Laboratoryjnych: Wayne, PA, USA, 2008; ISBN 1-56238-666-2.

68. Zielony, LC; Wagnera, DA; Głogowski, J.; Skipper, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Analiza azotanów, azotynów i [15N] azotanów w płynach biologicznych. Analny. Biochem. 1982, 126, 131–138. [Odnośnik]

69. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. Skład chemiczny i aktywność biologiczna olejku eterycznego z Teucrium Scordium L. Subsp. Scordioides (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) z Sardynii (Włochy). Nat. Szturchać. Rez. 2021, 36, 5828–5835. [CrossRef] [PubMed]

70. Martinotti S.; Ranzato, E. Test gojenia ran zadrapań. W komórkach naskórka: metody biologii molekularnej; Turksen, K., wyd.; Humana: Nowy Jork, NY, USA, 2019; Tom 2109, s. 225–229.

Zastrzeżenie/Uwaga wydawcy:Oświadczenia, opinie i dane zawarte we wszystkich publikacjach należą wyłącznie do poszczególnych autorów i autorów, a nie do MDPI i/lub redaktorów. MDPI i/lub redaktorzy zrzekają się odpowiedzialności za jakiekolwiek szkody wyrządzone ludziom lub mieniu wynikające z jakichkolwiek pomysłów, metod, instrukcji lub produktów, do których odnosi się treść.