Biomonitoring mikotoksyn w osoczu pacjentów z chorobą Alzheimera i ParkinsonaⅢ
Apr 12, 2023
3. Wnioski
Przedstawiamy wyniki uzyskane w pierwszym badaniu HBM dotyczącym analizy 19 mykotoksyn i metabolitów w próbkach osocza zdrowych i pacjentów (AD i PD) ochotników w La Rioja (Hiszpania). Wyniki badania wskazują na pewne różnice między grupą kontrolną i pacjentami w poziomach OTA i STER. Przyczyna tej różnicy jest nieznana. Na obserwowany wynik może wpływać kilka czynników, takich jak różnice w diecie, zmieniony metabolizm spowodowany chorobą lub fakt, że płeć i wiek mogą odgrywać ważną rolę w poziomach mikotoksyn wykrywanych w osoczu.
Kliknij, aby cistanche nalewki na chorobę Alzheimera i Parkinsona
Wszystkie te czynniki zakłócające należy dokładnie ocenić w badaniach obejmujących większą liczbę osób. W niniejszym badaniu zaobserwowano różnice w OTA między zdrowymi towarzyszami i pacjentami, ale różnice wydają się być bardziej związane z płcią niż samą chorobą. Co więcej, OTA miała tendencję do zmniejszania się wraz z wiekiem, zwłaszcza w grupie z PD. Jednym z głównych odkryć jest to, że STER pojawił się dopiero po leczeniu -glukuronidazą/arylosulfatazą, co potwierdza hipotezę, że STER-glukuronidy powstają podczas metabolizmu człowieka. Ponadto stwierdzono wyższe stężenia STER w osoczu pacjentów, bez różnic między patologiami. Ponadto poziomy STER korelowały dodatnio z wiekiem u kobiet.
Podczas interpretacji danych ważne jest, aby podkreślić, że niniejsze badanie nie miało na celu wyjaśnienia patobiologii PD lub AD, ale raczej zbadanie, czy obecność możliwego środowiskowego czynnika ryzyka może działać jako czynniki perturbacyjne zaangażowane w gen – interakcja środowiska. Próbki z grupy kontrolnej pasują do wcześniejszych danych uzyskanych w podobnej populacji w sąsiednim regionie Hiszpanii i wykorzystują tę samą analizę LC/MS-MS [35].
Jednak porównując zdrowe osoby między obydwoma badaniami należy zauważyć, że: (i) przedział wiekowy jest inny, ponieważ większość próbek w niniejszym badaniu pochodziła od osób w wieku powyżej 60 lat, zwłaszcza w grupach AD i PD zgodnie z oczekiwaniami w przypadku chorób związanych z wiekiem; oraz (ii) liczba próbek kontrolnych, która jest niska w niniejszym badaniu. Ponadto przy interpretacji danych z niniejszego badania należy również wziąć pod uwagę inne ograniczenia; wiele danych było bardzo zbliżonych do LOD, a liczba próbek była ograniczona (zwłaszcza u mężczyzn z AD). Ogólnie rzecz biorąc, nasze wyniki pokazują pewne statystycznie istotne różnice między grupą kontrolną a pacjentami z chorobami neurodegeneracyjnymi, ale także wskazują na pewne reakcje związane z wiekiem i płcią, które z kolei mogą wpływać na metabolizm.
4. Materiały i metody
4.1. Odczynniki
LC-MS grade methanol (Honeywell Riedel-de-Haën, Seelze, Germany), LC grade acetonitrile (ACN) (Merck, Darmstadt, Germany), MS grade formic acid (purity > 98%), ammonium formate (both from Fluka Sigma-Aldrich, Mannheim, Germany), and deionized water (>18 MΩ cm-1 rezystywność) oczyszczone w systemie Ultramatic Type I (Wasserlab, Navarra, Hiszpania) zastosowano do przygotowania próbek i analizy LC-MS/MS. Kartridże Captiva EMR-lipid (3 ml) uzyskano z Agilent Technologies (Santa Clara, CA, USA).
Wszystkie mikotoksyny (materiał odniesienia, czystość większa lub równa 98 procent) zakupiono od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) jako roztwory ACN w następujących stężeniach AFM1, AFG2 i AFB2: 0. 5 ug/ml; AFG1 i AFB1: 2 ug/ml; OTA-d5 i OTB: 10 ug/ml; STER i DOM-1: 50 µg/ml; NIV, DON, 3-ADON, 15-ADON, NEO, DAS, FUS-X, ZEA i toksyny T-2 i HT-2: 100 µg/ml. Materiały porównawcze przechowywano w temperaturze -20 ◦C. Standardowe roztwory podstawowe przygotowano w ACN i przechowywano w temperaturze -20 ◦C. Roztwór roboczy, który zawiera wszystkie mikotoksyny, przygotowano przez rozcieńczenie odpowiednich pojedynczych roztworów podstawowych w ACN. Stabilność roztworów wzorcowych i roboczych w tych warunkach przechowywania oceniono wcześniej [36].
4.2. Przedmiotect
Świadoma pisemna zgoda została uzyskana od wszystkich uczestników przed włączeniem do badania. W sumie 94 pacjentów, w tym 44 pacjentów z łagodną chP, 25 pacjentów z demencją niezwiązaną z chP i 25 zdrowych osób z grupy kontrolnej, zostało zwerbowanych z oddziału neurologicznego w szpitalu San Pedro w La Rioja (Hiszpania) z aprobatą etyczną („Badanie profili lipidowych w próbkach surowicy/osocza od pacjentów z chorobą Parkinsona w celu uzyskania zróżnicowanego wzorca klinicznego do celów diagnostycznych” Ref: CEICLAR PI- 212, zatwierdzony 4 kwietnia 2016 r.) przez lokalną komisję etyczną ds. eksperymentów na ludziach (CEImLar , Comité Ética de Investigación con medicamentos de La Rioja). Pacjenci byli diagnozowani przez doświadczonych neurologów. Pacjenci z PD byli oceniani za pomocą zmodyfikowanej skali HY (Tabela S3), natomiast pacjentów z otępieniem niezwiązanym z PD oceniano za pomocą GDS (Tabela S4) w celu określenia stopnia zaawansowania choroby. Zdrowe kontrole obejmowały małżonków lub niespokrewnionych towarzyszy pacjentów bez widocznej lub znanej choroby neurologicznej lub chorób współistniejących.
4.3. Plasmama
Pobieranie Próbki krwi pobierano podczas wizyty lekarskiej. Krew zebrano do 4 ml probówek pokrytych EDTA (Vacutainer, nr ref. 368171) i osocze oddzielono w ciągu 2 godzin przez wirowanie przy 2200 x g przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Osocze natychmiast usunięto i przeniesiono do zakodowanych fiolek w porcjach po 0,2 ml, aby uniknąć powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, a następnie przechowywano w temperaturze -80°C. Zachowano odpowiednią ostrożność, aby uniknąć zanieczyszczenia próbek osocza komórkami lub składnikami osadu otrzymanego w wyniku wirowania.
4.4. Przygotowanie próbkicja
Obróbka plazmą przed i po hydrolizie enzymatycznej była taka, jak opisano w ArceLópez i in. (2020) [35,36]. W skrócie, próbki osocza (400 µl) dodano do wkładu lipidowego Captiva EMR, który zawierał 1200 µl zakwaszonego ACN (1 procent kwasu mrówkowego). Zastosowano próżnię i po 5 minutach dwie porcje po 400 µl (po jednej dla każdej grupy mikotoksyn, które będą badane) odcieku oddzielono, a następnie odparowano do sucha (60 ◦C).
Metodologia ta została wykorzystana do wykrycia 19 związków (mikotoksyn i metabolitów), które podzielono na dwie grupy (zgodnie z różnymi programami elucji potrzebnymi do rozdziału chromatograficznego): DOM-1, AFG2, AFM1, AFG1, AFB2, AFB1 , OTB, ZEA, STER, OTA, T-2, HT-2 (grupa I) oraz NIV, DON, FUS-X, NEO, 3-ADON, 15-ADON i DAS (grupa II). Pozostałość rekonstytuowano 200 µl fazy ruchomej w proporcji odpowiadającej grupie mikotoksyn przeznaczonej do analizy (40 procent B dla grupy I i 5 procent B dla grupy II).
Przed analizą chromatograficzną roztwór worteksowano (5 min) i przesączono (PVDF, 0,45 µm, Merck Millipore, Irlandia). Procedura hydrolizy enzymatycznej była następująca: 40}0 µl osocza potraktowano 50 µl mieszaniny enzymów glukuronidazy/sulfatazy (250 U/ml, 0,2 U/ml w PBS; z Helix Pomatia (Sigma Aldrich, Mannheim, Niemcy) Po wymieszaniu próbki inkubowano przez noc (37°C) w łaźni wodnej. Następnie przeprowadzono oczyszczanie próbki osocza za pomocą kartridży Captiva-EMR, podobnie jak opisano powyżej.
4.5. Analiza LC/MS-MS
Analizę LC-MS/MS przeprowadzono w systemie LC serii 1200 połączonym z 6410 Triple Quadrupole (QqQ) w trybie ESI(plus), oba z Agilent Technologies (Mannheim, Niemcy). Rozdział prowadzono w temperaturze 45°C na kolumnie Ascentis Express C18, 2,7 µm, wielkość cząstek 150 × 2,1 mm (Supelco Analytical, St. Louis, MO, USA) z fazą ruchomą złożoną z 5 mM mrówczanu amonu i 0,1% kwasu mrówkowego w wodzie (A) i 5 mM mrówczanu amonu i 0,1% kwasu mrówkowego w 95:5 metanol/woda (B) w warunkach gradientu.
Objętość wstrzyknięcia wynosiła 20 µl, a elucję gradientową przeprowadzono przy szybkości przepływu 0,4 ml/min. Parametry akwizycji danych opisano w Arce-López i in. (2020) [36]. Próbki analizowano i grupowano w sekwencje analityczne. Każda sekwencja zawierała, wraz z próbkami, osiem kalibratorów dopasowanych do matrycy.
Kalibratory te wykorzystano do przygotowania krzywych kalibracyjnych, które posłużyły do ilościowego oznaczenia mikotoksyn w analizowanych próbkach w tej samej kolejności. Kryteriami akceptacji krzywych kalibracyjnych były: minimum sześć punktów, współczynnik determinacji (R2 ) > 0,99 oraz obliczone wstecznie stężenie dla każdego kalibratora nie różniące się (wyrażone jako RE) od wartości nominalnej o ponad 15 procent (20 procent dla poziomu LOQ) [32]. Ponadto czasy retencji nie powinny różnić się o więcej niż 2,5% między próbkami a kalibratorami [33]. W zależności od dostępnej objętości osocza nie wszystkie próbki mogły być analizowane po obróbce enzymatycznej.
4.6. Walidacja metody analitycznej
Walidacja obu procedur (przed i po hydrolizie enzymatycznej) zgodnie z wytycznymi FDA i UE, jak opisano w Arce-Lopez et al. (202{{1{13}}}}) [35,36]. Wartości LOD wynosiły: 1,35 ng/ml dla DOM-1; 0,35 ng/ml dla AFG2, 0,18 ng/ml dla AFM1; 0.07 ng/ml dla AFG1 i AFB2; 0.04 ng/ml dla AFB1; 2,70 ng/ml dla HT-2; 0,40 ng/ml dla OTA i OTB; 0,20 ng/ml dla T-2 i STER; 1,80 ng/ml dla ZEA; 9,10 ng/ml dla wentylacji nieinwazyjnej; 1,94 ng/ml dla DON; 1,95 ng/ml dla FUS-X; 0,18 ng/ml dla NEO; 0,70 ng/ml dla 3-ADON; 1,20 ng/ml dla 15-ADON i 0,15 ng/ml dla DAS.
Wartości odzysku (w warunkach pośredniej precyzji) przed traktowaniem enzymatycznym wynosiły od 68,8 procent dla STER do 97,6 procent dla DAS (RDS mniejszy lub równy 15 procent dla wszystkich mikotoksyn) i nie stwierdzono różnic po traktowaniu enzymatycznym. Oceniono również efekty matrycy przed i po obróbce enzymatycznej i nie było różnic w większości mikotoksyn, uzyskując wartości RDS mniejsze lub równe 15 procent dla wszystkich z nich. Stabilność po dwóch cyklach zamrażania i rozmrażania oceniano przy dwóch poziomach stężenia (6 i 30xLOQ) (trzy powtórzenia na poziom). Wszystkie mikotoksyny były stabilne (RSD < 15 procent) (Tabela S7).
4.7. Analiza statystyczna i przetwarzanie danych
Podczas traktowania danych analitycznych za pomocą statystyki ważne jest wyjaśnienie rodzaju rozkładu charakteryzującego zbiór danych. Deskryptory i testy pakietów, których należy użyć, są różne, jeśli mamy dane o rozkładzie normalnym lub innym niż rozkład normalny. Do weryfikacji rozkładu normalnego poziomów badanych mikotoksyn zastosowano test Shapiro-Wilka.
Ponieważ hipoteza normalności została odrzucona, do obróbki statystycznej wykorzystano nieparametryczny (co nie implikuje żadnego założenia o rozkładzie) zestaw testów. Do oceny ewentualnych różnic między stężeniami OTA i STER w grupach i podgrupach zastosowano test sumy rang Wilcoxona (statystyka dwóch prób Manna–Whitneya) [49]. W statystyce test sumy rang Wilcoxona jest nieparametrycznym testem używanym do sprawdzenia, czy dwie próbki prawdopodobnie pochodzą z tej samej populacji, weryfikującym, że dla dwóch losowo wybranych wartości X i Y z dwóch populacji prawdopodobieństwo, że X jest większe niż Y jest równe prawdopodobieństwu, że Y jest większe niż X.
W tym samym celu zastosowano test Kruskala-Wallisa, w którym zestawienie zmiennych implikowało więcej niż jeden rozkład [50]. Do oceny korelacji między poziomami mikotoksyn a wiekiem (zmienna ilościowa) zastosowano współczynnik korelacji rang Spearmana (lub rho Spearmana). Wszystkie testy przeprowadzono na poziomie istotności 5 proc. Wyniki są zgłaszane wraz z poziomem istotności statystycznej i wartością p. Wszystkie analizy przeprowadzono przy użyciu oprogramowania STATA14 (Stata/IC 14.0, Copyright 1985–2015 StataCorp LP). W zakresie postępowania z danymi w celu ustalenia zbioru danych zmienne ilościowe i jakościowe potraktowano następująco: poziom OTA i STER. Zmienna ilościowa, zmienna nieujemna wyrażona jako wartości w ng/mL.
Wartości zostały przypisane w następujący sposób: wartość=0 ng/ml; kiedy znaleziono wynik analityczny pochodzący z analizy
Zmienna ilościowa została wykorzystana do skalowania diagnozy pacjentów z PD (Tabela S3). Dodatkowo zdefiniowano zmienną binarną (HY_d=0 i HY_d=1): HY_d=0 dla PD pacjenci z punktacją w skali HY w zakresie 1–2 (niezaburzone odruchy posturalne); HY_d=1 dla pacjentów z ChP, którzy uzyskali wynik w skali HY w zakresie 2,5–3 (upośledzone odruchy posturalne). Skala GDS. Do skalowania diagnozy pacjentów z AD zastosowano zmienną ilościową (tabela S4).
Mechanizm Cistanche'a leczy chorobę Alzheimera i chorobę Parkinsona
Cistanche to tradycyjne chińskie zioło, które jest używane od wielu lat ze względu na swoje potencjalne korzyści zdrowotne. W ostatnich badaniach stwierdzono, że Cistanche może mieć działanie neuroprotekcyjne i może być skuteczny w leczeniu choroby Alzheimera (AD) i choroby Parkinsona (PD).
Mechanizm Cistanche w skutecznym leczeniu AD i PD przypisuje się jego aktywnym składnikom, takim jak echinakozyd, akteozyd i cistanozydy. Uważa się, że związki te mają właściwości przeciwutleniające i przeciwzapalne, które mogą zmniejszać stres oksydacyjny i stany zapalne w mózgu, które są związane z rozwojem i postępem chorób neurodegeneracyjnych.
Cistanche może również promować wzrost komórek nerwowych i poprawiać funkcje poznawcze poprzez zwiększanie poziomu neurotroficznego czynnika pochodzenia mózgowego (BDNF), białka, które odgrywa kluczową rolę we wzroście i utrzymaniu neuronów. Ponadto wykazano, że Cistanche zmniejsza płytki -amyloidowe, które są cechą charakterystyczną choroby Alzheimera, oraz zmniejsza gromadzenie się -synukleiny w mózgu, co jest związane z chorobą Parkinsona.
Ogólnie rzecz biorąc, potencjalne korzyści terapeutyczne Cistanche w leczeniu AD i PD są obiecujące, ale potrzebne są dalsze badania w celu wyjaśnienia jego dokładnych mechanizmów działania i potwierdzenia jego skuteczności i bezpieczeństwa w warunkach klinicznych.
Bibliografia
1 Serrano-Pozo, A.; Frosch, poseł; Masliah, E.; Hyman, BT Zmiany neuropatologiczne w chorobie Alzheimera. Port Zimnej Wiosny. Perspektywa. Med. 2011, 1, a006189. [Odnośnik]
2. Fearnley, JM; Lees, AJ Starzenie się i choroba Parkinsona: selektywność regionalna istoty czarnej. Mózg 1991, 114, 2283–2301. [Odnośnik]
3. Barber, RC Genetyka choroby Alzheimera. Scientifica (Kair) 2012, 2012, 1–14. [Odnośnik]
4. Izco, M.; Carlos, E.; Alvarez-Erviti, L. Dwie twarze egzosomów w chorobie Parkinsona: od patologii do terapii. Neurobiolog 2021, 107385842199000. [CrossRef] [PubMed]
5. Hou, Y.; Dan, X.; Babbar, M.; Wei, Y.; Hasselbalch, SG; Croteau, DL; Bohr, VA Starzenie się jako czynnik ryzyka chorób neurodegeneracyjnych. Nat. ks. Neurol. 2019, 15, 565–581. [CrossRef] [PubMed]
6. Johnson, ja; Stecher, B.; Labrie, V.; Brundin L.; Brundin, P. Wyzwalacze, ułatwienia i czynniki pogarszające: ponowne zdefiniowanie patogenezy choroby Parkinsona. Trendy Neurosci. 2019, 42, 4–13. [Odnośnik]
7. Wainaina, Minnesota; Chen, Z.; Zhong, C. Czynniki środowiskowe w rozwoju i progresji choroby Alzheimera o późnym początku. Neuronauka. Byk. 2014, 30, 253–270. [Odnośnik]
8. Rahman, MA; Rahman, MS; Uddin, MJ; Mamum-Or-Rashid, ANM; Pang, MG; Rhim, H. Pojawiające się ryzyko czynników środowiskowych: mechanizmy wglądu w choroby Alzheimera. Otaczać. nauka Zanieczyszczenie. Rez. 2020, 27, 44659–44672. [CrossRef] [PubMed]
9. Bush, AI Metalowa teoria choroby Alzheimera. Choroba J. Alzheimera. 2012, 33, S277–S281. [Odsyłacz] 10. Moulton, PV; Yang, W. Zanieczyszczenie powietrza, stres oksydacyjny i choroba Alzheimera. J. Środowisko. Zdrowie publiczne 2012, 2012, 472751. [Odsyłacz]
11. Li, Y.; Kieł, R.; Liu, Z.; Jiang, L.; Zhang, J.; Li, H.; Liu, C.; Li, F. Związek między narażeniem środowiska na toksyczne pestycydy a chorobą Alzheimera: analiza naukometryczna i wizualizacja. Chemosfera 2021, 263, 128238. [Odsyłacz]
12. Fulop, T.; Witkowski, JM; Bourgade, K.; Khalil, A.; Zerif, E.; Larbi, A.; Hirokawa, K.; Pawelec G.; Bocti, C.; Lacombe, G.; i in. Czy hipoteza infekcji może wyjaśnić hipotezę beta-amyloidu dotyczącą choroby Alzheimera? Przód. Starzejąca się neuronauka. 2018, 10, 224. [Odsyłacz]
13. Vasefi, M.; Ghaboolian-Zare, E.; Abedelwahab, H.; Osu, A. Toksyny środowiskowe i postęp choroby Alzheimera. Neurochem. Int. 2020, 141, 104852. [Odsyłacz]
14. Goldman, SM Toksyny środowiskowe i choroba Parkinsona. rok Wielebny Pharmacol. Toksykol. 2014, 54, 141–164. [CrossRef] [PubMed]
15. Marras, C.; Konserwowanie, CG; Goldman, SM Środowisko, styl życia i choroba Parkinsona: implikacje dla profilaktyki w następnej dekadzie. Ruch. nieporządek. 2019, 34, 801–811. [CrossRef] [PubMed]
16. Van der Mark, M.; Brouwer, M.; Kromhout, H.; Nijssen, P.; Hus, A.; Vermeulen, R. Czy stosowanie pestycydów jest związane z chorobą Parkinsona? Niektóre wskazówki dotyczące heterogeniczności wyników badań. Otaczać. Perspektywa zdrowia. 2012, 120, 340–347. [CrossRef] [PubMed]
17. Gorell, JM; Johnson, CC; Rybicki, BA; Peterson, el.; Richardson, RJ Ryzyko choroby Parkinsona związane z narażeniem na pestycydy, rolnictwo, wodę ze studni i życie na wsi. Neurology 1998, 50, 1346–1350. [Odnośnik]
18. Priyadarshi, A.; Chuder, SA; Schaub, EA; Priyadarshi, SS Środowiskowe czynniki ryzyka i choroba Parkinsona: metaanaliza. Otaczać. Rez. 2001, 86, 122–127. [Odnośnik]
19. Mitchell, NJ; Bowers, E.; Hurburgh, C.; Wu, F. Potencjalne straty ekonomiczne dla amerykańskiego przemysłu kukurydzianego spowodowane skażeniem aflatoksynami. Dodatek do żywności. skażenie. Część A 2016, 33, 540–550. [CrossRef] [PubMed]
20. Marin, S.; Ramos, AJ; Cano-Sancho, G.; Sanchis, V. Mikotoksyny: Występowanie, toksykologia i ocena narażenia. Chemia spożywcza. Toksykol. 2013, 60, 218–237. [Odnośnik]
21. Janik, E.; Niemcewicz M.; Ceremuga, M.; Stela, M.; Saluk-Bijak, J.; Siadkowski, A.; Bijak, M. Molekularne aspekty mikotoksyn — poważny problem dla zdrowia człowieka. Int. J. Mol. nauka 2020, 21, 8187. [Odsyłacz]
22. Logrieco, A.; Miller, J.; Eskola, M.; Krska, R.; Ayalew, A.; Bandyopadhyay, R.; Battilani, P.; Bhatnagar, D.; Chulze, S.; De Saeger, S.; i in. Karta mikotoksyn: Zwiększanie świadomości i wspólne działania na rzecz minimalizacji narażenia na mikotoksyny na całym świecie. Toxins (Bazylea) 2018, 10, 149. [CrossRef] 23. Komisja Europejska. Rozporządzenie Komisji (WE) nr 1881/2006 z dnia 19 grudnia 2006 r. ustalające najwyższe dopuszczalne poziomy niektórych zanieczyszczeń w środkach spożywczych. Wyłączony. J. Eur. Unia 2006, 364, 5–24.
24. Parlament Europejski. Parlament Europejski i Rada UE Dyrektywa Parlamentu Europejskiego i Rady z dnia 7 maja 2002 r. w sprawie niepożądanych substancji w paszach dla zwierząt 2002/32. Wyłączony. J. Eur. Społeczności 2002, L140, 10–22.
25. Komisja Europejska. Zalecenie Komisji z dnia 17 sierpnia 2006 r. w sprawie obecności deoksyniwalenolu, zearalenonu, ochratoksyn A, T{3}} i HT-2 oraz fumonizyn w produktach przeznaczonych do karmienia zwierząt. Wyłączony. J. Eur. Unia 2006, L299, 7–9.
26. Eskola, M.; Kos, G.; Elliott, Connecticut; Hajšlová, J.; Mayar, S.; Krska, R. Ogólnoświatowe zanieczyszczenie roślin spożywczych mikotoksynami: trafność szeroko cytowanych „szacunków FAO” na poziomie 25 procent. Krytyk. Wielebny Nauka o Żywności. Nutr. 2020, 60, 2773–2789. [CrossRef] [PubMed]
27. Escrivá, L.; Czcionka, G.; Manyes, L.; Berrada, H. Badania nad obecnością mikotoksyn w próbkach biologicznych: przegląd. Toksyny (Bazylea) 2017, 9, 251. [CrossRef]
28. Gurusankar, R.; Yenugadhati, N.; Krishnan, K.; Hays, S.; Haines, D.; Zidek, A.; Kuchta S.; Kinniburgh, D.; Gabos, S.; Mattison, D.; i in. Rola monitoringu biologicznego człowieka w ocenie ryzyka zdrowotnego. Int. J. Ocena ryzyka. Manag. 2017, 20, 136–197. [Odnośnik]
29. Bredesen, DE Wziewna choroba Alzheimera: nierozpoznana — i uleczalna — epidemia. Starzenie się (Albany NY) 2016, 8, 304–313. [Odnośnik]
30. Martins, I. Overnutrition determinuje regulację LPS neurotoksyczności indukowanej mykotoksynami w chorobach neurodegeneracyjnych. Int. J. Mol. nauka 2015, 16, 29554–29573. [CrossRef] [PubMed]
31. Izco, M.; Vettorazzi, A.; Forcen, R.; Blesa, J.; de Toro, M.; Alvarez-Herrera, N.; Cooper, JM; Gonzalez-Peñas, E.; Lopez de Cerain, A.; Alvarez-Erviti, L. Doustna podprzewlekła ekspozycja na mikotoksynę ochratoksynę A indukuje kluczowe cechy patologiczne choroby Parkinsona u myszy sześć miesięcy po zakończeniu leczenia. Chemia spożywcza. Toksykol. 2021, 152, 112164. [Odsyłacz]
32. Centrum Oceny i Badań nad Lekami (FDA). Wytyczne dotyczące walidacji metod bioanalitycznych dla przemysłu. 2018. Dostępne online: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf (dostęp: 20 listopada 2019 r.).
33. Komisja Europejska. Decyzja Komisji z dnia 12 sierpnia 2002 r. wykonująca dyrektywę Rady 96/23/WE dotyczącą wykonywania metod analitycznych i interpretacji wyników (2002/657/WE). Wyłączony. J. Eur. Społeczności 2002, 221, 8–36.
34. EFSA. Zarządzanie lewostronnie ocenzurowanymi danymi w ocenie narażenia z dietą na substancje chemiczne. EFSA J. 2010, 8, 1–96.
35. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Irigoyen, A.; González-Peñas, E. Obecność 19 mikotoksyn w ludzkim osoczu w regionie północnej Hiszpanii. Toksyny (Bazylea) 2020, 12, 750. [CrossRef]
36. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Flores-Flores, M.; Irigoyen, A.; González-Peñas, E. Opracowanie i walidacja metodologii opartej na czyszczeniu lipidów Captiva EMR i analizie LC-MS/MS do jednoczesnego oznaczania mykotoksyn w ludzkim osoczu. Talanta 2020, 206, 120193. [Odsyłacz]
37. Remiro, R.; González-Peñas, E.; Lizarraga, E.; López de Cerain, A. Kwantyfikacja ochratoksyny A i pięciu analogów w czerwonych winach Navarra. Kontrola żywności 2012, 27, 139–145. [Odnośnik]
38. Yang, S.; Zhang, H.; De Saeger, S.; De Boevre, M.; Słońce, F.; Zhang, S.; Cao, X.; Wang, Z. Metabolizm in vitro i in vivo ochratoksyny A: badanie porównawcze z wykorzystaniem ultrasprawnej chromatografii cieczowej-kwadrupolowej/hybrydowej spektrometrii mas z czasem przelotu. Analny. Bioanalny. chemia 2015, 407, 3579–3589. [CrossRef] [PubMed]
39. Muñoz, K.; Cramer, B.; Dopstadt, J.; Humf, HU; Degen, GH Dowody na obecność koniugatów ochratoksyny A w próbkach moczu niemowląt i dorosłych. Mykotoksyna Res. 2017, 33, 39–47. [CrossRef] [PubMed]
40. Vidal, A.; Mengelers, M.; Yang, S.; De Saeger, S.; De Boevre, M. Biomarkery narażenia na mykotoksyny: kompleksowy przegląd. komp. Wielebny Nauka o Żywności. Bezpieczny dla żywności. 2018, 17, 1127–1155. [Odnośnik]
41. Panel EFSA CONTAM (Panel EFSA ds. zanieczyszczeń w łańcuchu żywnościowym); Schrenk, D.; Bodin, L.; Chipman, JK; del Mazo, J.; Grasl-Kraupp, B.; Hogstrand, C.; Hoogenboom, L.; Leblanc, J.; Nebbia, CS; i in. Ocena ryzyka ochratoksyny A w żywności. EFSA J. 2020, 18, 06113.
42. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Vettorazzi, A.; González-Peñas, E. Biomonitoring człowieka mikotoksyn we krwi, osoczu i surowicy w ostatnich latach: przegląd. Toksyny (Bazylea) 2020, 12, 147. [CrossRef]
Beatriz Arce-López 1 , Lydia Alvarez-Erviti 2 , Barbara De Santis 3 , María Izco 2 , Silvia López-Calvo 4 , Maria Eugenia Marzo-Sola 4 , Francesca Debegnach 3 , Elena Lizarraga 1 , Adela López de Cerain 5,6 , Elena González-Peńas 1,† i Ariane Vettorazzi 5,6,* ,†
1 Katedra Technologii Farmaceutycznej i Chemii, Grupa Badawcza MITOX, Szkoła Farmacji i Żywienia, Universidad de Navarra, 31008 Pampeluna, Hiszpania; barce@alumni.unav.es (BA-L.); elizarraga@unav.es (EL); mgpenas@unav.es (EG-P.)
2 Laboratorium Neurobiologii Molekularnej, Centrum Badań Biomedycznych w La Rioja (CIBIR), Piqueras 98, 3rd Floor, 26006 Logroño, Hiszpania; laerviti@riojasalud.es (LA-E.); mizco@riojasalud.es (MI)
3 National Reference Laboratory for Mycotoxins and Plant Toxins, Istituto Superiore di Sanità, 00161 Rzym, Włochy; barbara.desantis@iss.it (BDS); francesca.debegnach@iss.it (FD)
4 Servicio de Neurologia, Hospital San Pedro, Piqueras 98, 26006 Logroño, Hiszpania; slcalvo@riojasalud.es (SL-C.); memarzo@riojasalud.es (MEM-S.)
5 Department of Pharmacology and Toxicology, Research Group MITOX, School of Pharmacy and Nutrition, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Spain; acerain@unav.es 6 IdiSNA, Navarra Institute for Health Research, 31008 Pamplona, Spain
