Glikozyd cistanche w celu hamowania aktywności tyrozynazy

 

2 wyniki i dyskusja

 

2.1 Wpływ PHG, GLA i ich kombinacji na aktywność tyrozynazy

Rysunek 1pokazuje hamujące działanieRozwiązanie PBS PHGS, Rozwiązanie GLA PBS, IRozwiązanie PBS PHG/GLAna temat aktywności tyrozynazy.

ZRysunek 1a, półmasowe stężenia hamujące (IC50)Rozwiązanie PBS PHGS, Rozwiązanie GLA PBS, IRozwiązanie ARB PBSo aktywności tyrozynazy były(2.192 ± 0.038) g/L, (1.376 ± 0. 025) UG/ML, I({{0}}. 101 ± 0,003) UG/mlodpowiednio. Zakon siły hamowania tyrozynazy wynosiłArb> gla> phgs.

ZRysunek 1b, przy stężeniu masy0. 4 mg/ml, szybkości hamowania tyrozynazyPHGS/GLA (10: 1), PHGS/GLA (5: 1), IPHGS/GLA (1: 1)Rozwiązania PBS były88.06%, 92.93%, I94.37%odpowiednio. Dwa ostatnie były wyższe niż wskaźniki hamowania poszczególnych składników w tym samym stężeniu (36,92% dla roztworu PBS PBSI92,71% dla roztworu GLA PBS). Ponadto wskaźnik hamowaniaPHGS/GLA (1: 1)Rozwiązanie PBS było porównywalne z rozliczaniem kontroli pozytywnejArb.

Na podstawie obliczeń:

Ekstrakt cistanche z glikozydem na wysokim poziomie w celu hamowania aktywności tyrozynazy

 

.CI (wskaźnik kombinacji)wartości dlaPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Rozwiązania PBS byłyCI> 1, wskazujące działanie antagonistyczne.

.Wartości CIDoPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Rozwiązania PBS byłyCI <1, wskazując efekty synergistyczne.

To pokazuje, że gdy współczynnik masyPHGS do GLAJest40: 1, 20: 1, 10: 1, 5: 1 lub 1: 1, kombinacja wykazuje znaczące działanie synergistyczne w hamowaniu aktywności tyrozynazy.

 

 

Ryc. 1 Hamowanie tyrozynazy przez roztwory PBS PBS o różnych stężeniach masy, roztwór GLA PBS (A) i roztwór PBS PBS, roztwór GLA PBS i roztwór PBS/GLA PBS o stężeniu masy 0. 4 g/l (B) i wartości CI i wartości CI

 

2.2 Wpływ PHG, GLA i ich kombinacji na ożywianie wolnych rodników

Rysunek 2ilustruje radykalne i abts⁺ radykalne zdolności wymiataniaRozwiązanie etanolu PHGS, Roztwór etanolowy GLA, IRoztwór etanolu PHG/GLA.

ZRysunek 2a, Wartości IC50 dla rodnika DPPHPhgs, Gla, IVCbył(21,135 ± 1,164) UG/ML, (55,537 ± 5,230) UG/ML, I(2.852 ± 0. 252) UG/MLodpowiednio. Kolejność radykalnej zdolności do usuwania DPPH byłaVC> PHGS> GLA.

ZRysunek 2b, Wartości IC50 dla radykalnego oczyszczania Abts⁺Rozwiązanie etanolu PHGS, Roztwór etanolowy GLA, IRozwiązanie etanolu VCbył(22.7 0 9 ± 0,686) UG/ML, (11.677 ± 0. 120) UG/ML, I(3.237 ± 0. 345) UG/MLodpowiednio. Kolejność radykalnej zdolności do oczyszczania Abts⁺VC> GLA> PHGS.

ZRysunek 2C, w koncentracji0.4 g/L, Radykalne wskaźniki usuwania DPPHPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Rozwiązania etanolu były87.02% ~ 89.43%, które były wyższe niż wskaźniki zmiatania poszczególnych elementów (85,32% dla roztworu etanolu PHGSI83,31% dla roztworu GLA etanolu) i porównywalne z kontrolą pozytywnąVC (84.54%). .Wartości CIDoPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Rozwiązania etanolu byłyCI> 1, wskazując na antagonistyczne efekty, podczas gdyWartości CIDoPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Rozwiązania etanolu byłyCI <1, a także radykalne wskaźniki usuwania DPPH były powyżej85%, wskazując silną zdolność wymiatania radykalnego DPPH.

ZRysunek 2d, w koncentracji0.4 g/L, radykalne wskaźniki usuwania abtsPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Rozwiązania etanolu były99.87% ~ 100.13%, które były wyższe niż w poszczególnych elementach (97,81% dla roztworu etanolu PHGSI97,96% dla roztworu GLA etanolu) i porównywalne z kontrolą pozytywnąVC (99.92%). .Wartości CIDoPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Rozwiązania etanolu byłyCI> 1, wskazując na antagonistyczne efekty, podczas gdyWartości CIDoPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Rozwiązania etanolu byłyCI <1, wskazując silną zdolność do usuwania radykalnego Abts⁺.

Podsumowując, wśród dziewięciu kombinacjiPHGS/GLA, PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), IPHGS/GLA (10: 1)Roztwory PBS wybrano do kolejnych eksperymentów komórkowych ze względu na ich stosunkowo wysokie hamowanie aktywności tyrozynazy i silne działanie synergistyczne w przeciwutlenianiu.

Wskaźniki hamowania tyrozynazy:94,37%, 92,93%i 88,06%odpowiednio.

DPPH Radykalne wskaźniki wymiotowania:89,44%, 88,72%i 88,10%odpowiednio.

Abts⁺ Radykalne wskaźniki zmiatania:100,13%, 100,01%i 99,87%odpowiednio.

---

2.3 Wpływ PHG, GLA i ich kombinacji na żywotność komórek B16F10 i HACAT

Rysunek 3pokazuje skutkiRozwiązanie PHGS DMEM, Rozwiązanie GLA DMEM, IRozwiązanie PHGS/GLA DMEMo rentownościB16F10IHacatkomórki.

ZRysunek 3a - C.:

Phgsprzy stężeniach78,125 ~ 625 ug/ml(Rysunek 3A) iGlaprzy stężeniach3,125 ~ 25 ug/ml(Ryc. 3b) nie wykazywał cytotoksyczności w kierunkuKomórki B16F10.

PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), IPHGS/GLA (10: 1)Rozwiązania DMEM w stężeniu25 ug/mlnie wykazywał cytotoksyczności (ryc. 3C).