Oznaczanie całkowitej zawartości saponin w Boschniakia Rossica i Herba Cistanches metodą spektrofotometrii Ⅰ

Abstrakcyjny:

Cel Niniejsza metoda ilościowa określa zawartość saponin całkowitych w Boschniakia rossica iHerba cistanchesoraz treśćoznacza się całkowitą ilość saponin． Metody Jako substancję odniesienia wybrano salidrozyd, zastosowano reakcję barwną z waniliną i kwasem nadchlorowym. Następnie oznaczono zawartość saponin całkowitych w Boschniakia rossica i Herba cistanches przy 523 nm metodą spektrofotometryczną. Ｒwyniki Krzywa salidrozydu była liniowa w zakresie 0． 05133 - 0． 2567mg·ml－ 1z korelacją 0． 9992, a równanie regresji liniowej miało postać Y=1. 611X + 0． 0573． W przypadku Boschniakia rossica średni odzysk salidrozydu wyniósł 99. 68% przy ＲSD wynoszącym 1． 68% ( n=6); a dla odległości Herby średni odzysk salidrozydu wyniósł 101. 18% przy ＲSD wynoszącym 0． 94% ( n=6)． Wnioski Metoda jest dokładna, prosta i niezawodna. Można go zatem wykorzystać do oznaczania zawartości saponin ogólnych w Boschniakia rossica i Herba cistanches.

Słowa kluczowe:Boschniakia rossica;Herba cistanches; Razem saponiny; Determinacja; Spektrofotometria; Salidrozyd

JAK DŁUGO DZIAŁA CISTANCHE?

Cistanche desericola Y. C. Ma i Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov to pasożytnicze rośliny lecznicze należące do rodziny Orobanchiaceae. Cistanche Deserticola to pasożytnicza roślina żyjąca na korzeniach Haloxylon ammodendron, drzewa pustynnego. Produkowany jest głównie w Xinjiangu i Lidze Alxa w Mongolii Wewnętrznej. Nazywany jest „żeń-szeniem pustynnym” ze względu na niski plon i wysoką wartość leczniczą. Konik polny [1] produkowany jest w północno-wschodniej części mojego kraju [2]. Według folkloru ma ona działanie nieśmiertelne, dlatego nazywana jest północno-wschodnią „Trawą Wiecznego Wieku”. Stosuje się go przy impotencji spowodowanej niewydolnością nerek, bólach spowodowanych przeziębieniem w talii i kolanach, suchości jelit i zaparciach. Może odżywiać i wzmacniać organizm, opóźniać starzenie się i jest autentycznym zasobem leczniczym na północnym wschodzie [3]. Obydwa mają podobne działanie i oba mają działanie tonizujące nerki, wzmacniające Yang, nawilżające jelita i środki przeczyszczające [4]. Według zapisów o Cistanche Deserticola w „Kompendium Materia Medica” Li Shizhena z dynastii Ming: „Substancja ta jest tonizująca, ale nie szorstka, dlatego nazywa się ją spokojną. Rzadko można ją dostać od Congrong, więc jest wypełniona Cistanche desericola.” Oznacza to, że Cistanche Deserticola była kiedyś używana jako alternatywny materiał leczniczy dla Cistanche Deserticola. , Współczesne badania wykazały, że zarówno Cistanche Deserticola, jak i Estuary Deserticola mają działanie farmakologiczne, takie jak działanie przeciwstarzeniowe [5, 6], przeciwdziałające zmęczeniu [7, 8], poprawiające funkcje odpornościowe [9, 10] i poprawiające pamięć [{{ 12}}].

Zawartość glikozydów ogółem w Grasshopper i Cistanche Deserticola ma wartość dogłębnych badań. Oba zawierają saponiny, olejki lotne, cukry, aminokwasy i inne składniki. Uczeni donoszą o badaniach porównawczych składników olejków eterycznych, cukrów, aminokwasów i innych składników obu [4, 14, 15], ale określenie całkowitej zawartości glikozydów w obu przypadkach. W literaturze nie ma żadnych raportów . Głównymi składnikami Cistanche desericola są glikozydy fenylopropanoidowe (seria glukozydów A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], a Cistanche desericola to glikozydy fenyloetanoidowe (seria Cistanche desericola )[17,18] oba saponiny są podobne i mają podobny składnik, salidrozyd. Uważamy, że glikozydy są ważnymi składnikami aktywnymi obu substancji i badamy zastosowanie spektrofotometrii do określenia zawartości wszystkich glikozydów. , aby zapewnić podstawy teoretyczne dla dalszego rozwoju i wykorzystania zasobów Echinacea Deserticola i Cistanche Deserticola.

1 Materiały i instrumenty

1.1 Materiał i odczynniki: Amaranth officinale, zebrany w okolicach góry Changbai, zidentyfikowany jako roślina z rodziny Orobanaceae

Wysuszoną całą roślinę Orobanche coerulescens umyć próbkę i spuścić wodę

Oddzielić, umieścić w suszarce o stałej temperaturze 40 stopni, wysuszyć do stałej masy, zmiażdżyć, przepuścić przez sito o oczkach 40 i przygotować

[19]; Cistanche Deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., zidentyfikowane jako umieszczone w wykazie

Cistanche desericola Y. C. Suszone mięso Ma

Łodygi umyte, wysuszone na powietrzu, wysuszone do stałej masy, rozdrobnione, przesiane przez sito 40-mesh, odłożone; czerwony

Substancja referencyjna krasuzydu (dostarczona przez China Institute of Pharmaceutical and Biological Products, numer partii 110818)

- 200404, w celu określenia treści); wszystkie użyte odczynniki doświadczalne mają krajową jakość analityczną.

1. 2 Instruments 752N Spektrofotometr UV-VIS (Shanghai Jingke); Tu-1901 para

Spektrofotometr wiązkowy UV (Beijing Puxi General Co., Ltd.); elektroniczna waga analityczna

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Kruszarka uniwersalna o dużej prędkości (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 metody

2.1 Przygotowanie roztworu odniesienia

Użyj wagi analitycznej, aby dokładnie odważyć salidrozyd 15,40mg, rozpuścić w metanolu i przenieść do 25-kolby miarowej i dostosować objętość do kreski. Przygotuj tak, aby zawierał 0,0% salidrozydu na ml. Roztwór 616 mg stosuje się jako roztwór referencyjny i szczelnie przechowuje się w lodówce do późniejszego użycia.

2.2 Przygotowanie roztworu testowego

Użyj wagi analitycznej, aby dokładnie zważyć proszki lecznicze Grasshopper i Cistanche Deserticola. 2. 0g, umieścić w kolbie okrągłodennej, dodać 40ml 90% etanolu, raz ogrzać i ekstrahować Grasshopper za pomocą ciepła i ekstrakcji pod chłodnicą zwrotną, a następnie dwukrotnie ogrzać i wrzucić Cistanche Deserticola, każdy czas ekstrakcji wynosi 1,5 godziny, po czym filtrację próżniową, połączyć przesącz, zatężyć do sucha w łaźni wodnej, dodać 25 ml wody do rozpuszczenia, ekstrahować 3 razy eterem naftowym, za każdym razem po 25 ml, odrzucić ciekły eter naftowy z górnej warstwy, a następnie kontynuować ekstrakcję 3 razy z nasyconym wodą n-butanolem. każdorazowo 25ml, połączyć trzy ekstrakty n-butanolu, ciekły n-butanol odparować w łaźni wodnej pod wyciągiem, rozcieńczyć metanolem do kolby miarowej o pojemności 10ml, dobrze wymieszać, następnie dokładnie odmierzyć 1ml roztworu i rozcieńczyć go metanol do objętości 25 ml. butelkę, dobrze wymieszaj i użyj jako roztworu testowego do późniejszego użycia.

2. 3. Wybór długości fali pomiarowej

będzie 1. Umieść 25 ml roztworu odniesienia i roztworu testowego w miarowych probówkach z korkami, odparuj rozpuszczalnik metanolowy w łaźni wodnej o stałej temperaturze 60 stopni i dodaj 0. 2 ml 5% roztworu kwasu octowego wanilinowo-lodowatego i 0,8 ml roztworu kwasu nadchlorowego poddano reakcji w łaźni wodnej o temperaturze 60 stopni przez 15 minut. Wyjąć probówkę i natychmiast ochłodzić ją wodą z lodem przez 5 min. Dodać 5 ml lodowatego kwasu octowego i dobrze wstrząsnąć [20]. W ten sam sposób przygotuj roztwór odniesienia, używając metanolu. Roztwór po wywołaniu zabarwienia poddano skanowaniu długości fali, a długość fali maksymalnej absorpcji wynoszącą 523 nm po reakcji barwnej salidrozydu wybrano pomiędzy 400 a 800 nm jako długość fali pomiarowej całkowitych glikozydów Escherichia coli i Cistanche Deserticola. Wzory skanowania substancji kontrolnej i badanej przedstawiono na rysunku 1.

2. 4. Badanie zależności liniowej: Za pomocą pipety dokładnie narysuj roztwór referencyjny 0. 5,1. 0,

1. 5,2． 0,2. Do zakorkowanych probówek o numerach od 1 do 5 umieszczono 5 ml i przeprowadzono reakcję barwną zgodnie z etapami „2.3”. Przeprowadzono ślepe doświadczenie z metanolem w równoległych warunkach i zmierzono absorbancję przy długości fali 523 nm. Absorbancja A (Y ) to rzędna, stężenie mg·ml-1

(X) to odcięta, przeprowadzana jest regresja liniowa i równanie regresji to Y {{0}}. 611X +0. 0573 ( r=0. 9992), wynik pokazuje, że stężenie masowe salidrozydu wynosi 0. Zależność liniowa jest dobra w zakresie 05133-0,2567 mg·ml-1. Wyniki przedstawiono na rysunku 2.

2.5 Test stabilności

Dokładnie odmierz odpowiednią ilość roztworu testowego Grasshopper i Cistanche Deserticola, wywołaj kolor zgodnie z metodą opisaną w „2.3” i równomiernie zmierz wartość absorbancji 6 razy w ciągu 30 minut. To pokazuje, że w ciągu 30 minut od pojawienia się zabarwienia u Grasshoppera i Cistanche Deserticola. Trwałość roztworu testowego jest stosunkowo dobra. Wyniki przedstawiono w tabeli 1.

2.6 Próba precyzji

Dokładnie odmierz odpowiednią ilość roztworu odniesienia, wywołaj kolor zgodnie z metodą opisaną w punkcie „2.3” powyżej i mierz absorbancję 6 razy w sposób ciągły. Wyniki przedstawiono w tabeli 2. Wyniki pokazują, że precyzja tego instrumentu doświadczalnego jest dobra.

Rycina 1 Wzory skanowania cienkowarstwowego salidrozydowej substancji referencyjnej (A), roztworu testowego konika polnego (B) i roztworu testowego cistanche Deserticola (C)

2. 7. Badanie powtarzalności.

Dokładnie odważ 6 porcji proszku z konika polnego i cistanche desericola, każda porcja zawiera 2, 0 g, po podgrzaniu i ekstrakcji pod chłodnicą zwrotną przy użyciu ustalonego optymalnego procesu ekstrakcji, wykonaj kroki opisane w „2. 3” i zmierz absorbancja przy długości fali 523 nm. Wyniki pomiarów przedstawiono w tabeli 3 i tabeli 4.

2. 8. Badanie współczynnika odzysku próbki.

Dokładnie zważ 6 próbek Grasshopper i Cistanche Deserticola ze znanym procentem masowym całkowitej zawartości glikozydów. Każda próbka ma 12 mg. Dokładnie dodać 2 ml roztworu referencyjnego salidrozydu. Postępuj zgodnie z „2.2”. Wyodrębnij próbkę pod pozycją, określ całkowitą zawartość glikozydów po wywołaniu koloru zgodnie z pozycją „2.3” i oblicz współczynnik odzysku próbki. Wyniki przedstawiono w Tabeli 5 i Tabeli 6.