Parametry ekstrakcji i metody suszenia Cistanche Deserticola

Cistanche to Cistanche desericola YC Ma lubCistanche tubulosa (Schenk) Wightsucha mięsista łodyga z łuskowatymi liśćmi rośliny OrobanchiaceaeCistanche desericola YC Ma[1]. Głównym składnikiem aktywnym Cistanche Deserticola są glikozydy fenyloetanolu [2-4). Badania farmakologiczne wykazały, że pełni on funkcje m.inśrodek zwiększający popęd płciowy, poprawa odporności, Iwzmacnianie pamięci[4-9].

W ostatnich latach metodologia powierzchni odpowiedzi była szeroko stosowana w wydobywaniu tradycyjnej medycyny chińskiej [{{0}}). Metoda powierzchni odpowiedzi ma nieodłączne zalety w postaci wysokiej dokładności wykrywania, mniejszej liczby wymaganych eksperymentów, dokładnego przewidywania modeli funkcyjnych i możliwości odzwierciedlenia związku między czynnikami a przewidywanymi wartościami [15-17). Dlatego w tym eksperymencie jako wartość odpowiedzi wykorzystuje się kompleksową ocenę zawartości pięciu glikozydów fenyloetanolu i wykorzystuje oprogramowanie Design-Expert 8.0.6.1 do zaprojektowania eksperymentu, optymalizacji procesu ekstrakcji Cistanche Deserticola oraz dostarczenia informacji do identyfikacji i ustanowienie standardów jakościCistanche desericola.

Obecnie indeksskładniki: echinaceazyd i werbaskozydto gorące tematy badawcze w zakresie technologii ekstrakcji i przetwarzaniaCistanche desericola. Wydanie Farmakopei Chińskiej z 2015 r. stanowi, że metoda przetwarzania Cistanche desericola polega na „usuwaniu zanieczyszczeń, myciu, nawilżaniu, krojeniu w grube plasterki i suszeniu”. [1] nie ma jednoznacznych przepisów dotyczących sposobu suszenia. Dlatego też w tym eksperymencie wykorzystano osiem różnych metod suszenia, w tym suszenie na słońcu, suszenie w cieniu, suszenie w piekarniku (40, 60, 80, 100, 120 stopni) i liofilizację, w celu przetworzenia Cistanche Deserticola [18], co dostarczyło teoretycznych podstaw dla proces suszenia Cistanche desericola.

Na wskazówkach.

EKSTRAKT Z CISTANCHE Z 30% ECHINKAOZYDEM

1 Materiały i instrumenty

Świeża Cistanche Deserticola zebrano w październiku 2018 r. Miejscem pochodzenia jest Mitan Township, Minqin County, Baiyin, Gansu Province. Profesor nadzwyczajny Guo Yehong z Uniwersytetu Rolniczego Gansu zidentyfikował ją jako Cistanche desericola YC Ma, mięsistą łodygę z liśćmi łuskowatymi. Substancje referencyjne echinaceazyd (numer serii 82854-37-3, ułamek masowy większy lub równy 98%), cistancheazyd A (numer partii 93236-42-1, udział masowy większy lub równy 95%), werbaskozyd (numer serii {{ {5}}, ułamek masowy większy lub równy 98%), izomuurabazyna (numer serii 61303-13-7, ułamek masowy większy lub równy 98%), 2′-acetylerbaskozyd (numer serii 94492-24-7 ułamek masowy Większy lub równy 95%) zakupiono od Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; kwas mrówkowy i metanol są do chromatografii, Merck Company of Germany; woda jest wodą oczyszczoną, a pozostałe odczynniki mają czystość analityczną.

Chromatograf cieczowy Waters Acquity, detektor PDA, stanowisko do chromatografii Empower i system zarządzania rozpuszczalnikami czwartorzędowymi; Myjka ultradźwiękowa KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Firma; waga analityczna AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; Liofilizator LyoQuest-85, Telstar, Hiszpania.

2 Metody i wyniki

2.1 Przygotowanie roztworu odniesienia

Dokładnie odważ odpowiednią ilośćechinaceazyd, cistancheozyd A, werbaskozyd, isorbaskozydi wzorce referencyjne 2'-acetylerbaskozydu i dodać 70% metanolu, aby uzyskać stężenia masowe 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 i 0,48 mg/ml mieszanego roztworu referencyjnego.

2.2 Warunki chromatograficzne Cistanche Deserticola

Waters Symmetry C18 (250 mm x 4,6 mm, 5 μm); temperatura kolumny 30 stopni, przepływ objętościowy 1,0 ml/min; fazą ruchomą jest metanol-0.1% wodny roztwór kwasu mrówkowego, gradient elucji: 0~12 min, 29%~34% metanol; 12-40 min, 34%-40% metanolu; 30-35 min, 40%-35% metanolu; 35-40 min, 30% metanol;

1-echinakozyd 2-cistanche A 3-werbaskozyd 4-izoakteozyd 5-2′-acetyloakteozyd

Ryc. 1 HPLC mieszanego odniesienia (A) i próbki C. desericola (B)

2.3 Przygotowanie roztworu testowego

Odważyć dokładnie 1 g suszonego proszku Cistanche desericola do kolby Erlenmeyera (przepuszczonej przez sito 65- mesh), dodać 50 ml 50% metanolu, zważyć masę za pomocą ultradźwięków przy 40 kHz przy 150 W, schłodzić do temperatury pokojowej i przygotuj masę, aby ją otrzymać.

2.4 Badanie zależności liniowej

Weź {{0}}.1, {{2{22}}}}.5, 1, 2, 4 i 8 ml powyższego mieszanego roztworu referencyjnego do 10 ml kolbie miarowej i dodać 70% metanolu do kreski. Dokładnie pobierz 10 µl i zmierz zgodnie z warunkami chromatograficznymi „2,2”. Stężenie masy to odcięta (X), a powierzchnia piku to rzędna (Y). Wykonaj regresję liniową, a równania regresji to: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, zakres liniowy 10,4 ~ 832,0 ug/ml; Cistanchezyd AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, zakres liniowy 6.3-504.0 ug/ml; Isomurabazyna Y＝92 831 Glikozyd Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, zakres liniowy 4,8~384,0 ug/ml.

2.5 Przegląd metodologiczny

2.5.1 Kontrola precyzyjna

Weź 20 µl mieszanego roztworu odniesienia z punktu „2.1” i wstrzyknij 6 razy w sposób ciągły, aby zmierzyć powierzchnię pików echinaceazydu, cistancheazydu A, werbaskozydu, izorebaskozydu i 2'-acetylwerbaskozydu. RSD wynoszą odpowiednio 0,23%. , {{10}},71%, 0,59%, 0,41%, 0,29%, co wskazuje, że instrument ma dobrą precyzję.

2.5.2 Test powtarzalności

Pobrać 6 porcji tej samej próbki Cistanche Deserticola, przygotować roztwór testowy zgodnie z pozycją „2.3”, wstrzyknąć próbkę w warunkach chromatograficznych opisanych w pozycji „2.2” i zmierzyć powierzchnię piku. Wyniki Średnie frakcje masowe echinaceazydu, cistancheozydu A, werbaskozydu, izorebaskozydu i 2′-acetylwerbaskozydu wynosiły 1,83%, 0,21%, 2,34%, 0,13% i {{15 }},68%, a RSD odpowiednio 1,32. %, 0,83%, 1,24%, 2,19%,

0,78%, co wskazuje, że metoda charakteryzuje się dobrą powtarzalnością.

2.5.3 Próba stabilności

Określ stabilność tego samego roztworu testowego (przygotowanego zgodnie z „2.3”) po 0, 2, 4, 8, 12, 24 i 48 godzinach, aby otrzymać echinaceazyd, cistancheozyd A, werbaskozyd i izolubaskozyd. , powierzchnia piku 2′-acetylwerbaskozydu, RSD wyniosła odpowiednio 0,58%, 0,21%, 1,58%, 1,46%, 2,19%, co wskazuje, że roztwór testowy był stabilny w ciągu 48 godzin.

2.5.4 Test odzysku próbki

Pobierz 1 g 6 próbek Cistanche Deserticola o znanej zawartości i dokładnie dodaj pewną ilość mieszanego roztworu referencyjnego (Echinaceazyd 1,06 mg/ml, Cistancheozyd A 0.86 mg /ml, werbaskozyd 2,17 mg/ml, izolubaskozyd 0,79 mg/ml, 2′-acetylwerbaskozyd 0,91 mg/ml), dodać 70% metanolu do uzupełnienia do 50 ml i nastrzyknąć próbki zgodnie z warunkami chromatograficznymi „2.2”. Zmierzone średnie odzyski wynoszą odpowiednio 101,52%, 99,21% i 102,62%. , 98,62%, 97,36%, RSD wynosi odpowiednio 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13%, a stopień odzysku próbki jest dobry.

Cistanche to dobrze znane zioło tonizujące, które może odżywiać i chronić nerki. Według teorii tradycyjnej medycyny chińskiej Cistanche jest najlepszym ziołem na nerki. Cistanche jest bogate w echinakozyd, akteozyd i flawonoidy. Te skuteczne składniki Cistanche mogą zmniejszać apoptozę komórek nerek i zwiększać proliferację komórek nerek. Dlatego Cistanche jest naturalnym suplementem na nerki.