Część 2 Liposom glikozydów fenyloetanolowych hamuje indukowaną przez PDGF aktywację HSC poprzez regulację szlaku sygnałowego FAKPI3KAkt
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materiały i metody
4.1. Materiały
CPhG (glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche)zostały zakupione od Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, Chiny). Treśćjeżówkawynosiła ponad 35 procent, a akteozydu ponad 16 procent. Lecytynę zakupiono od Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Szanghaj, Chiny). 1,2-Dipalmitoilo-sn-glicerol-3-fosfocholina (DPPC) i cholesterol zostały dostarczone przez Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, USA). Unieśmiertelniona komórka gwiaździsta wątroby szczura została dostarczona przez Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Szanghaj, Chiny). Zmodyfikowaną pożywkę Eagle'a Dulbecco (DMEM) zakupiono w firmie Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, USA). Surowicę płodową bydlęcą (FBS) zakupiono z Gibco Life Technologies (Waltham, MA, USA). Penicylina (100 µg/ml) i streptomycyna (100 µg/ml) były produktami Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimetylotiazol-2-yl){ {13}},5-bromek difenylotetrazoliowy] (5 mg/ml) zakupiono od Sigma (Oakville, ON, Kanada). Aktywność LDH oceniano przy użyciu zestawu do oznaczania LDH z Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Pekin, Chiny). Zestaw I do wykrywania apoptozy aneksyny V FITC i bufor do wybarwiania jodkiem propidyny (PI)/RNazą zakupiono w firmie BD Biosciences (San Diego, CA, USA), a rrPDGF-BB dostarczono przez R&D Systems (Minneapolis, MN, USA). Odczynnik TRIzol został zakupiony od Thermo Fisher Scientific, Inc. Zestaw RevertAid First Strand cDNA Synthesis był produktem Thermo Fisher Scientific, Inc. (Wilno, Litwa). TB Green Premix Ex Taq TM II zakupiono od Takara (Dalian, Chiny). Roztwór do pirolizy Ripa został dostarczony przez Thermo Fisher Scientific, Inc. Inhibitor proteazy, fluorek fenylometylosulfonylowy, a mieszaninę inhibitorów fosfatazy o szerokim spektrum zakupiono od Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, Chiny). Prążki białka uwidoczniono za pomocą substratu Pierce™ ECL Western Blotting Substrate, który został dostarczony przez Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Enzymem chrzanowym znakującym kozią anty-króliczą IgG zakupiono w Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Szanghaj, Chiny). Zestaw próbny Super Signal West Femto został dostarczony przez Thermo Fisher Scientific, Inc. Królicze anty-p-aktyna, a-SMA, kolagen -1, FAK, PI3K, fosfo-PI3K, Akt i przeciwciało fosfo-Akt wszystkie zostały zakupione od Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Pekin, Chiny). X-3-FAK i X-3-NC zostały zakupione od Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Szanghaj, Chiny). Lipofectamine 2000 został dostarczony przez Invitrogen.
4.2. Przygotowanie liposomów CPhG
Lecytynę, DPPC i cholesterol (1:2:2, m/m/m) rozpuszczono w mieszaninie chloroformu i metanolu (2:1 obj./obj.), obracano, aby utworzyć błonę w stopniu 49-50, orazCPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche)(250 µg/ml) dodano następnie. Reaktywny roztwór obracano i nawadniano w sposób ciągły, a błonę fosfolipidową przeniesiono do wody, tworząc liposomy CPG. Proces kapsułkowania liposomów powtórzono zgodnie z powyższymi metodami. W celu uzyskania jednorodnego liposomu, kapsułkowany liposom ekstrudowano 5 razy za pomocą mikroporowatej membrany 0.45 ?m i filtrowano 18-20 razy przez membranę 0,22 ?m. Liposomy CPG przechowywano w 4 stopniach . Rozkład wielkości cząstek mierzono laserowym analizatorem wielkości cząstek, kształt cząstek obserwowano za pomocą transmisyjnej mikroskopii elektronowej, a ładunek leku i wydajność enkapsulacji określano metodą HPLC.
4.3. Uwalnianie in vitro z liposomów CPG i CPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche)
Profil uwalniania in vitro liposomów CPG iCPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche) przeprowadzono metodą membran dializacyjnych. Łącznie 5 ml każdej próbki przeniesiono do worka dializacyjnego z odcięciem masy cząsteczkowej 14,000 Da. Worek do dializy zanurzono w 20{{10 }} mL roztworu buforu PBS (pH=6.0) wibrowało w temperaturze 37 stopni. Pożywka uwalniająca (3 ml) została wycofana i zastąpiona roztworem buforu izopiknicznego PBS (pH=6,0) w zaplanowanych odstępach czasu (0,5,1, 2, 4, 8,12,16, 24 i 48 h). Stężenia echinakozydu w liposomach CPG iCPhGw medium uwalniającym zostały określone przez
HPLC. Skumulowane uwalnianie (w procentach) liposomów CPG iCPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche) obliczono za pomocą następującego równania (1):
gdzie Cn to stężenie leku w medium uwalniającym w n-tym punkcie pobierania próbek, V to objętość uwolnionego medium, a W to dawka całkowita.
Aby lepiej zrozumieć charakterystykę uwalniania w warunkach in vitroCPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche) liposom iCPhG, zastosowano trzy różne modele w celu dopasowania uzyskanych danych uwalniania: (a) model kinetyki zerowego rzędu, (b) model kinetyki pierwszego rzędu oraz (c) model Higuchi podany w równaniach (2)-(4) :
gdzie Mt/Mo to ułamek kurkuminy uwolnionej z próbki w czasie t, a k to stała uwalniania różnych modeli. Współczynnik korelacji jest obliczany w celu zilustrowania stopnia dopasowania między modelem uwalniania a danymi.
4.4. Cytotoksyczność
W przypadku HSC gęstość 1 x 105 komórek/ml wysiano na płytki ze studzienkami 96- i pozostawiono do wzrostu przez noc w temperaturze 37 stopni w inkubatorze z 5% CO2. Witalność komórek została przetestowana na szerokim zakresieCPhGstężenia liposomów (117,795,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68,1,84, 0,92 i 0,46 µg/ml) w celu wykrycia żywotności komórek testowych i obliczenia wartości IC50. Następnie komórki inkubowano w temperaturze 37 stopni przez 4 godziny z 20 ?l MTT (5 mg/ml w roztworze PBS). Purpurowy produkt MTT-Product rozpuszczono w 150 ?l DMSO, a do pomiaru absorbera przy 490 nm zastosowano Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA). Do obliczenia procentu żywotności komórek zastosowano następujący wzór (równanie (5)):
4.5. Toksyczność komórkowa liposomów CPhG na HSC
Komórki wysiano na 6-dołkowe płytki i zmierzono toksyczność HSC przy użyciu zestawu do wykrywania LDH. Komórki wysiano w gęstości 2 x 105 komórek/studzienkę na płytkach 6-studzienkowych w temperaturze 37 stopni w inkubatorze z 5% CO2. Po całonocnym wzroście komórki potraktowanoCPhGliposomy (29,45, 14,72 i 7,36 µg/ml). Równocześnie utrzymywano kontrolę ślepą (pożywka DEME). Po 24 godzinach komórki zebrano przez trypsynę i odwirowanie. Każdą grupę komórek podawano ściśle według instrukcji zestawu. Następnie obliczono szybkość wyciekania LDH płynu z hodowli komórkowej.
4.6. Analiza apoptozy
Komórki hodowano na 6-dołkowych płytkach z gęstością 2 x 105 komórek/dołek w temperaturze 37 stopni w inkubatorze z 5% CO2. Po całonocnym wzroście komórki potraktowanoCPhGliposomy (29,45, 14,72 i 7,36 ?g/ml), a następnie zmierzono apoptozę HSC przy użyciu zestawu FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit. Stężenia oparto na IC50 określonym w teście cytotoksyczności. Równocześnie utrzymywano kontrolę ślepą (pożywka DEME). Po 24 godzinach komórki zebrano przez trypsynę i odwirowanie, przemyto PBS i zawieszono w 500 ?l buforu wiążącego. Następnie komórki barwiono 5 ?l aneksyny V-FITC i 5 ?l PE. Komórki inkubowano w temperaturze pokojowej przez 30 min w ciemności i szybkość apoptozy mierzono stosując cytometr FACSCalibur (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA).
4.7. Analiza zatrzymania cyklu komórkowego
HSC (2 X 105 komórek/2 ml/studzienkę) traktowano przez 24 godzinyCPhGliposomy w 29,45, 14,72 i 7,36 µg/ml w płytkach 6-dołkowych. Równocześnie utrzymywano kontrolę ślepą (pożywka DEME). Komórki zebrano i przemyto 1 ml PBS i utrwalono 75 procentowym etanolem przez noc w 4 stopniach . Komórki następnie odwirowano i ponownie zawieszono w 500 roztworach buforu do barwienia jodek propidyny (PI)/RNaza w temperaturze 37 stopni przez 30 minut w ciemności. Na koniec komórki mierzono za pomocą cytometru FACSCalibur (Becton Dickinson). Proporcje komórek w fazach G0/G1, S i G2/M cyklu komórkowego analizowano za pomocą oprogramowania FACS Diva (Becton Dickinson).
4.8. EfektCPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche) Liposom na szlaku sygnalizacyjnym FAK i PI3K/Akt za pośrednictwem PDGF
4.8.1. Test proliferacji
Linie HSC (1 X 105 komórek/ml) wysiano na płytkach ze studzienkami 96- i pozostawiono do wzrostu przez noc w temperaturze 37 stopni w inkubatorze z 5% CO2. Po 24 godzinach hodowli komórkowej komórki podzielono losowo na pięć następujących grup: Ślepa kontrola (hodowana w DMEM zawierającym tylko 10% FBS), PDGF-BB (hodowana w DMEM zawierającym 50 µg/L PDGF-BB), aCPhGinterwencja liposomowa (stymulowana pożywką zawierającą 50 ?/ml PDGF-BB 24 h). Następnie komórki potraktowano 29,45, 14,72 i 7,36 µg/ml liposomów CPhG. Komórki hodowano w sposób ciągły przez 24 godz., 48 godz. i 72 godz. w inkubatorze w 37°C przez 4 godz. z 20 µl MTT (5 µg/ml w roztworze PBS). Fioletowy produkt MTT-formazan rozpuszczono w 150 µl DMSO i oszacowano przez pomiar absorbancji przy 490 nm w czytniku absorpcji widma Multiskan (Thermo Fisher Scientific, Inc.) i obliczono IC50. Próbki w czterech powtórzeniach badano dla każdego stężenia w czterech niezależnych eksperymentach. Poniższy wzór (równanie (6)) obliczył procent żywotności komórek:
4.8.2. Ilościowa reakcja łańcuchowa polimerazy w czasie rzeczywistym (qRT-PCR)
Komórki wysiano do płytek {{0}}dołkowych o gęstości 1 X 105 komórek/ml. Ta metoda grupowania jest taka sama jak poprzednia. Po 24 godzinach całkowity RNA wyekstrahowano z hodowanych komórek za pomocą odczynnika TRIzol. Stężenie i czystość RNA mierzono przy 260/280 nm przy użyciu spektrofotometru ultrafioletowego zgodnie ze standardowym stosunkiem OD260/OD280 wynoszącym 1.8-2.0. Reakcje odwrotnej transkrypcji poddano odwrotnej transkrypcji z RNA przy użyciu zestawu RevertAid First Strand cDNA Synthesis. Do pomiaru ekspresji genów zastosowano TB Green Premix Ex TaqTM II. qRT-PCR przeprowadzono przy użyciu systemu ABI QuantStudio™6 Flex Real-Time PCR (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Sekwencje starterów zostały zsyntetyzowane przez Sangon Biotech (Szanghaj, Chiny) (Tabela 4).
4.8.3. Analiza Western Blot
Całkowite białka wyekstrahowane z HSC w różnych grupach przygotowano jak opisano wcześniej. W skrócie, podobne białka rozdzielono za pomocą elektroforezy w 10% żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS-PAGE), a następnie przeniesiono na membrany z polifluorku winylidenu (PVDF) (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Badenia-Wirtembergia, Niemcy). Następnie membrany PVDF zablokowano w 3% BSA i inkubowano przez noc w 4°C z przeciwciałami pierwszorzędowymi. Następnego dnia dodano znakowane HRP kozie przeciwkrólicze IgG (rozcieńczenie 1:25,000; 1 godz.). Prążki białka wizualizowano za pomocą substratu Pierce™ ECL Western Blotting Substrate i obrazowano przy użyciu systemu obrazowania FluorChem E (Protein Simple, San Francisco, CA, USA), które znormalizowano za pomocą p-aktyny jako kontroli wewnętrznej.
4.8.4. Eksperymenty z nadekspresją FAK
Komórki podzielono na grupę kontrolną z normalnym podłożem, grupę stymulacji PDGF-BB, grupę stymulacji PDGF-BB plus X-3-FAK, grupę stymulacji PDGF-BB plus X-3-NC, grupę PDGF - Stymulacja BB plus X-3-FAK plusCPhGgrupa liposomów i stymulacja rrPDGF-BB plus X-3-NC plusCPhGgrupa liposomów. Linie HSC (1 x 105 komórek/ml) wysiano na płytkach ze studzienkami 6- i pozostawiono do wzrostu przez noc w 37°C w inkubatorze z 5% CO2. Następnego dnia dodano i hodowano komórki PDGF-BB (hodowane w DMEM zawierającej 50 µg/L PDGF-BB). Trzeciego dnia pEX-3-FAK i X-3-NC rozcieńczono w pożywce bez antybiotyków, dobrze wymieszano z lipofektaminą 2000 i pozostawiono w temperaturze 37◦C na 20 min przed dodaniem do każdej studzienki komórek w 37°C. Po inkubacji przez 5 godzin, pożywkę zawierającą 10% surowicy zastąpiono na 48 godzin, a piątego dnia pożywkę zastąpiono stężeniem 29,45 µg/ml liposomu CPhG na 24 godziny. Następnie każdy dołek zebrano w drugim, trzecim, piątym i szóstym dniu i wykryto ekspresję białek genów FAK, PI3K, Akt, p-PI3K i p-Akt.
4.9. Analiza statystyczna
Dane wyrażono jako średnie ± odchylenie standardowe (SD). Do analiz statystycznych zastosowano oprogramowanie SPSS 16.0 (IBM, Nowy Jork, NY, USA). Istotność różnicy obliczono jednokierunkowym testem ANOVA, a następnie testem LSD. Równanie rozpuszczania leku zostało dopasowane przez Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, USA).
5. Wnioski
Podsumowując, nasze wyniki pokazują, żeCPhG(glikozyd fenyloetanoidowy z cistanche) liposomy znacząco hamują aktywację HSC, znacznie osłabiając rozwój zwłóknienia wątroby poprzez zwiększenie apoptozy i regulację cyklu komórkowego w HSC. Hamowanie aktywacji szlaków sygnałowych FAK/PI3K/Akt może być podstawowym mechanizmem, dzięki któremuCPhGliposomy chronią przed przewlekłą chorobą wątroby związaną z włóknieniem. Odkrycia te dostarczają nowych informacji na temat mechanizmów tego nowego preparatu leku jako kandydata przeciwfibrogennego do przyszłego leczenia zwłóknienia wątroby. Mechanizmy leżące u podstaw są jednak bardziej złożone niż te opisane tutaj, a nasze wyniki nie wykluczają możliwego zaangażowania innych urządzeń spowodowanego przezCPhGliposomy do leczenia zwłóknienia wątroby.
Autorskie Wkłady:TL, JZ, S.-PY, LM i S.-LZ wymyślili i zaprojektowali eksperymenty. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM i X.-YY przeanalizowali dane. S.-LZ i JZ napisali manuskrypt. TL, LM i JZ przejrzeli manuskrypt. Wszyscy autorzy przeczytali i zatwierdzili ostateczny rękopis.
Finansowanie:Badania te zostały sfinansowane przez Chińską Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych, numer grantu 81560628.
Podziękowanie:Praca ta była wspierana finansowo przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych w Chinach (nr 8156140127). Autorzy pragną wyrazić szczere podziękowania Junowi Zhao i Xin Wangowi za udoskonalenie pisania tego artykułu.
Konflikt interesów:Autorzy nie zgłaszają deklaracji zainteresowania.
Bibliografia
1. Zhang, H.; Słońce, D.; Wang, G.; Cui, S.; Pole, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin łagodzi zwłóknienie wątroby poprzez supresję aktywowanej komórki gwiaździstej wątroby. Biochem. Biofizyka. Res. Komunia. 2019,511, 387-393. [Odn.]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Zwłóknienie wątroby: Patofizjologia, cele patogenetyczne i problemy kliniczne. Mol. Aspekty Med. 2019, 65, 37-55. [Odsyłacz] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Reparacyjne działanie nanoagregatów astaksantyny i hialuronianu przeciwko zwłóknieniu i martwicy wątroby wywołanemu przez retrorsynę-CCl(4). Cząsteczki 2018,23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Słońce, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla promuje aktywację komórek gwiaździstych wątroby indukowaną wysokim poziomem glukozy i PDGF poprzez indukcję autofagii przez szlak sygnalizacji CaMKKp/ERK. Toksykol. Łotysz. 2019, 300,1-9. [Odsyłacz] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Rola cytokin pochodzących z komórek gwiaździstych wątroby (HSC) w zapaleniu wątroby i odporności. Cytokina 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosaglikozydy fenyloetanoidowe indukują apoptozę w komórkach Eca-109 poprzez szlak zależny od mitochondriów. Płk. Łotysz. 2019,17, 303-313. [Odsyłacz] [PubMed]
7. Ty, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Glikozydy fenyloetanolowe zCistanche tubulosaTłumią aktywację komórek gwiaździstych wątroby i blokują przewodzenie szlaków sygnałowych w TGF-beta1/smad jako potencjalne środki przeciw zwłóknieniu wątroby. Cząsteczki 2016,21,102. [Odsyłacz] [PubMed]
8. Ty, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Profilaktyczne działanie glikozydów fenyloetanoidowych zCistanche tubulosana zwłóknienie wątroby wywołane albuminą surowicy bydlęcej u szczurów. DARU J. Pharm. Nauka. 2015, 23, 52. [Odsyłacz] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Skuteczność pułapki i absorpcja czterech rodzajów proliposomów. J. Xin Jiang Med. Uniw. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Bioadhezyjny system dostarczania leków i jego zastosowanie w tradycyjnej medycynie chińskiej. Podbródek. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Długi, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Pochodna nitroimidazolu zawierała liposomy do dostarczania leków wywołanego niedotlenieniem i zwiększoną skuteczność terapeutyczną w heteroprzeszczepach nowotworów pochodzących od pacjenta. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [Odsyłacz] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, HS; Zhang, Y.-S. Ukierunkowany na wątrobę liposomowy system dostarczania leków i postęp w jego badaniach nad chorobami wątroby. Światowy podbródek. J. Digest. 2016, 24 4238. [Odn.]
13. Zhou, BH; opalenizna, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, udział szlaku sygnałowego HW PI3K/AKT w apoptozie indukowanej fluorem w komórkach C2C12. Chemosfera 2018,199, 297-302. [Odsyłacz] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Echinakozyd stymuluje proliferację komórek i zapobiega apoptozie komórek w nabłonkowych komórkach jelitowych MODE-K poprzez regulację w górę ekspresji transformującego czynnika wzrostu-p1. J. Pharm. Nauka. 2012, 118, 99-108. [Odn.]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, MT; Tsai, F.-H.; Wang, WH; Wu, C.-R. Działanie antynocyceptywne i przeciwzapalne wywołane przezCistanche deserticolau gryzoni. J. Etnofarmakol. 2002, 83, 177-182. [Odn.]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, CM; Ho, T.-Y.; Wu, CM; Chen, WC; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaekstrakt zwiększa tworzenie kości w osteoblastach. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [Odsyłacz] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. EfektCistanches HerbaEkstrakt wodny na utratę kości u szczura po usunięciu jajników. wewn. J. Mol. Nauka. 2011, 12, 5060-5069. [Odn.]
18. Lu, M.-C. Badania nad uspokajającym działaniemCistanche deserticola.J. Etnofarmakol. 1998, 59, 161-165. [Odn.]
19. Cai, RL; Yang, MH; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Aktywność przeciwzmęczeniowa bogatego w fenyloetanoidy ekstraktu zCistanche deserticola. Fitoter. Res. 2010, 24, 313-315. [Odn.]
20. Geng, X.; Tian X.; Tu, P.; Pu, X. Neuroprotekcyjne działanie echinakozydu w mysim modelu MPTP choroby Parkinsona. Eur. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [Odn.]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Acylowane fenyloetanoidowe aminoglikozydy o działaniu hepatoprotekcyjnym z pustynnej rośliny Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [Odsyłacz] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, JS; Meng, L. Zapobieganie ekstraktowi z salsy Cistanche na zwłóknienie wątroby wywołane przez tetrachlorek węgla u szczurów. Podbródek. Ziołowy Med. 2013, 5199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Przygotowanie płynnych proliposome glikozydów fenyloetanoidowych Cistanche: Zoptymalizowany preparat, charakterystyka i prolipo niektóre kapiące pigułki in vitro i in vivo. Eur. J. Pharm. Nauka. 2016, 93, 224-232. [Odsyłacz] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymanna F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola R.; van Bloois, L.; Burza, G.; Kiessling, F.; Trautweina, C.; i in. Zwłóknienie wątroby wpływa na właściwości kierowania systemów dostarczania leków do podzbiorów makrofagów in vivo. Biomateriały 2019, 206, 49-60. [Odsyłacz] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Słońce, H.; Li, S.; Tak.; Galony, H. Projektowanie kompozycji i medyczne zastosowanie liposomów. Eur. J. Med. Chem. 2019,164, 640-653. [Odn.]
26. Paliwal S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofen załadowane etanolowymi cząstkami liposomów do zastosowań biomedycznych. J. Mikrobiol. Metody 2019,161, 18-27. [Odsyłacz] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Wpływ ładunku powierzchniowego na zależną od wielkości internalizację komórkową liposomów. Chem. Fiz. Lipidy 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Słońce, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; i in. Załadowane galanginą liposomy ukierunkowane na wątrobę: Optymalizacja i skuteczność hepatoprotekcyjna. J. Drug Deliv. Nauka. Technol. 2018, 46, 339-347. [Odn.]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Hepatic fibrosis: Nadszedł czas, aby przejść do celów terapeutycznych specyficznych dla komórek gwiaździstych wątroby. Zaburzenia wątroby i dróg żółciowych. wewn. 2018,17,192-197. [Odn.]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Brązowy, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller K.; Dzioby, DR; Abdollahi, A. Mechanizmy specyficzne dla komórek macierzystych zapewniają wierność genomową w HSC i po starzeniu się HSC. Rep. komórki 2015,13, 2412-2424. [Odn.]
31. Brea, R.; Ruch, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 indukuje apoptozę komórek gwiaździstych wątroby i łagodzi zwłóknienie wątroby u myszy poprzez regulację w dół miR-23a-5p i miR-28a-5p. Biochim. Biofizyka. Biofizyka Acta. W tym Fotosynteza. 2018,1864, 325-337. [Odsyłacz] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paweł F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; i in. Różnice w statusie cyklu komórkowego leżą u podstaw niejednorodności transkrypcyjnej w przedziale HSC. Rep. komórki 2018, 24, 766-780. [Odsyłacz] [PubMed]
33. El-Lakkany, Nowy Meksyk; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohamed, SH; Ezzata SM; Safar, MM; Saleh, S. Kwas rozmarynowy osłabia włóknienie wątroby poprzez tłumienie aktywacji/proliferacji komórek gwiaździstych wątroby i indukcję apoptozy. Azjatycki Pac. J. Tropa. Med. 2017,10, 444-453. [Odsyłacz] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Wpływ śródbłonkowych komórek progenitorowych na proliferację i funkcję biologiczną komórek gwiaździstych wątroby pod wpływem stresu ścinającego. Podbródek. J. Appl. Fizjol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Mamo, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Aktywowane komórki gwiaździste wątroby sprzyjają progresji resztkowego raka wątrobowokomórkowego po ogrzaniu od przeżycia autofagicznego do proliferacji. wewn. J. Hipertermia 2019, 36, 253-263. [Odsyłacz] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Śpiewane, KY; Choi, DH; Cho, EH Bursztyn indukuje fibrogenezę wątroby poprzez promowanie aktywacji, proliferacji i migracji oraz hamowanie apoptozy komórek gwiaździstych wątroby. Biochem. Biofizyka. Res. Komunia. 2018, 496, 673-678. [Odsyłacz] [PubMed]
37. Tsukada S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mechanizmy zwłóknienia wątroby. Clin. Szym. Akta 2006, 364, 33-60. [Odn.]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16一Mechanizmy zwłóknienia wątroby. W kompleksowej toksykologii, wyd. 3; McQueen, CA, wyd.; Elsevier: Oksford, Wielka Brytania, 2018; s. 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyena, CV; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Wzory ekspresji PDGF-A, -B, -C i -D oraz receptorów PDGF a i |3 w aktywowanych komórkach gwiaździstych wątroby szczura (HSC). Cytokina 2005, 31, 349-357. [Odn.]
