CZĘŚĆ DRUGA Glikozydy fenyloetanolowe chronią przerost mięśnia sercowego wywołany zwężeniem aorty brzusznej przez ECE 1 Hamowanie demetylacji i PI3K PKB Wzmocnienie ścieżki ENOS

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Kliknij tutaj, aby przejść do części pierwszej

W poprzednim badaniu stwierdziliśmy, że demetylacja ECE-1 działa na nadciśnienie i może mieć wpływ na produkcję ET-1 [13]. W związku z tym zastanawialiśmy się, czy CPhGs(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)wpłynie na poziom demetylacji ECE-1. Jak pokazano na rycinie 7, w porównaniu z grupą pozorowaną, poziom metylacji ECE-1 w tkance mięśnia sercowego był znacznie zwiększony w grupie AAC. W tym samym czasie została ona znacznie zmniejszona w grupach AC 125, 250 i 500 mg/kg w porównaniu z grupą AAC. -e poziom demetylacji genu ECE-1 w grupie AC 125 mg/kg był znacząco wyższy niż w grupie AV; nie było znaczącej różnicy w grupie AC 125 mg/kg, ale istotny spadek stwierdzono w grupie AC 500 mg/kg w porównaniu z grupą AV.

3.7. CPhG(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)Zmniejszono ekspresję ECE-1 w tkance mięśnia sercowego szczurów po AAC.

Aby lepiej zrozumieć wpływ metylacji ECE-1, wykryliśmy ekspresję mRNA, białka i immunohistochemii ECE-1 w tkance mięśnia sercowego. Jak pokazano na Figurze 8, w porównaniu z grupą pozorowaną, względne poziomy ekspresji mRNA ECE-1, względne poziomy ekspresji białka i średni obszar immunohistochemii mięśnia sercowego uległy znacznemu zmniejszeniu w grupie AAC. Figura 8(c) pokazuje, że w porównaniu z grupą AAC, względne poziomy ekspresji mRNA ECE-1 były znacznie zmniejszone w grupach AC 250 i 500 mg/kg; w porównaniu z grupą AV, były one istotnie wyższe w grupach AC 125 i 250 mg/kg, ale nie różniły się istotnie w grupie AC 500 mg/kg. Tymczasem, jak widać na Figurach 8(a) i 8(b), w porównaniu z grupą AAC, względne poziomy ekspresji białka ECE-1 były znacznie zmniejszone w grupie AC 250 i 500 mg/kg; jednakże nie różniły się one znacząco w grupie AC 250 i 500 mg/kg w porównaniu z grupą AV. Ryciny 8(d) i 8(e) wskazują, że w porównaniu z grupą AAC, obszar ekspresji ECE-1 w tkance mięśnia sercowego szczurów był znacznie zmniejszony w grupie AC 125, 250 i 500 mg/kg ; jednakże w porównaniu z grupą AV, był on znacząco wyższy w grupach AC 125 i 250 mg/kg i nie wykazywał znaczącej różnicy w grupach AC500 mg/kg.

3.8. CPhG(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)Zmniejszono poziom plazmowego ET-1 u szczurów po AAC.

Zmierzyliśmy również poziomy ET-1 w osoczu szczurów za pomocą testu ELISA, jak pokazano na Figurze 9, w porównaniu z grupą pozorowaną, poziomy ET-1 w osoczu w grupie AAC były znacznie zwiększone. W międzyczasie poziomy ET-1 w osoczu wykazywały tendencję wzrostową w grupie AC 125 mg/kg, ale nie wykazały znaczącej różnicy w grupach AC 250 i 500 mg/kg w porównaniu z tymi w grupie AV. 3.9. CPhG(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)Zwiększono ekspresję szlaku PI3K/PKB/eNOS u szczurów po AAC. PI3K/PKB/eNOS jest ważnym szlakiem w procesie przerostu mięśnia sercowego i ma istotny związek z ET-1 [14–16]. -dlatego ponadto wykryliśmy poziomy ekspresji białek szlaku PI3K/PKB/eNOS w tkance mięśnia sercowego szczura. Jak pokazano na rycinie 10, w porównaniu z grupą pozorowaną, krewnypoziomy ekspresji białek p-PI3K, p-PKB i p-eNOS w grupie AAC uległy znacznemu obniżeniu; jednakże w porównaniu z grupą AAC, względne poziomy ekspresji p-PI3K były znacznie zwiększone w grupach AC 250 i 500 mg/kg. W tym samym czasie, względne poziomy ekspresji wykazywały tendencję malejącą w grupie AC 125 mg/kg i nie wykazywały znaczącej różnicy w grupach AC 250 i 500 mg/kg w porównaniu z tymi w grupie AV. Jak pokazano na Figurze 10(b), w porównaniu z grupą AAC, względne poziomy ekspresji p-PKB były znacznie zwiększone w grupie AC 250 i 500 mg/kg. Tymczasem były one znacznie niższe w grupie AC 125 mg/kg i nie różniły się istotnie w grupach AC 250 i 500 mg/kg w porównaniu z grupą AV. Jak pokazano na Figurze 10(c), w porównaniu z grupą AAC, względne poziomy ekspresji p-eNOS znacznie wzrosły w grupach AC 125, 250 i 500 mg/kg; jednakże, w porównaniu z grupą AV, względne poziomy ekspresji wykazywały znacząco tendencję spadkową w grupach AC 125 i 250 mg/kg, ale nie wykazywały znaczącej różnicy w grupie AC 500 mg/kg.

KORZYŚĆ CISTANCHE

4. Dyskusja

W porównaniu z pacjentami z nadciśnieniem, osoby z nadciśnieniem i przerostem serca mają 6-8 razy większe prawdopodobieństwo ostrego zawału mięśnia sercowego, przewlekłej niewydolności serca, a nawet nagłej śmierci sercowej, co poważnie wpływa na leczenie i rokowanie nadciśnienia [23, 24] . W takich okolicznościach leczenie nadciśnienia nie powinno ograniczać się do kontroli ciśnienia krwi. W związku z tym na wielką troskę zasługuje również odwrócenie hipertrofii serca jako czynnika kluczowego. U pacjentów z przerostem serca synteza białek kardiomiocytów jest zwiększona w liczbie, powiększone, pogrubione w ścianach komórkowych, wraz z występowaniem większej ilości sarkomerów, proliferacji śródmiąższowych fifibroblastów i proliferacji kolagenu sercowego. Jednocześnie wzrasta również ekspresja markerów przerostu serca, takich jak mRNA ANP, BNP i -MHC [25–27]. Jako tradycyjna medycyna chińska do leczenia niepłodności kobiet i męskiej impotencji, łodygaCistanche tubulosazostał po raz pierwszy nagrany w Materia Medica Shen Nonga w ca. 100 pne i jest obecnie szeroko stosowany jako rodzaj zdrowej żywności na obszarze Azji Południowo-Wschodniej [28]. W ostatnich latach,Cistanche tubulosazwrócił uwagę środowiska medycznego ze względu na jego znaczną aktywność biologiczną. Jako tradycyjne zioło przeciwzmęczeniowe nie tylkoCistanche tubulosapełni funkcję ochronną mięśni, ale również jego ekstrakt może poprawić magazynowanie ATP i zmniejszyć uszkodzenia mięśni po wysiłku u szczurów [29]. Zgodnie z wynikami eksperymentów ex vivo, Cistanche tubulosa ma również działanie ochronne przed toksycznością mięśniową indukowaną przez statyny za pomocą szlaku kaspaz [30]. Ponadto naukowcy zbadali działanie farmakologiczne Cistanche tubulosa w ochronie układu sercowo-naczyniowego i innych aspektów i odkryli, żeCistanche tubulosamoże hamować wzrost glikemii na czczo i poposiłkowej, poprawiać insulinooporność i łagodzić dyslipidemię, a także hamować utratę masy ciała u myszy db/db [31].

Ekstrakt z Cistanche tubulosa

Poprzednie badania wykazały, że CPhGs(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)może zmniejszać uszkodzenia przez wolne rodniki błony mitochondrialnej mięśnia sercowego i sieci plazmowej, zmniejszać zawartość dialdehydu malonowego, zmniejszać uszkodzenia ultrastrukturalne mięśnia sercowego, zwiększać aktywność mitochondrialnego enzymu antyoksydacyjnego, zmniejszać rozmiar zawału mięśnia sercowego, poprawiać aktywność fosfokreatyny w tkance mięśnia sercowego i mieć działanie ochronne wpływ na niedokrwienie mięśnia sercowego [9, 10, 32]. Naszym celem było zbadanie wpływu CPhG na przerost serca wywołany przeciążeniem ciśnieniowym. W tym badaniu stwierdzono, że CPhG zmniejszyły poziomy LVPWT, LVED, HWI, AMC i genów przerostu serca (tj. ANP, BNP i -MHC), zwiększyły EF i FS, zahamowały przerost serca i poprawiły czynność serca u szczurów . Poza tym stan zapalny jest jednym z kluczowych fenotypów w patogenezie przerostu serca [33]. Niektórzy badacze odkryli, że usunięcie IL-6 może osłabiać przerost i dysfunkcję lewej komory wywołaną przeciążeniem ciśnieniowym [34]. Odkryliśmy, że CPhG mogą nie tylko obniżać poziom IL-6 w osoczu szczurów po AAC, ale także zmniejszać inne czynniki prozapalne, takie jak COX-1, IL-1 i TNF-. Ponadto CPhG mogą również redukować białko COX-2 i HMGB-1 związane ze stanem zapalnym. Efekty CPhG były zależne od dawki wraz ze wzrostem dawek leku. Ponadto warto wspomnieć, że wysoka dawka CPhGs wywierała istotny wpływ ochronny na przerośnięte szczury, podobny do działania grupy dodatniej walsartanu. -dlatego CPhG mogą być potencjalnym środkiem farmakologicznym hamującym przerost serca wywołany przeciążeniem ciśnieniowym. Metylacja DNA odnosi się do molekularnego procesu modyfikacji metylacji DNA, w którym S-adenozylo-L-metionina działa jako donor grupy metylowej w celu uzyskania grupy metylowej poprzez wiązanie kowalencyjne w ramach katalizy metylotransferaz DNA [35]. Powszechnie wiadomo, że ET-1 jest najsilniejszym środkiem zwężającym naczynia i może silnie uciskać tętnice rdzeniowe i rdzeniowe, powodując zmniejszenie natriurezy i wzrost ciśnienia krwi [36–38]. Będąc kluczowym enzymem na ostatnim etapie produkcji endoteliny, ECE- 1 nie tylko współistnieje z ET-1 w chorobach sercowo-naczyniowych, ale także może regulować produkcję ET-1. -us, ECE-1 może mieć zasadnicze znaczenie dla rozwoju i progresji choroby [39]. W doświadczeniach in vitro na komórkach śródbłonka naczyniowego, metylacja wyspy CpG w regionie promotora ECE-1c zmniejsza jego aktywność transkrypcyjną, co skutkuje zmniejszoną ekspresją ECE-1c, co dalej prowadzi do zmniejszonej produkcji ET -1 i obniżone ciśnienie krwi in vivo, a ta linia zmian sugeruje, że metylacja ECE-1 może być zaangażowana w patologię nadciśnienia [40, 41]. W naszym poprzednim badaniu stwierdziliśmy również zwiększoną demetylację ECE-1 u pacjentów z nadciśnieniem [35]. -e wyniki niniejszego badania wykazały, że CPhG znacząco zmniejszyły demetylację ECE-1, zmniejszyły mRNA i ekspresję białek ECE-1 oraz zmniejszyły poziomy ET-1 w osoczu w mięśniu sercowym szczurów z przeciążeniem ciśnieniowym wywołany przerostem serca po AAC. Nie wyjaśniono, czy CPhG wpływają na poziomy demetylacji ECE-1 i czy chronią przed przerostem serca u szczurów. PI3K jest ostatnim szlakiem przerostu kardiomiocytów od typu kurczliwego do hipertroficznego [42]. Obie izoformy PI3K mogą być zaangażowane w hipertrofię kardiomiocytów, w której Pll0 bierze udział w hipertrofii fizjologicznej, podczas gdy p110c w hipertrofii patologicznej. P110, po wygaszeniu u myszy, może chronić przed kardiomiopatycznymi bodźcami patologicznymi i odgrywa kluczową rolę w rozwoju i progresji przerostu kardiomiocytów [43]. PKB ma kluczowe znaczenie dla tego szlaku sygnałowego. Jego aktywacja może modulować funkcję molekularną poprzez aktywację lub hamowanie dalszych efektów lub cząsteczek poprzez fosforylację [44]. PI3K/PKB jest również kluczową ścieżką sygnalizacyjną stojącą za ET-1, a badania wykazały, że ET-1 może niezależnie indukować oporność fifibroblastów na apoptozę poprzez aktywację sygnalizacji PI3K/PKB [45].

Suplement Cistanche tubulosa

Inne badania wykazały, że ET-1 może regulować aktywność eNOS i uwalnianie NO przez receptor endoteliny B1 [46]. Jako ważny środek rozszerzający naczynia, NO może antagonizować zwężające naczynia działanie ET-1 na wielu poziomach i utrzymywać prawidłowe funkcjonowanie układu sercowo-naczyniowego [47]. W tym badaniu średnia i wysoka dawka CPhGs(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)grupy wykazały znaczny wzrost p-PI3K, p-PKB i p-ENOS. Jednak grupa otrzymująca wysokie dawki CPhG miała taki sam efekt jak grupa AV, co dodatkowo wykazało, że CPhG mogą hamować przerost mięśnia sercowego u szczurów po AAC poprzez aktywację szlaku sygnałowego PI3K/PKB/eNOS. Inne badania również wykazały związek między szlakiem PI3K/PKB a odpowiedziami zapalnymi [48, 49]. Zou i inni badacze stwierdzili, że w astmie geny związane z Brahmanem odgrywają zasadniczą rolę w utrzymywaniu zapalenia dróg oddechowych i wpływają na szlak PI3K/Akt/mTOR [50]. Ponadto CPhG zmniejszyły również ekspresję genów związanych ze stanem zapalnym w tkance mięśnia sercowego. -dlatego spekulowaliśmy, że CPhG mogą osłabiać odpowiedź zapalną u przeciążonych stresem szczurów poprzez zwiększenie szlaku sygnałowego PI3K/PKB/eNOS. Ogólnie rzecz biorąc, nasze badanie jest pierwszym, które wykazało ochronny wpływ CPhG na przerost serca wywołany przeciążeniem ciśnieniowym u szczurów po AAC, co może być związane z rolą, jaką odgrywają CPhG w skutecznym obniżaniu poziomu demetylacji ECE-1 i wzmacnianiu szlak PI3K/PKB. - to odkrycie dostarcza nowego pomysłu na badania kliniczne nad przerostem nadciśnienia tętniczego i opracowanie nowych leków terapeutycznych do zapobiegania, kontrolowania i odwracania przerostu nadciśnienia. Chociaż wciąż wiele kluczowych pytań czeka na odpowiedź, dalsze zrozumienie mechanizmów pośredniczących w odpowiedziach zapalnych przez CPhG i PI3K/PKB może rzucić nowe światło na badanie leczenia przerostu mięśnia sercowego w przyszłości.

5. Wnioski

Nasze wyniki wykazały, że CPhGs(GLIKOZYD FENYLOTANOWY Z CISTANCHE)złagodzony przerost mięśnia sercowego szczurów przez AAC, co może być związane z hamowaniem demetylacji ECE-1 i wzmocnieniem PI3K/PKB/eNOS

Suplement Cistanche tubulosa

Dostępność danych

Wszystkie dane zawarte w tym badaniu są dostępne na żądanie poprzez kontakt z odpowiednim autorem. Konflikty interesów - autorzy nie deklarują konfliktu interesów.

Wkład autorów

Shu-Ping You, Tao Liu, Jun Zhao i Qiong-Ling Fan wymyślili i zaprojektowali eksperymenty. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang i Shi-Lei Zhang pracowali nad metodologią. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang, Shi-Lei Zhang i Shu Ping Przeanalizowałeś dane. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang i Shi-Lei Zhang napisali manuskrypt. Shu-Ping You, Tao Liu i Jun Zhao przejrzeli rękopis. Wszyscy autorzy przeczytali i zatwierdzili ostateczny rękopis.

Podziękowanie

- praca została sfinansowana z dużego projektu Narodowego Laboratorium Kluczowego utworzonego wspólnie przez Prowincję i Ministerstwo Regionu Autonomicznego Sinkiang-Ujgur (SKLHIDCA-2018-3), Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych w Chinach (nr 8156140127) oraz z projektu młodzieżowego nauk przyrodniczych w instytucji szkolnictwa wyższego regionu autonomicznego Xinjiang-Ujgur (XJEDU2019Y027).

Bibliografia

[1] RE Katholi i DM Couri, „Przerost lewej komory: główny czynnik ryzyka u pacjentów z nadciśnieniem: aktualizacja i praktyczne zastosowania kliniczne”, International Journal of Hypertension, tom. 2011, artykuł nr 495349, 10 stron, 2011.

[2] ED Frohlich, „Przerost lewej komory: główny czynnik ryzyka u pacjentów z nadciśnieniem tętniczym rasy czarnej”, American Journal of Hypertension, tom. 27, nie. 1, s. 1-2, 2014.

[3] TM Okwuosa, EZ Soliman, F. Lopez, KA Williams, A. Alonso i KC Ferdinand, „Przewidywanie i reklasyfikacja ryzyka przerostu lewej komory i chorób sercowo-naczyniowych u osób rasy czarnej i białej: ryzyko miażdżycy w badaniach społeczności”, American Heart Dziennik, tom. 169, nie. 1, s. 155–161 e5, 2015.

[4] PM Okin, RB Devereux, KE Harris i wsp., „Ustąpienie lub brak elektrokardiograficznego przerostu lewej komory w trakcie leczenia jest związane ze zmniejszoną częstością występowania nowej cukrzycy u pacjentów z nadciśnieniem tętniczym: interwencja losartanu w celu zmniejszenia punktu końcowego w nadciśnieniu (ŻYCIE) badanie”, Nadciśnienie, tom. 50, nie. 5, s. 984–990, 2007.

[5] M. Salvetti, A. Paini, F. Bertacchini i wsp., „Zmiany w geometrii lewej komory podczas leczenia przeciwnadciśnieniowego”, Badania Farmakologiczne, tom. 134, s. 193-199, 2018.

[6] Y. Ye, H. Gong, X. Wang i wsp., „Leczenie skojarzone środkami przeciwnadciśnieniowymi wzmacnia wpływ qiliqiangxin na przerost serca wywołany przewlekłym przeciążeniem ciśnieniowym i przebudowę u samców myszy”, Journal of Cardiovascular Pharmacology, tom. 65, nie. 6, s. 628–639, 2015.

[7] C. Fu, J. Li, A. Aspire i wsp., „Glikozydy fenyloetanoidowe Cistanche tubulosa indukują apoptozę w komórkach Eca-109 poprzez szlak zależny od mitochondriów”, Oncology Letters, tom. 17, nie. 1, s. 303–313, 2018.

[8] SP You, L. Ma, J. Zhao, SL Zhang i T. Liu, „Glikozydy fenyloetanolowe z Cistanche tubulosa hamują aktywację komórek gwiaździstych wątroby i blokują przewodzenie szlaków sygnałowych w TGF- 11/smad jako potencjalne środki przeciw zwłóknieniu wątroby”, Molecules, tom. 21, nie. 1, s. 102, 2016.