Związek między surowicą Bcl-3, Gal{1}}, TGF{2}} a włóknieniem śródmiąższowym nerek u szczurów z przewlekłą chorobą nerek

Abstrakcyjny:

Cel: Zbadanie związku między surowicą indukowaną adeniną Bcl-3, Gal{2}}, TGF- 1 a nerkamizwłóknienia śródmiąższowego u szczurów z przewlekłą chorobą nerek. Metody Dwadzieścia samców szczurów klasy SPF podzielono losowo na grupę kontrolną (n{1}}) i grupę modelową (grupa CKD, n{2}}), a grupie modelowej podano adeninę przez zgłębnik, a grupę kontrolną podawano im równą objętość soli fizjologicznej przez zgłębnik, a szczury zabijano odpowiednio w 3 i 6 tygodniu, a krew pozostawiano w celu wykrycia azotu mocznikowego, kreatyniny i Bcl-3, Gal{6}} i nerek zmiany patologiczne obserwowano przez barwienie HE, nasilenie zwłóknienia śródmiąższowego przez barwienie Massona i ekspresję białka -SMA w tkankach nerek przez barwienie immunohistochemiczne. W porównaniu z grupą kontrolną poziom mocznika we krwiazot,kreatynina, Bcl{0}}, Gal-3 i TGF- 1 były istotnie wyższe w grupie z przewlekłą chorobą nerek we wszystkich punktach czasowych (P <{5}}.0 5). Względna powierzchnia śródmiąższowych włókien kolagenowych w grupie z przewlekłą chorobą nerek była istotnie wyższa niż w grupie kontrolnej (P <{16}},05). Analiza korelacji wykazała dodatnią korelację między poziomami Bcl-3, Gal{8}}, TGF{9}} we krwi a względnym obszarem zwłóknienia śródmiąższowego nerek (rs=0,776, P < 0,001 ; rs=0, 0,58, P < 0,001; rs=0, 52, P=0, 001).

Wnioski Poziomy Bcl-3, Gal{1}} i TGF{2}} w surowicy były istotnie podwyższone u szczurów z modelem CKD indukowanym adeniną i były ściśle skorelowane z ciężkościązwłóknienie nerek, który ma być nowym biomarkerem do ocenyzwłóknienie nerek.

Słowa kluczowe:przewlekłą chorobę nerek; zwłóknienie śródmiąższowe; Bcl-3; Gal-3; TGF{2}}

Kliknij tutaj, aby uzyskać więcej informacji o leczeniu CistanchePrzewlekłą chorobę nerek

Przewlekłą chorobę nerek(CKD) jest ogólnoświatowym problemem społecznym, a jej rozpowszechnienie wzrasta z każdym rokiem [1].Przewlekłą chorobę nerek(CKD) jest ogólnoświatowym problemem społecznym, a jej rozpowszechnienie wzrasta z roku na rok [1]. Natomiast migotanie nerek jest główną patologią progresji CKD do stadium schyłkowego. Przewlekła choroba nerek jest główną zmianą patologiczną i wspólną dla wszystkich rodzajów PChN drogą prowadzącą do stadium końcowego. Nasilenie zwłóknienia nerek jest ściśle związane z wyborem leczenia i rokowaniem pacjentów. Dlatego bardzo ważna jest dokładna ocena stopnia zwłóknienia nerek [2]. Dlatego też dokładna ocena stopnia zwłóknienia nerek ma ogromne znaczenie [2]. Biopsja nerki jest złotym standardem w diagnostyce zwłóknienia nerek i umożliwia dokładne i wizualne zrozumienie patologicznych zmian w nerkach oraz określenie stopnia zwłóknienia nerek. Jest to jednak metoda inwazyjna i ma pewne ograniczenia we wdrażaniu. B USG, CT, MRI i inne nieinwazyjne metody mogą być stosowane w pewnym stopniu do określenia zwłóknienia nerek. Jednak te testy mogą tylko pośrednio odzwierciedlać zwłóknienie nerek poprzez anatomiczne zmiany w nerkach. Jednak badania te mogą jedynie pośrednio odzwierciedlać zwłóknienie nerek poprzez zmiany anatomiczne w nerce, a wykrycie i ocena stopnia jego nasilenia na wczesnym etapie jest trudne [3]. Jednak badania te mogą jedynie pośrednio odzwierciedlać zwłóknienie nerek poprzez zmiany anatomiczne w nerce, co utrudnia wczesne wykrycie i określenie stopnia jego nasilenia [3]. Natomiast biomarkery mogą oceniać lub mierzyć ilościowo zarówno biologiczne, jak i patologiczne procesy choroby. biomarkery mogą oceniać lub określać ilościowo biologiczne i patologiczne procesy choroby, a także służyć jako cele terapeutyczne dla choroby [4]. Biomarkery mogą oceniać lub określać ilościowo biologiczne i patologiczne procesy choroby, a także służyć jako cele terapeutyczne dla choroby [4]. Zidentyfikowano kilka biomarkerów do diagnozowania zwłóknienia nerek. Jednak nie ma powszechnie akceptowanego markera do określania zwłóknienia nerek. Dlatego ważne jest badanie i poszukiwanie cennych biomarkerów.

Bcelllymphoma3 (Bcl-3), Bcl-3 u szczurów i Bcl-3 u szczurów zostały zidentyfikowane jako najważniejsze biomarkery w diagnostyce zwłóknienia nerek. Bcl-3 (Bcl-3) i galektyna-3 (Gal-3) są obiecującymi potencjalnymi markerami nerkowymi w ostatnich latach. lat, ale ich wartość Jednak jego wartość wymaga dalszych badań. W tym badaniu naszym celem było ustanowienie szczurzego modelu PChN wywołanej adeniną i zbadanie wartości galektyny 3. W tym badaniu stworzyliśmy szczurzy model PChN wywołanej adeniną i zmierzyliśmy poziom Bcl-3 w surowicy, Gal -3, czynnik transgeniczny 1 i inne biomarkery u szczurów. Celem tego badania było stworzenie szczurzego modelu PChN indukowanej adeniną i zmierzenie poziomów w surowicy Bcl-3, Gal-3, transformującego czynnika wzrostu- 1 (TGF{{16 }}) i TGF- 1.

(TGF{0}}) i analizować ich związek ze zwłóknieniem śródmiąższowym nerek, aby zbadać, czy mogą być podstawą do określenia zwłóknienia nerek. Poziomy TGF{1}}, Gal{2}} i TGF{3}} analizowano w celu określenia, czy mogą one być nowymi biomarkerami zwłóknienia nerek.

1 Materiały i metody

1.1 Zwierzęta doświadczalne

Dwadzieścia samców szczurów SD klasy SPF, o masie ciała (200 ± 10) g, w wieku 8 tygodni, zakupiono z Experimental Animal Center of Southwest Medical University [SCXK (Chuan) 2018-17]. Szczury trzymano i zbierano w pomieszczeniu dla zwierząt Centrum Badań Medycyny Integracyjnej Afiliowanego Szpitala Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Southwest Medical University [SYXK (Chuan) 2018-065]. Eksperyment był zgodny z zasadą „3R” humanitarnej opieki. Komisja etyki zwierząt doświadczalnych z Southwest Medical University zatwierdziła badanie (swmu20220018).

1.2 Główne instrumenty i odczynniki

Adenina (Sigma, USA); Zestaw Gal-3 ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Chiny), zestaw Rat TGF- 1 ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co.

Ltd., Chiny), szczur Bcl-3 zestaw ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Chiny); roztwór barwiący Masson (Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd., Chiny); -przeciwciało SMA (Wuhan PhD Bioengineering Co., Ltd., Chiny); wirówka do szybkiego zamrażania (Eppendorf Co. Ltd.

Ltd., Niemcy); automatyczny analizator biochemiczny (Siemens, Niemcy); mikroskop parafinowy (Thermo, USA); mikroskop świetlny (Nikon, Japonia); instrument do standaryzacji enzymów (Rayto, RT-6100).

1.3 Metody eksperymentalne

1.3.1 Eksperymentalne grupowanie i przygotowanie modelu Dwadzieścia samców szczurów SD klasy SPF podzielono losowo na grupy kontrolne (n {4}}) i modelowe (CKD, n {5}}) po 1 tygodniu żywienia adaptacyjnego. Adeninę rozpuszczono w wodzie destylowanej, uzyskując 2,5% zawiesinę. 250 mg/(kg-d) zawiesiny adeniny podawano zgłębnikiem grupie z CKD regularnie od 1 do 4 tygodnia, a 125 mg/(kg-d) zawiesiny adeniny podawano grupie kontrolnej od 5 do 4 tygodnia szósty tydzień; grupie kontrolnej podawano taką samą objętość solanki przez zgłębnik i obie grupy karmiono normalną karmą. Wszystkie szczury były karmione i pojone swobodnie, z połową światła i połową ciemności, a temperatura pokojowa wynosiła 18 stopni -25 stopni.

1.3.2 Pobieranie próbek

Szczury uśmiercono odpowiednio pod koniec 3 i 6 tygodnia i pobrano krew z aorty brzusznej; tkanki nerki utrwalono w 10% obojętnym roztworze formaliny i wykonano skrawki parafinowe, a pozostałą część tkanek nerki zamrożono i przechowywano w 80 stopniach. Inną część tkanki nerki zamrożono i przechowywano w lodówce w temperaturze 80 stopni.

1.3.3 Wskaźniki azotu mocznikowego we krwi, kreatyniny, Bcl-3, Gal-3 i TGF- 1

Czynność nerek szczurów mierzono za pomocą w pełni automatycznego analizatora biochemicznego. Do oznaczenia Bcl-3, Gal-3 i TGF{3}} w surowicy zastosowano test immunologiczny ELISA. Ilości Bcl-3, Gal-3 i TGF- 1 określono metodą ELISA. Wszystkie zestawy zakupiono od Jiangsu Enzyme Free Industrial Co. Wszystkie zestawy zakupiono od Jiangsu Enzyme Free Industrial Co.

1.3.4 Tkanka nerki Barwienie HE Utrwalone tkanki nerki odwodniono, zatopiono, pocięto na skrawki i odwoskowano.

Utrwalone tkanki nerki odwodniono, zatopiono, pocięto na skrawki i odwoskowano do wody

Tabela 1 Porównanie funkcji nerek między dwiema grupami szczurów (&x±s)

2.2 Porównanie poziomów Bcl-3, Gal{3}} i TGF{4}} w surowicy pomiędzy dwiema grupami W porównaniu z grupą kontrolną, poziom Bcl-3, Gal{6}} we krwi i TGF- 1 w grupie z przewlekłą chorobą nerek były wyższe niż w grupie kontrolnej. W porównaniu z grupą kontrolną poziomy Bcl-3, Gal-3 i TGF{{1{11}}}} we krwi były istotnie wyższe w grupie z przewlekłą chorobą nerek we wszystkich punktach czasowych (P <{14 }}.05). Poziomy TGF- 1 były istotnie wyższe w grupie z przewlekłą chorobą nerek (P < 0,05); w grupie z przewlekłą chorobą nerek poziomy Bcl-3 3były znacząco wyższe po 6 tygodniach w porównaniu z 3 tygodniami w grupie z przewlekłą chorobą nerek (p < 0,05). Patrz rysunek 1

2.3 Barwienie HE tkanek nerki w dwóch grupach Nie było oczywistych zmian patologicznych w tkankach nerki grupy kontrolnej w każdym punkcie czasowym, podczas gdy tkanki nerki grupy CKD były widoczne w każdym punkcie czasowym. Nie było oczywistych zmian patologicznych w tkankach nerki grupy kontrolnej w każdym punkcie czasowym, podczas gdy w grupie z CKD komórki nabłonka nerki w grupie z CKD wykazywały martwicę zwyrodnieniową, poszerzenie, proliferację śródmiąższowej tkanki włóknistej i naciek komórek zapalnych. Zmiany były bardziej oczywiste w tygodniu 6 niż w tygodniu 3, patrz Rycina 2

2.4 Barwienie metodą Massona tkanek nerkowych i wskaźniki migotania śródmiąższowego u dwóch grup szczurów Śródmiąższowe szczury z grupy kontrolnej pod koniec trzeciego i szóstego tygodnia Nie zaobserwowano wyraźnego odkładania się włókien kolagenowych w śródmiąższu szczurów kontrolnych pod 3 i 6 tydzień. Wzrost odkładania się włókien kolagenowych w tkance śródmiąższowej szczurów z CKD pod koniec 6. tygodnia w porównaniu z końcem 3. . Względna powierzchnia śródmiąższowych włókien kolagenowych w grupie z przewlekłą chorobą nerek była również znacznie wyższa niż w grupie kontrolnej i była wyższa pod koniec 6. tygodnia niż pod koniec 3. tygodnia (P <{10} }.05). (P < 0,05). Patrz rysunek 3.

Rycina 3 Wyniki barwienia metodą Masson i względna ocena powierzchni włókien kolagenowych w śródmiąższu nerki