Szybkie i samoistne usuwanie Plasmodium falciparum po porodzie jest związane z wydalaniem łożyska

Parazytemia wśród kobiet w ciąży z ochronną odpornością na malarię Plasmodium falciparum jest często zdominowana przez zakażone erytrocyty (IE) VAR2CSA-dodatnie. VAR2CSA pośredniczy w sekwestracji IE w łożysku. Postawiliśmy hipotezę, że wcześniej obserwowany spontaniczny poporodowy klirens parazytemii u takich kobiet jest związany z wydaleniem łożyska, co usuwa ognisko sekwestracji IE dodatnich pod względem VAR2CSA. Oceniliśmy parazytemie i transkrypcję genów przed i krótko po porodzie u 17 kobiet z Ghany. Gwałtownemu spadkowi parazytemii poporodowej towarzyszyła selektywna redukcja transkrypcji genu kodującego VAR2CSA. Nasze odkrycia dostarczają mechanistycznego wyjaśnienia wcześniejszej obserwacji.

Plasmodium falciparum malaria, choroba przenoszona przez ukąszenia komarów, jest poważnym problemem zdrowia publicznego na całym świecie. Odporność odgrywa kluczową rolę w malarii Plasmodium falciparum. Podczas infekcji Plasmodium falciparum odporność pomaga organizmowi bronić się przed patogenem i zwiększa odporność organizmu na niego.

Malarię wywołuje Plasmodium falciparum. Patogen zwykle namnaża się w organizmie gospodarza, prowadząc do zmniejszenia liczby czerwonych krwinek we krwi, co obniża odporność organizmu. Odporność organizmu odgrywa bardzo ważną rolę w malarii P. falciparum, ponieważ może pomóc organizmowi oprzeć się inwazji P. falciparum i poprawić odporność na P. falciparum.

Wzmocnienie odporności można osiągnąć poprzez poprawę stylu życia i nawyków żywieniowych. Na przykład dodanie do diety pokarmów bogatych w przeciwutleniacze, takie jak witaminy C i E oraz celuloza, może zwiększyć odporność organizmu. Dodatkowo regularne ćwiczenia i dobry sen mogą również pomóc wzmocnić układ odpornościowy.

Ogólnie rzecz biorąc, odporność odgrywa kluczową rolę w malarii wywołanej przez P. falciparum. Poprawiając styl życia i nawyki żywieniowe, możesz wzmocnić odporność organizmu, co może pomóc w obronie przed inwazją Plasmodium falciparum i zwiększyć odporność na patogeny. Z tego punktu widzenia musimy poprawić odporność. Cistanche może znacznie poprawić odporność, ponieważ polisacharydy w mięsie mogą regulować odpowiedź immunologiczną ludzkiego układu odpornościowego, poprawiać odporność komórek odpornościowych na stres i wzmacniać działanie bakteriobójcze komórek odpornościowych.

Kliknij zalety Cistanche Tubulosa

Słowa kluczowe.

nabyta odporność; VAR2CSA; pfEMP1; malaria łożyskowa; Plasmodium falciparum; ciąża; geny var; odporność specyficzna dla wariantu.

Mieszkańcy obszarów ze stabilną transmisją pasożytów Plasmodium falciparum nabywają w dzieciństwie znaczną odporność ochronną na malarię, omówiono w piśmiennictwie [1]. Białko błonowe 1 erytrocytów P. falciparum (PfEMP1) to rodzina antygenów pasożytów, kodowanych przez około 60 genów var na genom, pośredniczących w sekwestracji dojrzałych zakażonych erytrocytów (IE) do receptorów naczyniowych gospodarza, omówionych w literaturze [2]. Pomimo znaczenia PfEMP1 w nabytej odporności ochronnej, kobiety na takich obszarach stają się jednak bardzo podatne na malarię podczas ciąży. Wiąże się to z infekcjami pasożytami wykazującymi ekspresję PfEMP1 typu VAR2CSA, co prowadzi do gromadzenia się IE w przestrzeni międzykosmkowej, powodując malarię łożyskową [2, 3].

VAR2CSA pośredniczy w adhezji IE do niskosiarczanowego siarczanu chondroityny (CSA), receptora gospodarza, który normalnie jest ograniczony do łożyska [4]. Specyficzna dla receptora sekwestracja IE jest ważną strategią przeżycia pasożyta, ponieważ zapobiega zniszczeniu śledziony dojrzałych IE [2]. IE z dodatnim wynikiem VAR2CSA mają zatem ogromne niekorzystne warunki przeżycia u nieciężarnych gospodarzy, a swoista dla VAR2CSA immunoglobulina G (IgG) nie jest nabywana przed pierwszą ciążą [2, 3]. Wyjaśnia to wysoką podatność kobiet w ciąży (a zwłaszcza pierworodnych) na malarię P. falciparum, nawet na obszarach o stabilnej transmisji pasożytów, gdzie znaczna odporność ochronna jest nabywana na długo przed osiągnięciem wieku rozrodczego [3]. Zakażenia P. falciparum u kobiet w ciąży są rzeczywiście często zdominowane przez pasożyty wykazujące ekspresję VAR2CSA [5], chociaż powszechnie spotykane są również pasożyty wykazujące ekspresję innych typów PfEMP1 (i przypuszczalnie sekwestrujące poza łożyskiem) [6]. Na tej podstawie proponujemy zdefiniowanie 2 zasadniczo różnych typów malarii u kobiet w ciąży. Jednym z nich jest malaria łożyskowa, wywoływana przez pasożyty wykazujące ekspresję VAR2CSA, która występuje głównie u kobiet z niskim porodem bez znacznej odporności ochronnej swoistej dla VAR2CSA. Drugim typem jest malaria wywołana przez pasożyty wykazujące ekspresję innych typów PfEMP1, w przypadku których IE są sekwestrowane w tkankach innych niż łożysko. Ten ostatni typ nie jest ograniczony do kobiet w ciąży i może wystąpić u kobiet z dowolnym porodem. Po prostu odzwierciedla ogólnie luki w odporności specyficznej dla wariantu (głównie PfEMP1) [7].

Mając to na uwadze, postawiliśmy hipotezę, że wcześniejsze doniesienia o samoistnym ustąpieniu parazytemii P. falciparum u ciężarnych kobiet w Afryce w ciągu kilku dni od porodu [8, 9] odzwierciedlają nagłe zanikanie ogniska sekwestracji IE dodatnich pod względem VAR2CSA jako łożysko zostaje wydalone podczas porodu.

METODY

Miejsce badania i uczestnicy

Badanie przeprowadzono w 5 placówkach służby zdrowia (Abura Dunkwa, Biriwa, Mankessim, Moree i Saltpond) w Centralnym Regionie Ghany. Transmisja P. falciparum na badanym obszarze jest stabilna, ale ze znaczną zmiennością sezonową.

Kobiety w bliskiej ciąży, które wyraziły pisemną zgodę na udział w badaniu po otrzymaniu ustnej i pisemnej informacji o jego celach, były rekrutowane w okresie od listopada 2020 r. do lutego 2021 r. Z udziału wykluczono kobiety z jakimikolwiek powikłaniami ciąży. Chociaż większość kobiet otrzymywała przerywane leczenie profilaktyczne w ramach obecnej polityki opieki przedporodowej w Ghanie (tabela uzupełniająca 1), żadna z nich nie otrzymała żadnej formy leczenia przeciwmalarycznego na czas trwania badania (tj. o ich udziale kilka dni później). Badanie zostało zatwierdzone przez instytucjonalną komisję rewizyjną w Noguchi Memorial Institute for Medical Research (NMIMR-IRB CPN 005/{6}}) oraz przez komisję ds. etyki badań Ghana Health Service (GHS-ERC 005/08/20).

Wykrywanie i ocena ilościowa zakażenia P. falciparum

Infekcję pasożytami P. falciparum określono za pomocą szybkiego testu diagnostycznego, mikroskopii rozmazów krwi barwionych metodą Giemsy oraz ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy (qPCR), zasadniczo zgodnie z wcześniejszym opisem [10, 11], przy użyciu pobranych próbek krwi obwodowej. DNA wyekstrahowane z sześciokrotnych 10- rozcieńczeń hodowli in vitro P. falciparum IT4 w stadium pierścienia przy 1% parazytemii zastosowano do ustalenia krzywej standardowej, aby umożliwić ilościową ocenę parazytemii metodą qPCR.

Analiza transkrypcji genu var

Parasite RNA was preserved in the field and used for quantification of var gene transcript levels essentially as described [11, 12], but using universal 1-step reverse transcription-qPCR (RT-qPCR) kits (E3005X, NEB Inc), a Quant Studio 5 thermal cycler system and fructose-bisphosphate aldolase as endogenous control. Data points were not considered if the cycle threshold (Ct) value for the endogenous control was >30 and/or if the Tm for the var gene amplicon for each pair of primers diverged >2 stopnie od oczekiwanej wartości. Obfitość transkryptu obliczono przy użyciu 2- ΔCt, gdzie średnia ΔCt=średnia para starterów Ctvar - średnia kontrola Ctendogenna.

Analiza statystyczna

Powiązania między transkrypcją var2csa a zmiennymi klinicznymi testowano za pomocą korelacji rang Spearmana z poprawką dla wielu testów. Korelację między parazytemią wykrytą pod mikroskopem i metodą PCR oceniano za pomocą testu korelacji iloczynu Pearsona. Dane uzyskane w różnych punktach czasowych porównano odpowiednio za pomocą analizy wariancji z powtarzanymi pomiarami (RM-ANOVA) lub RM-ANOVA na rangach (RM-ANOVA-R), a następnie przeprowadzono testy post hoc dla różnic w parach. Do analizy danych i wartości P zastosowano oprogramowanie SigmaPlot w wersji 14 (Systat Inc).<.05 were considered significant.

WYNIKI

Uczestnicy badania

W sumie 377 kobiet, które wyraziły zgodę, zostało przebadanych pod kątem zakażenia P. falciparum podczas porodu. Spośród nich 15 (4,{3}} procent) było pasożytopozytywnych w badaniu mikroskopowym rozmazu krwi pobranej z palca obwodowego, 24 (6,4 procent) w szybkim teście diagnostycznym i 50 (13,3 procent) w badaniu PCR. Na podstawie tych wyników włączono 17 kobiet z pozytywnym wynikiem szybkiego testu diagnostycznego i wybrano je do obserwacji 8–16 godzin po porodzie, 24–48 godzin po porodzie i 48–72 godzin po porodzie. Informacje kliniczne uczestników badania podsumowano w tabeli uzupełniającej 1. Nie było statystycznie istotnych powiązań między odsetkiem pasożytów transkrybujących var2csa a żadną z wymienionych zmiennych klinicznych.

Poporodowe usuwanie parazytemii

W momencie porodu wszyscy uczestnicy badania byli pasożytami na podstawie rozmazu krwi i / lub qPCR (tabela uzupełniająca 1). W ciągu 8 do 16 godzin po porodzie wykrywalna mikroskopowo parazytemia zmniejszyła się samoistnie (tj. bez interwencji terapeutycznej) u 14/17 kobiet (ryc. 1A). W ciągu 24–48 godzin po porodzie liczba parazytemii zmniejszyła się i u większości kobiet była bardzo mała lub niewykrywalna (P=0,03 w porównaniu z przedporodem, Friedman RM-ANOVA-R). Kolejne 24 godziny później wszystkie kobiety z wyjątkiem 1 nie miały wykrywalnej parazytemii (P=0,005 w porównaniu z grupą przed porodem, RM-ANOVA-R). Jeśli chodzi o parazytemie wykrywane metodą PCR (ryc. 1B), parazytemie poporodowe były znacznie niższe o 24–48 godzin i 48–72 godzin niż przed porodem (P < 0,001, RM-ANOVA-R). Poziomy były również znacząco niższe w 48-72 godziny po porodzie niż w 8-16 godzin po porodzie (P < 0,001, RM-ANOVA-R). Parazytemie oszacowane za pomocą mikroskopii i qPCR były istotnie skorelowane (P < 0,001). Dane te potwierdzają wcześniejsze doniesienia o szybkim i samoistnym ustąpieniu poporodowym parazytemii P. falciparum wśród kobiet mieszkających na terenach o stabilnej transmisji tego pasożyta [8, 9].

Pasożytnicza transkrypcja genów var

To identify the likely sequestration focus of the IEs detected, we measured parasite transcription of the PfEMP1-encoding var gene groups. Before delivery, var2csa, which encodes VAR2CSA-type PfEMP1 mediating placental IE sequestration [2, 3], was the primary transcript (up to >90 procent całkowitej transkrypcji var) u 9/17 kobiet, a transkrypcję var2csa można było wykryć u wszystkich (ryc. 2 i ryc. uzupełniająca 1). Transkrypcja genów var, które nie są związane z malarią łożyskową, została wykryta (oprócz var2csa) w okresie przedporodowym wszystkich uczestniczek i dominowała u niektórych kobiet, na podstawie wcześniejszych obserwacji [6].

Odsetek transkryptów var2csa zmniejszył się podczas obserwacji poporodowej u wszystkich kobiet (ryc. 2 i ryc. uzupełniająca 1), równolegle ze spadkiem parazytemii (ryc. 1). Nastąpiło zatem wyraźne przesunięcie od transkrypcji var2csa przed porodem do transkrypcji innych genów var po porodzie. Jedynymi wyjątkami (wśród tych kobiet, dla których dostępne były dane dotyczące transkrypcji poporodowej), byli uczestnicy B213, S003, S001 i B201 (rysunek uzupełniający 1). Jednak w oparciu o obserwację, że parazytemie poporodowe również znacznie spadły wśród tych kobiet (ryc. 1), uważamy za prawdopodobne, że odpowiednie odejście od transkrypcji var2csa byłoby widoczne, gdyby dostępne były dane z późniejszych punktów czasowych. Ogólnie rzecz biorąc, dane są w pełni zgodne z selektywnym zanikaniem IE dodatnich pod względem VAR2CSA, zgodnie z naszą hipotezą.

DYSKUSJA

PfEMP1 to rodzina białek eksportowanych przez wewnątrzerytrocytarne pasożyty P. falciparum na powierzchnię IE, gdzie działają jako ligandy adhezyjne dla różnych receptorów naczyniowych gospodarza [2]. Te ligandy są kodowane przez klonalną odmianę rodziny genów var z około 60 członkami na haploidalny genom pasożyta. Geny są transkrybowane i tłumaczone w sposób wzajemnie się wykluczający, co gwarantuje, że tylko jeden PfEMP1 jest wyrażany na powierzchni IE w danym momencie. Jednak każdy pasożyt ma potencjał do przełączania się między różnymi genami var, umożliwiając zmiany specyficzności adhezji IE i właściwości antygenowych [2].

Białka PfEMP1 można pogrupować i podzielić na podgrupy zgodnie z zestawem kryteriów strukturalnych, które wpływają na ich cechy funkcjonalne [2]. Zatem grupa A PfEMP1 (kodowana przez około tuzin genów var na genom) pośredniczy w adhezji IE do receptorów gospodarza, takich jak EPCR i ICAM{3}} i jest zaangażowana w patogenezę ciężkiej malarii dziecięcej w ogóle i malarii mózgowej w szczególnie [2]. Natomiast transkrypcja genów należących do grup B i C wydaje się być związana z niepowikłaną malarią i bezobjawowymi infekcjami. Wreszcie, PfEMP1 typu VAR2CSA, kodowany przez tylko jeden lub kilka genów var2csa na genom pasożyta, jest funkcjonalnie i antygenowo całkowicie odmienny od wszystkich innych PfEMP1 i jest silnie zaangażowany w patogenezę malarii łożyskowej, jak również w nabytą odporność [2, 3, 13].

Ponadto większość dostępnych dowodów wskazuje na VAR2CSA jako główny i prawdopodobnie jedyny działający w dobrej wierze ligand CSA. Wreszcie, wcześniej wykazano, że parazytemia obwodowa u kobiet w ciąży narażonych na P. falciparum przez całe życie obejmuje IE, które są VAR2CSA-dodatnie i mają ogólny charakterystyczny fenotyp infekcji P. falciparum w łożysku [5, 13– 15]. Na tej podstawie wysunęliśmy hipotezę, że najbardziej przekonującym wyjaśnieniem spontanicznego ustępowania parazytemii u kobiet w ciąży w ciągu kilku dni po porodzie [8, 9] jest selektywne niszczenie śledziony IE VAR2CSA-dodatnich po wydaleniu łożyska podczas porodu, co skutecznie usuwa ich pokrewny receptor adhezyjny.

Przedstawione tu wyniki potwierdzają wcześniej zgłaszane [8, 9] szybkie eliminowanie poporodowe parazytemii obwodowej P. falciparum (ryc. 1). Ponadto potwierdzają obserwacje, że parazytemia obwodowa u afrykańskich kobiet w ciąży obejmuje i jest często zdominowana przez pasożyty transkrybujące var {3}} CSA [6, 15] (ryc. 2 i ryc. uzupełniająca 1). Co najważniejsze jednak, nasze dane rozszerzają te wcześniejsze obserwacje, dostarczając po raz pierwszy przekonujących dowodów na mechanistyczne wyjaśnienie szybkiego usuwania pasożytów obwodowych po porodzie u kobiet z naturalnie nabytą odpornością na malarię wywołaną przez P. falciparum. Oprócz bardzo niewielkiej liczbowo i jedynie granicznej istotnej różnicy w transkrypcji grupy var A1 (Rysunek uzupełniający 2), jedyną istotną i statystycznie istotną zmianą w transkrypcji genów var po porodzie była zmniejszona względna transkrypcja var2csa (Rysunek 2B i Uzupełniający Rysunek 2).

Nasze badanie ma ograniczenia. Wielkość próbki jest niewielka. Wynika to głównie z pomyślnego wdrożenia przerywanego leczenia zapobiegawczego malarii u kobiet w ciąży, co sprawiło, że malaria łożyskowa stała się znacznie mniej rozpowszechniona i wymagała badań przesiewowych wielu kobiet w celu znalezienia kwalifikujących się uczestników. Ponadto ograniczone wyposażenie w naszym ośrodku badawczym uniemożliwiło bezpośrednią ocenę specyficzności receptora adhezyjnego zebranych IE lub ich fenotypu immunologicznego. Niemniej jednak obecne dowody i wcześniejsze ustalenia płynnie łączą się.

Podsumowując, przedstawiliśmy dowody na to, że nagłe zniknięcie ogniska sekwestracji IE dodatnich pod względem VAR2CSA po wydaleniu łożyska znacząco przyczynia się do szybkiego i spontanicznego usuwania poporodowego parazytemii P. falciparum u kobiet z naturalną ekspozycją na te pasożyty. Pasożyty dokonujące transkrypcji innych genów var i wykazujące PfEMP1 typu innego niż VAR2CSA na powierzchni IE często nie są w stanie rozwijać się i powodować choroby u dorosłych na obszarach endemicznych, z powodu ochronnej specyficznej odporności PfEMP1-nabytej w dzieciństwie na malarię [2] . Ciągłe przeżycie IE innych niż VAR2CSA po porodzie może być dodatkowo zagrożone przez procesy fizjologiczne związane z porodem, takie jak prozapalne odpowiedzi immunologiczne. Wreszcie, niewykluczone, że przyczyni się do tego nieujawnione przyjmowanie leków przeciwmalarycznych bezpośrednio przed porodem. Bez względu na przyczynę, parazytemia znacznie zmniejszyła się po porodzie u niektórych kobiet, gdzie pasożyty transkrypcyjne var2csa stanowiły tylko mniejszość parazytemii przed porodem, a to odkrycie zasługuje na dalsze badania. Nasze badanie potwierdza kluczową rolę PfEMP1 w ogólnej odporności nabytej na malarię, a konkretnie VAR2CSA w patogenezie i odporności malarii łożyskowej.

Dane uzupełniające

Materiały uzupełniające są dostępne w internetowym wydaniu The Journal of Infectious Diseases. Składające się z danych dostarczonych przez autorów z korzyścią dla czytelnika, zamieszczone materiały nie są redagowane i stanowią wyłączną odpowiedzialność autorów, dlatego pytania lub komentarze należy kierować do odpowiedniego autora.

Notatki

Autorskie Wkłady.

NGA, MPQ, MFO i LH wniosły wkład w koncepcję i projekt badania. Pobranie próbki wykonane przez NGA. NGA, MPQ i LH przeprowadziły analizę danych. NGA, MPQ i LH przygotowali manuskrypt. Wszyscy autorzy przeczytali i zatwierdzili ostateczną wersję manuskryptu.

Podziękowanie.

Jesteśmy wdzięczni wszystkim kobietom, które zgodziły się wziąć udział w naszym badaniu. Dziękujemy również wszystkim położnym, lekarzom, asystentom lekarskim i pielęgniarkom w różnych placówkach służby zdrowia za pomoc w pobieraniu próbek.

Zastrzeżenie.

Fundatorzy nie odgrywali żadnej roli w projektowaniu badań, gromadzeniu i analizie danych, decyzji o publikacji ani przygotowaniu manuskryptu. Fundusze na opłacenie opłat za publikację tego artykułu w ramach Open Access zapewniła firma Danida.

Wsparcie finansowe.

Ta praca była wspierana przez firmę Danida (nr grantu 17-02-KU dla projektu MAVARECA-II), w tym doktorat. stypendium do NGA Agencja Wykonawcza ds. Badań Naukowych Komisji Europejskiej wsparła MPQ (numer grantu 101028915, Marie Skłodowska-Curie Individual Fellowship 2020, projekt PAMSEQ).

Potencjalne konflikty interesów.

Bibliografia

1. Crompton PD, Moebius J, Portugal S, et al. Odporność na malarię u człowieka i komara: wgląd w tajemnice śmiertelnej choroby zakaźnej. Annu Rev Immunol 2014; 32:157–87.

2. Hviid L, Jensen AT. PfEMP1 — rodzina białek pasożytów o kluczowym znaczeniu dla odporności i patogenezie malarii Plasmodium falciparum. adw. Parazytol 2015; 88:51–84.

3. Salanti A, Dahlback M, Turner L i in. Dowody na udział VAR2CSA w malarii związanej z ciążą. J Exp Med 2004; 200:1197–203.

4. Achur RN, Valiyaveettil M, Alkhalil A, Ockenhouse CF, Gowda DC. Charakterystyka proteoglikanów ludzkiego łożyska i identyfikacja unikalnych proteoglikanów siarczanu chondroityny z przestrzeni międzykosmkowych, które pośredniczą w adhezji erytrocytów zakażonych Plasmodium falciparum do łożyska. J Biol Chem 2000; 275:40344-56.

5. Ofori MF, Staalsoe T, Bam V i in. Ekspresja wariantów antygenów powierzchniowych przez pasożyty Plasmodium falciparum we krwi obwodowej klinicznie odpornych kobiet w ciąży wskazuje na trwającą infekcję łożyska. Infekuj odporność 2003; 71:1584-6.

6. Rovira-Vallbona E, Dobano C, Bardaji A i in. Transkrypcja genów var innych niż var2csa w pasożytach Plasmodium falciparum infekujących kobiety w ciąży Mozambiku. J Infect Dis 2011; 204:27–35.

7. Bull PC, Lowe BS, Kortok M, Molyneux CS, Newbold CI, Marsh K. Antygeny pasożyta na zakażonej krwince czerwonej są celem naturalnie nabytej odporności na malarię. Nat Med 1998; 4:358–60.

8. Nguyen-Dinh P, Steketee RW, Greenberg AE, Wirima JJ, Mulenda O, Williams SB. Szybkie spontaniczne usuwanie poporodowe parazytemii Plasmodium falciparum u afrykańskich kobiet. Lancet 1988; 2:751–2.

9. Bottero J, Briand V, Agbowai C, Doritchamou J, Massougbodji A, Cot M. Spontaniczny klirens poporodowy Plasmodium falciparum parasitemia u kobiet w ciąży, Benin. Am J Trop Med Hyg 2011; 84:267–9.

10. Anabire NG, Aryee PA, Abdul-Karim A i in. Częstość występowania malarii i wirusowego zapalenia wątroby typu B wśród kobiet w ciąży w północnej Ghanie: porównanie RDT z PCR. PLoS One 2019; 14:e0210365.

11. Jensen AT, Hviid L. Immunologia malarii: celowanie w powierzchnię zakażonych erytrocytów. W: Walker JM, wyd. Metody w biologii molekularnej. Nowy Jork: Humana Press, 2022:796.

12. Rottmann M, Lavstsen T, Mugasa JP i in. Zróżnicowana ekspresja grup genów var jest związana z chorobowością spowodowaną infekcją Plasmodium falciparum u dzieci z Tanzanii. Infekuj odporność 2006; 74:3904-11.

13. Magistrado P, Salanti A, Tuikue Ndam NG i in. Ekspresja VAR2CSA na powierzchni erytrocytów zakażonych Plasmodium falciparum pochodzących z łożyska. J Infect Dis 2008; 198: 1071–4.

14. Smażone M, Duffy PE. Adhezja Plasmodium falciparum do siarczanu chondroityny A w ludzkim łożysku. Nauka 1996; 272:1502–4.

15. Tuikue Ndam NG, Salanti A, Bertin G i in. Wysoki poziom transkrypcji var2csa przez Plasmodium falciparum wyizolowany z łożyska. J Infect Dis 2005; 192:331–5.

For more information:1950477648nn@gmail.com