Efekt terapeutyczny i mechanizm glikozydów fenyloetanolowych Cistanche na spermatogenezę indukowaną cyklofosfamidem u myszy

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

ZHAODong-hai1, ZHANGLei2, ZHANGYan3, QILing1, ZOU Xiang-ming4

[Streszczenie]

Zamiar:Aby zbadać efekt terapeutycznyGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanchena myszach ze spermatogenezą indukowaną cyklofosfamidem oraz w celu wstępnego wyjaśnienia jego mechanizmu działania.Metoda:Metoda ekstrakcji etanolem do ekstrakcjiGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanche. Czterdzieści myszy BALB/C zostało losowo podzielonych na grupę kontrolną, grupę modelową, grupę niskodawkowąGlikozyd fenyloetanoidowy Cistanchegrupa (50 mg·kg-1) i grupa wysokich dawek (100 mg·kg-1), z 10 myszami w każdej grupie. Z wyjątkiem grupy kontrolnej, myszom w innych grupach wstrzykiwano cyklofosfamid (80 mg·kg-1) codziennie przez 5 kolejnych dni w celu przygotowania mysich modeli zaburzeń spermatogenezy. Po ostatnim podaniu myszy w grupach z niską i wysoką dawkąGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanchepodano odpowiednie dawki przez zgłębnik, a myszom w grupie kontrolnej i grupie modelowej podawano przez zgłębnik taką samą objętość normalnej soli fizjologicznej, raz dziennie przez 30 dni. Dwadzieścia cztery godziny po ostatnim zgłębniku pobrano tkankę jądra myszy. W celu określenia poziomu testosteronu w homogenacie tkanki jąder myszy zastosowano test immunoenzymatyczny. Porównano gęstość plemników, ruchliwość plemników i wskaźnik nieprawidłowości plemników w każdej grupie. Barwienie HE obserwowano zmiany morfologiczne tkanki jąder. Wyniki: W porównaniu z grupą kontrolną zmniejszyła się gęstość plemników i wskaźnik ruchliwości plemników w grupie modelowej (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" increased=""><0.01), and="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" decreased=""><0.01). 0.01);="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" of="" mice="" in="" each="" dose="" group="" of="">Glikozydy fenyloetanoidowe Cistancheznacznie wzrosły (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.01), and="" the="" testicular="" tissue="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" homogenate="" increased=""><0.05 or=""><0.01). histological="" observations="" showed="" that="" the="" seminiferous="" tubules="" in="" the="" testis="" of="" the="" model="" group="" were="" atrophied="" and="" degenerated,="" the="" seminiferous="" epithelium="" was="" significantly="" thinner,="" the="" arrangement="" of="" spermatogenic="" cells="" was="" disordered,="" and="" the="" number="" of="" sperm="" in="" the="" cavity="" decreased;="" the="" number="" of="" the="" seminiferous="" epithelium="" in="" the="" testes="" of="" the="">Glikozyd fenyloetanoidowy Cistanchegrupa znacznie wzrosła, Warstwy są wyraźne, komórki spermatogenne ułożone są ładnie, ciasno i regularnie, a plemniki są widoczne w świetle.Wniosek: Glikozydy fenyloetanoidowe Cistanchemają istotny wpływ terapeutyczny na zaburzenie spermatogenezy wywołane przez cyklofosfamid u myszy, a jego mechanizm może być związany z poprawą poziomu testosteronu w tkankach jąder.

[Słowa kluczowe]Glikozydy fenyloetanoidowe Cistanche; cyklofosfamid; zaburzenie spermatogenezy; myszy, BALB/C

Kliknij, aby produkty Cistanche

Ze względu na przyspieszenie rytmu społecznego, złe nawyki życiowe i zanieczyszczenie środowiska oraz inne czynniki, nieprawidłowa jakość nasienia, taka jak oligospermia i astenospermia, stały się główną przyczyną niepłodności męskiej [1]. Obecnie jest mniej leków do leczenia oligospermii i astenospermii, a efekt terapeutyczny nie jest oczywisty. Recepty tradycyjnej medycyny chińskiej lub składniki aktywne mają dobry wpływ na poprawę funkcji rozrodczych mężczyzn [2-6]. Jednak ze względu na dużą różnorodność leków na receptę związek między działaniem farmakologicznym a skutecznymi składnikami leku nie jest jasny, co ogranicza promocję i stosowanie leków spermatogennych. Badania i rozwój skutecznych składników medycyny chińskiej oraz badanie ich efektów terapeutycznych w urazach rozrodczych mają dobrą wartość aplikacyjną.Glikozydy fenyloetanoidowe Cistanchesą jednym z najważniejszych składników aktywnych wCistanche deserticola. Są to zazwyczaj naturalne glikozydy zawierające wiązania estrowe oraz wiązania okso-glikozydowe z β-glukozą jako jądrem. Są szeroko spotykane w roślinach dwuliściennych [7]. Badania [8] wykazały, żeCistanchefenyletanoidglikozydymoże chronić plemniki szczurów przed uszkodzeniem oksydacyjnym in vitro, ale nie ma doniesień o ich spermatogenezie. Eksperyment ten bada działanie terapeutyczne glikozydów fenyloetanoidowych Cistanche na funkcje spermatogenne myszy z spermatogenezą indukowaną cyklofosfamidem i dostarcza eksperymentalnych i teoretycznych podstaw do zastosowaniaGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanchew leczeniu zaburzeń spermatogenezy.

1. Materiały i metody

1.1. Zwierzęta laboratoryjne, główne odczynniki i instrumenty

40 dorosłych myszy BALB/C klasy SPF, 6-8 tygodni, o masie ciała 20-22g, zakupiono z Animal Experimental Center of Jilin University School of Basic Medicine, a numer świadectwa dla zwierząt : SCXK (Kirgistan) 2008-005. Myszy hodowano adaptacyjnie przez 5 dni przed eksperymentem. Warunki żywienia: 22 stopnie ~ 25 stopni, rytm dobowy (12h/12h), bezpłatna woda pitna i jedzenie. Cistanche jest produktem firmy handlowej Xinjiang Dakang. Cyklofosfamid do wstrzykiwań zakupiono od Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd. (numer serii 11061921). Zestaw do testu immunologicznego enzymatycznego testosteronu z homogenatem tkanki jądra zakupiono od Tianjin Jiuding Medical Bioengineering Co., Ltd. (numer serii) 20120812), wszystkie inne odczynniki są produkowane w kraju o jakości analitycznej. Czytnik mikropłytek PLUS384 (MDC w Stanach Zjednoczonych), mikroskop odwrócony TE2000U (Nikon, Japonia) i wirówka J-26XP (Nanodrop, Stany Zjednoczone).

1.2 Przygotowanie glukozydu fenyloetanolowego Cistanche

10 g proszku cistanche wyekstrahowano przez ogrzewanie pod chłodnicą zwrotną z 70% etanolem, dwukrotnie, za każdym razem po 2 godziny, w celu uzyskania koncentratu glikozydowego alkoholu fenetylowego. Zatężony roztwór poddano chromatografii na kolumnie z makroporowatą żywicą D101 i eluowano 70% etanolem, otrzymując alkohol fenekozydowy Cistanche. Spektrofotometr UV zidentyfikował ekstrakt przy długości fali 333 nm.

1.3 Przygotowanie modelu zwierzęcego i sposobu podawania leku

Po adaptacyjnym karmieniu 40 samców myszy BALB/C przez 5 dni, myszy losowo podzielono na 4 grupy (10 myszy w każdej grupie): grupa kontrolna, grupa modelowa, CistancheGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanchegrupa niskodawkowa iGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanchegrupa wysokodawkowa. Z wyjątkiem grupy kontrolnej, pozostałym trzem grupom myszy podawano dootrzewnowe wstrzyknięcie cyklofosfamidu 80 mg·kg-1 każdej myszy przez 5 kolejnych dni w celu przygotowania zwierzęcych modeli zaburzeń spermatogenezy. Po przygotowaniu modelu myszy w grupach z niską i wysoką dawkąCistanchefenyletanoid podano odpowiednio 50 i 100 mg·kg-1·d-1. Myszom w grupie kontrolnej i grupie modelowej podano równe objętości soli fizjologicznej. Raz dziennie przez 30 dni. Wszystkie myszy uśmiercono 24 godziny po ostatnim podaniu leku i wykonano testy obustronne. Prawe jądro zostało utrwalone formaldehydem. Najądrza i jądra pobrano z lewej strony. Jądra homogenizowano i odwirowywano przy 3 000 min przez 10 min. Supernatant pobrano i przechowywano w lodówce w -20 stopniu do testowania. Lewe najądrze badano pod kątem gęstości plemników, ruchliwości plemników i stopnia deformacji.

1.4 Oznaczanie gęstości plemników, ruchliwości plemników i współczynnika deformacji

Probówkę zawierającą 10 ml pożywki nasienia [9] umieścić w łaźni wodnej o stałej temperaturze, aby podgrzać ją do temperatury 37 stopni, pobrać jednostronne najądrza, aby usunąć tkankę łączną i tłuszcz, przeciąć tkankę i umieścić ją w probówce o temperaturze 37 stopni przez 10 minut Po całkowitym uwolnieniu plemników weź 1 kroplę na płytkę do liczenia krwinek i oblicz gęstość plemników zgodnie z metodą liczenia komórek. Wynik jest wyrażony jako liczba plemników na mililitr; dodatkowo pobrać z probówki 5 μl zawiesiny plemników i taką samą ilość eozyny-Y Dobrze wymieszać, umieścić w temperaturze pokojowej na 10 minut, dodać szkiełko nakrywkowe i obserwować pod mikroskopem świetlnym. Martwe plemniki są wybarwione na różowo, żywe plemniki nie są wybarwione, a cytoplazma jest przezroczysta. Każda próbka liczy 200 plemników, oblicza żywotność plemników, wynik wyraża się w procentach, żywotność plemników=liczba żywych plemników / całkowita liczba plemników × 100 procent. Kolejne 5 µl zawiesiny plemników utrwalano w metanolu przez 5 minut, suszono i barwiono 2% wodnym roztworem eozyny przez 1 godzinę, płukano i suszono powietrzem. Poszukaj części, w których plemniki zachodzą na siebie mniej, pod soczewką o niskiej mocy i użyj soczewki o wysokiej mocy, aby sprawdzić morfologię plemników w kolejności. Każda mysz zbadała 1,000 kompletną spermę. Główki plemników bez haczyków, główki bananowe, amorficzne, tłuste i główki podwójne uznano za deformacje. Obliczono współczynnik deformacji plemników, a wyniki wyrażono w procentach. Współczynnik deformacji plemników=liczba zdeformowanych plemników / całkowita liczba plemników x 100 procent .

1.5 Oznaczanie hormonów reprodukcyjnych

Jądro zdarto z membrany i umieszczono w naczyniu z fiolkami, a wstępnie schłodzoną pożywkę do homogenizacji (0.01mol·L-1sacharozy, 0.01mol ·L-1 Tris-HCl, 0,1mmol·L-1 roztworu EDTA-Na2, pH 7,4), przeciąć tkankę jądra nożyczkami okulistycznymi, wlać do szklanej probówki do homogenizacji i odwirować w 4, 000×g przez 10 minut w niskiej temperaturze i pobrać supernatant. Za pomocą zestawu do testu immunoenzymatycznego zmierzyć poziom testosteronu w homogenacie tkanki jąder i zbadać 3 równoległe próbki dla każdej próbki. Eksperymentalne etapy i metody zostały ukończone zgodnie z instrukcjami zestawu.

1.6 Morfologiczna obserwacja jąder

Weź skrawki parafinowe jąder myszy, wybarwione HE i obserwuj pod mikroskopem świetlnym dystrybucję spermatogonii i komórek spermatogennych w tkance jądra.

1.7 Analiza statystyczna

Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu oprogramowania statystycznego SPSS17.0. Gęstość plemników, szybkość ruchliwości plemników, szybkość deformacji plemników i poziom testosteronu w jądrach myszy w każdej grupie wyrażono jako x±s, a porównanie między grupami przeprowadzono za pomocą jednoczynnikowej analizy wariancji.

2. wyniki

2.1. Gęstość plemników, ruchliwość plemników i wskaźnik deformacji plemników każdej grupy myszy

W porównaniu z grupą kontrolną gęstość plemników i żywotność plemników w grupie modelowej zmniejszyły się (P<0.01), and="" the="" sperm="" deformity="" rate="" increased=""><0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" rate="" of="" mice="" in="" each="" dose="" of="">Glikozyd fenoksyetanolu Cistanchezwiększona (P<0.05 or=""><0.01), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05 and=""><0). .01).="" compared="" with="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group,="" the="" high-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" had="" higher="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility=""><0.05), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05). see="" table="">

2.2 Poziom testosteronu w tkankach jąder myszy w każdej grupie

Poziomy testosteronu w homogenatach tkanek jąder grupy kontrolnej i grupy modelowej wynosiły (10,26±0,57) i (5,33±0,84) nmol·L-1, odpowiednio. Poziom testosteronu w grupie modelowej był znacznie niższy niż w grupie kontrolnej (P<0.01). the="" testosterone="" levels="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" were="" (7.55±1.21)="" and="" (10.35±0.94)="" nmol·l-1.="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" low="" and="" high-dose="" groups="" of="" cistanche="" cistanche="" ethanol="" glycosides="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05 or=""><0.01). the="" testosterone="" level="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="">Cistanchecistanche fenetyloglikozyd w grupie wysokich dawek był znacznie wyższy niż w grupie z niską dawką (P<>

2.3 Morfologia jąder myszy w każdej grupie

Obserwowane pod mikroskopem świetlnym, kanaliki nasienne w jądrach grupy prawidłowej były gęsto rozmieszczone, poziom i liczba komórek zarodkowych były duże, nabłonek nasienny był uporządkowany, a wszystkie kanaliki nasienne były widoczne z tworzeniem plemników. W grupie modelowej kanaliki nasienne w jądrach myszy uległy zanikowi i zwyrodnieniu, nabłonek nasienny uległ znacznemu przerzedzeniu, zmniejszeniu uległa liczba warstw nabłonka, nieuporządkowany układ i zmniejszona liczba plemników w jamie. W porównaniu z grupą modelową, niska dawkaGlikozyd alkoholu fenyloetylowego Cistanche.

W tej grupie wzrosła liczba warstw nabłonka nasiennego kanalików nasiennych, układ nabłonka był bardziej regularny, a uszkodzenia kanalików nasiennych wyraźnie poprawiły się; budowa kanalików nasiennych w dużych dawkachGlikozyd fenyloetanoidowy Cistanchegrupa poprawiła się znacznie, a liczba i liczba warstw nabłonka nasiennego znacznie wzrosła. Starannie ułożone, w kanalikach nasiennych znajdują się dojrzałe plemniki, a ich struktura w zasadzie wróciła do normy. Patrz rysunek 1 (wstawka 6).

3 Dyskusja

Cyklofosfamid jest powszechnie stosowanym lekiem przeciwnowotworowym i immunosupresyjnym, który głównie zaburza różne wewnątrzkomórkowe funkcje biologiczne poprzez alkilację DNA. Toksyczny wpływ na reprodukcję jest jednym z głównych skutków ubocznych cyklofosfamidu [3], który może łatwo prowadzić do uszkodzenia DNA plemników i nieprawidłowego rozwoju plemników. Badania kliniczne [10-11] wskazują, że toksyczność reprodukcyjna cyklofosfamidu może powodować azoospermię lub oligospermię. , prowadzące do niepłodności lub wystąpienia wad genetycznych lub wad rozwojowych u potomstwa.

Cistanche tubulosajest wieloletnią wyższą rośliną pasożytniczą z rodziny Leiden. Jest to znana medycyna chińska, która odżywia nerki i yang, odżywia krew i odżywia jelita. Jest powszechnie stosowanym lekiem na receptę w tradycyjnym leczeniu męskich zaburzeń rozrodu [12].Glikozydy fenyloetanoidowesą jednym z najważniejszych aktywnych składnikówCistanche[13] i mają szeroki zakres efektów farmakologicznych, takich jak działanie przeciwutleniające, przeciwstarzeniowe i przeciwnowotworowe [14].

W tym badaniu cyklofosfamid wykorzystano do przygotowania mysiego modelu zaburzenia spermatogenezy i zbadano działanie terapeutyczne glikozydów fenyloetanoidowych Cistanche na zaburzenia spermatogenezy wywołane przez cyklofosfamid. Wyniki wykazały, że w porównaniu z grupą normalną gęstość plemników w grupie modelowej zmniejszyła się, wskaźnik przeżywalności zmniejszył się, a wskaźnik deformacji wzrósł. W porównaniu z grupą modelową, wszystkie grupy dawek glikozydów fenoksyetanolowych Cistanche mogą skutecznie zwiększać gęstość plemników, poprawiać ruchliwość plemników i zmniejszać wskaźnik deformacji plemników. Powyższe wyniki wskazują, że glikozydy cistanche fenoksyetanolu mogą promować spermatogenezę i chronić uszkodzone jądra. Wyniki morfologii jąder wykazały, że po leczeniuGlikozyd fenyloetanoidowy Cistanche, liczba nabłonka nasiennego w jądrach modelowych myszy była znacznie zwiększona, warstwy były wyraźne, komórki spermatogenne ułożone były schludnie, ciasno i regularnie, a plemniki były widoczne w świetle, co sugeruje, żeFenyletanoid Cistanchemoże zmienić Shanhe przywraca strukturę i morfologię nabłonka nasiennego po uszkodzeniu rozrodczym.

Testosteron reguluje różnicowanie męskich komórek rozrodczych i jest niezbędnym warunkiem prawidłowego rozwoju jąder i prawidłowego występowania plemników. Niektóre badania [15] donoszą, że selektywny nokaut receptorów androgenowych w komórkach Sertoliego jądra powodował zaburzenia rozwoju plemników i męską bezpłodność. W tym badaniu cyklofosfamid został użyty do produkcji spermatogennej.

Po modelu uszkodzeń przeszkodowych poziom testosteronu w tkance jąder myszy był znacznie niższy niż w grupie normalnej. Po działaniu glikozydów fenyloetanoidowych Cistanche poziom testosteronu w każdej grupie dawkowej wzrósł, a poziom testosteronu w grupie wysokodawkowej był znacznie wyższy niż w grupie niskodawkowej. Sugeruje się, że glikozydy cistanche fenoksyetanolu mogą promować spermatogenezę poprzez zwiększenie poziomu testosteronu w tkance jąder w celu leczenia dysfunkcji spermatogennej, ale mechanizm jego wpływu na testosteron wymaga dalszych badań i dyskusji.

Testosteron reguluje różnicowanie męskich komórek rozrodczych i jest niezbędnym warunkiem prawidłowego rozwoju jąder i prawidłowego występowania plemników. Niektóre badania [15] donoszą, że selektywny nokaut receptorów androgenowych w komórkach Sertoliego jądra powodował zaburzenia rozwoju plemników i męską bezpłodność. W tym badaniu cyklofosfamid został użyty do produkcji spermatogennej.

Po modelu uszkodzeń przeszkodowych poziom testosteronu w tkance jąder myszy był znacznie niższy niż w grupie normalnej. Po akcjiGlikozydy fenyloetanoidowe Cistanche, poziomy testosteronu w każdej grupie dawki wzrosły, a poziom testosteronu w grupie z wysoką dawką był znacznie wyższy niż w grupie z niską dawką. Sugeruje się, że glikozydy cistanche fenoksyetanolu mogą promować spermatogenezę poprzez zwiększenie poziomu testosteronu w tkance jąder w celu leczenia dysfunkcji spermatogennej, ale mechanizm jego wpływu na testosteron wymaga dalszych badań i dyskusji.

[Bibliografia]

[1] Wang Yixin, Zheng Jufen. Nowe postępy w badaniach nad niepłodnością u mężczyzn [J]. Chinese Journal of Andrology, 2006, 12(9): 771-774.

[2] Xie Jianxing, Wang Jun, Chen Ming i in. Wpływ kapsułki Guilingji na modelowe szczury z oligospermią. Rola produkcji plemników i wpływ na hormony płciowe [J]. Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy, 2011, 28(6): 621-623.

[3] Zhang Changcheng, Jia Liangliang, Li Shouchao i in. Całkowite flawonoidy w epimedium powodują minimalizację cyklofosfamidu Badania nad ochronnym działaniem bariery plemników urodzonych przez szczury [J]. Chińska medycyna patentowa, 2010, 32 (12): 2052-2055.

[4] Xu Lei, Wang Rui, Zhang Weixing i in. Granulki Shengjinga na upośledzenie nasienia wywołane cyklofosfamidem utrudniają efekt terapeutyczny myszy [J]. Journal of Zhengzhou University: Medical Science Edition, 2008, 43(2): 267-270.

[5] Wang Rui, Xu Lei, Zhang Weixing i in. Wpływ granulek Shengjing medycyny chińskiej na myszy z zaburzeniami spermatogenezy Badania eksperymentalne nad efektami terapeutycznymi [J]. Chinese Journal of Andrology, 2008, 14 (11): 1046-1049.

[6] Guo Kaihua, Gao Fulu, Niu Siyun i in. Wpływ wywaru Heshouwu na tkankę jądra starzejących się szczurów Wpływ szlaku transdukcji sygnału komórkowego Rb/p53 [J]. Dziennik Anatomii, 2010, 41(3): 435-439.

[7] Wu Haihong, Xuan Guodong, Liu Chunquan. Wpływ ekstrakcji refluksowej glikozydu Cistanche fenyloetanolu z badaniami czynnika etanolowego [J]. Jiangsu Agricultural Sciences, 2009 (1): 250-251.

[8] Li Gang, Zhu Wenbin, Niu Fei i in. Wpływ Cistanche Phenylethanol Glucoside na badania plemników szczurów na ochronny wpływ zewnętrznych uszkodzeń oksydacyjnych [J]. Lishizhen Traditional Chinese Medicine and Materia Medica, 2010, 21(9): 2205-2207.

[9] Chen Deyu, Liu Limin, Xie Qingdong, itp. Przeciwciała przeciwko nasieniu na funkcję mitochondriów plemników Wpływ [J]. Journal of Shantou University Medical College, 2008, 21(1): 4-6.

[10] KenneyLB, Laufer MR, Grant FD i in. Wysokie ryzyko informacji Wysokie dosecyklofafamiddeforsarcomdoczas dzieciństwa [J].Cancer, 2001, 91(3): 613-621.

[11] JahunkainenK, EhmckeJ, Houm i in. Czynność jąder i zachowanie płodności u chorych na nowotwory złośliwe [J]. BestPrect ResClinEndocrinol Metab, 2011, 25: 287-302.

[12] Gao Zhanyou, Zhou Haitao, Lin Qiang. Zdolność Cistanche do przeciwstawiania się zmęczeniu wysiłkowemu u szczurów I wpływ wolnych rodników w mózgu [J]. Nauki rolnicze Anhui, 2011, 39(16): 9592-9595.

[13] Ren Lu, Gu Xiaohong, Tang Jian i in. Glikozydy fenyloetanolowe w uprawach Cistanche cistanche Badania ekstrakcji i oczyszczania [D]. Wuxi: Uniwersytet Jiangnan, 2006, 25(3): 33-36. [14] Jinghui, Zuo Jianfeng, Li Jiaoshe. Wystawa Postępy w badaniach farmakologicznych glikozydów fenoksyetanolowych [J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica, 2006, 17(3): 440-441.

[15] ChangC, ChenYT, YehSD, i wsp. Infomedia wiosna Theandrogenreceptor w Sertolicells [J]. ProcNatlAcadSci USA, 2004, 101 (18): 6876-6881.