Terapeutyczny wpływ Cistanche Deserticola na defekację w modelu szczura z zaparciami starczymi

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang

Abstrakcyjny

TŁO

Zaparcie jest jedną z przewlekłych chorób czynnościowych przewodu pokarmowego. Poważnie wpływa na jakość życia. Cistanche deserticola (C. deserticola) może oczywiście leczyć zaparcia, ale ich mechanizm nie został wyjaśniony. Przypuszczaliśmy, że jej mechanizm poprawia motorykę jelit poprzez stymulację śródmiąższowych komórek Cajalcell (ICC). Aktywacja receptora C-kit na powierzchni ICC jest ściśle związana z funkcją ICC, a ważną rolę odgrywają w niej szlaki sygnałowe czynnika komórek macierzystych (SCF)/C-kit. Aby zbadać mechanizm leczenia zaparć przez C. deserticola, niniejsze badanie miało na celu ustalenie modelu zaparć u szczurów i zbadanie roli szlaku sygnałowego SCF/C-kit w leczeniu.

CEL

Zbadanie szlaków sygnałowych SCF/C-kit w roli C. deserticola w leczeniu zaparć na szczurzym modelu zaparć.

METODY

Czterdzieści osiem 8-młodych szczurów Sprague-Dawley podzielono na 4 grupy metodą losowej wagi: grupa normalna (n=12), grupa modelowa (n=12), grupa C. deserticola (n=12) i grupa blokująca (n=12). Normalna grupa otrzymywała przez zgłębnik normalną sól fizjologiczną; grupa modelowa otrzymywała loperamid przez zgłębnik; grupa blokera otrzymała loperamid i C. deserticola przez zgłębnik, a STI571 wstrzyknięto dootrzewnowo. Podczas leczenia co 10 dni rejestrowano wagę, granulki kału i jakość kału. W dniu 20 po indukcji modelowej tkanki okrężnicy z każdej grupy usunięto. Do obserwacji zmian patologicznych wykorzystano barwienie hematoksyliną i eozyną. Poziomy ekspresji genów SCF, C-kit i Aquaporin wykryto za pomocą immunohistochemii, western blotting i ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym. Za pomocą transmisyjnej mikroskopii elektronowej obserwowano mitochondria nabłonka okrężnicy i komórki kubkowe.

WYNIKI

W porównaniu z normalną grupą, w miarę postępu leczenia, masa szczurów w grupach modelowych i blokujących znacznie spadła, masa stolca zmniejszyła się, a jakość stolca była sucha (P < {{0}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" odwrócił="" spadek="" masy="" ciała="" i="" masy="" kału="" oraz="" poprawił="" jakość="" kału.="" analiza="" histopatologiczna="" wykazała,="" że="" ​​nabłonek="" błony="" śluzowej="" okrężnicy="" w="" grupie="" modelowej="" był="" niepełny,="" a="" układ="" gruczołów="" nieregularny="" lub="" uszkodzony.="" leczenie="" c.="" deserticola="" poprawiło="" integralność="" i="" ciągłość="" komórek="" nabłonka="" oraz="" prawidłowe="" ułożenie="" gruczołów.="" środki="" blokujące="" hamowały="" efekty="" immunohistochemii="" c.="" deserticola,="" a="" ilościowa="" reakcja="" łańcuchowa="" polimerazy="" w="" czasie="" rzeczywistym="" wykazała,="" że="" ​​ekspresja="" scf="" i="" c-kitprotein="" lub="" genów="" w="" tkance="" okrężnicy="" w="" grupie="" modelowej="" była="" zmniejszona="" (p="">< 0,05)="" podczas="" leczenia="" c.="" deserticola="" zwiększył="" ekspresję="" białka="" lub="" genów="" (p="">< 0,05).="" western="" blot="" wykazał,="" że="" ekspresja="" akwaporyny="" apq3="" była="" zwiększona,="" podczas="" gdy="" ekspresja="" cx43="" spadła="" w="" grupie="" modelowej.="" traktowanie="" c.="" deserticola="" hamowało="" ekspresję="" apq3="" i="" promowało="" ekspresję="" cx43.="" mikroskopia="" transmisyjna="" elektronów="" wykazała,="" że="" ​​mitochondria="" nabłonka="" okrężnicy="" w="" grupie="" modelowej="" były="" spuchnięte="" i="" nieuporządkowane,="" a="" mikrokosmki="" były="" nieliczne.="" stan="" był="" lepszy="" w="" grupie="" c.="" deserticola.="" myszy="" leczone="" blokerem="" sti571="" potwierdziły,="" że="" blokowanie="" szlaku="" scf/c-kit="" hamuje="" poprawę="" zaparcia="" przez="" c.="">

WNIOSEK

C. deserticola poprawiał wypróżnianie u szczurów z zaparciami, a szlak sygnalizacyjny SCF/C-kit, który jest kluczowym ogniwem funkcji ICC, odgrywał ważną rolę w leczeniu.

Słowa kluczowe:Cistanche deserticola; zaparcia starcze; Czynniki komórek macierzystych; C-zestaw

świeży surowiec cistanche

WPROWADZANIE

Zaparcie starcze (SC) jest jedną z częstych przewlekłych chorób czynnościowych przewodu pokarmowego u pacjentów geriatrycznych, która indukuje lub zaostrza zdarzenia naczyniowo-mózgowe i inne choroby oraz poważnie wpływa na jakość życia osób starszych[1,2]. Według tradycyjnej medycyny chińskiej głównym etiologia i patogeneza SCCare ciepłoty żołądkowo-jelitowe, niedobór Yin i Jin oraz odwadnianie jelit[3,4], podczas gdy Cistanche deserticola (C. deserticola) może rozgrzewać nerki i rozluźniać jelita. poprawa motoryki i leczenie s.c. jest jasne, ale jego mechanizm nie został wyjaśniony[5,6]. Komórki śródmiąższowe Cajalcell (ICC) to szczególny rodzaj komórek mezenchymalnych w przewodzie pokarmowym. Aktywacja receptora C-kit na powierzchni ICC jest ściśle związana z proliferacją, różnicowaniem i funkcją komórek. ICC uczestniczą w patogenezie wielu dysfunkcji ruchowych przewodu pokarmowego [7,8]. Aktywacja C-kit zależy od wiązania jego liganda czynnika macierzystego (SCF)[9]. Zbadanie efektu i mechanizmu działania C. deserticola na SC, to badanie miało na celu stworzenie modelu SC u szczurów indukowanego przez loperidol w celu zbadania roli szlaku sygnałowego SCF/C-kit w leczeniu zaparć wywołanych przez C. deserticola.

MATERIAŁY I METODY

Materiały eksperymentalne

Zwierzęta doświadczalne:Zwierzętami doświadczalnymi było 48 samców 8-starych szczurów Sprague Dawley o wadze 500-550 g; wszystkie zakupione od Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd. Szczury hodowano w laboratorium zwierzęcym Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., otrzymując normalne światło dzienne i nocne, jedzenie i picie. Wszystkie procedury były zgodne z wytycznymi dotyczącymi postępowania wydanymi przez Komisję Etyki Szpitala Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Chongqing.

Odczynniki podstawowe:Podstawowymi odczynnikami były loperamid (Sigma, St. Louis, MO, Stany Zjednoczone), C. deserticola z Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 z chińskiej firmy Selleck Co. Ltd. i SCF, C-kit, koneksyna 43 (Cx43), akwaporyna 3 (AQP3) i przeciwciała przeciwko aktynie (Abcam, Cambridge, MA, Stany Zjednoczone), PrimeScript II 1st Strand cDNA Zestaw do syntezy i premiks Taq™ (Ex Taq™ wersja 2.0)(Takara Co. Ltd., Japonia).

suplementy z ekstraktem z ziół cistanche

Metody

Przygotowanie i grupowanie modelu SC:Aby uniknąć wpływu czynników zakłócających, takich jak masa ciała, na wyniki eksperymentów, szczury pogrupowano losowo metodą blokowego grupowania losowego. Czterdzieści osiem szczurów karmiono adaptacyjnie przez 1 tydzień i szczury ponumerowano w kolejności od wagi lekkiej do wagi ciężkiej. Zgodnie z kolejnością masy ciała szczury podzielono na 12 stref (masa szczurów w każdej strefie była podobna), po 4 szczury w każdej strefie. 12 stref podzielono na 4 grupy po 12 (normalna, modelowa, C. deserticola i bloker). Szczurom w grupie modelowej podano loperamid (0.0625/100 g, 10 ml/kg) przez zgłębnik. Pierwsza dawka zgłębnika została podwojona, a lek podawano codziennie o 10:00, raz dziennie przez 20 kolejnych dni. Normalnej grupie podano tę samą ilość soli fizjologicznej przez zgłębnik. Dodatkowo, grupę modelową potraktowano C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) przez zgłębnik. Grupie blokującej podawano C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) przez zgłębnik i STI571 (25 mg/ml, 1 ml/kg) przez wstrzyknięcie dootrzewnowe. Podczas eksperymentu co 10 dni rejestrowano masę ciała, masę stolca i stan stolca. U żadnego ze szczurów nie doszło do przypadkowej śmierci. Dwadzieścia dni później szczury uśmiercono, a tkankę okrężnicy usunięto do badania i konserwacji ciekłego azotu. Pozostałe części zostały naprawione i osadzone.

Analiza histopatologiczna:Szczury na czczo przez noc znieczulano przez dootrzewnową iniekcję 7% wodzianu chloralu (5 ml/kg) następnego dnia. Brzuch został otwarty w celu oddzielenia tkanki okrężnicy i usunięto 8-10 mm okrężnicy. Zawartość jelit usunięto przez delikatne wytrząsanie we wstępnie schłodzonym polibutylenobursztynianie i utrwalono przez 24 godziny w 4% utrwalającym roztworze paraformaldehydu. Wykonano konwencjonalne zatapianie parafinowe. Skrawki tkankowe (5 μm) usunięto w celu barwienia hematoksyliną i eozyną, a morfologię histopatologiczną obserwowano pod mikroskopem.

Wykrywanie ekspresji SCF i C-kit za pomocą barwienia immunohistochemicznego:Tkanki parafinowe badane histopatologicznie powyżej pocięto na skrawki, ponownie uwodniono etanolem gradientowym z odparafinowanym ksylenem, usunięto antygen przez ogrzewanie i uszczelniono przez 1 godzinę z surowicą kozią w temperaturze pokojowej. Wkroplono przeciwciała pierwszorzędowe SCF i C-kit i tkanki trzymano przez noc w 4 stopniach. Po spłukaniu polibutylenobursztynianem, peroksydazę chrzanową wkroplono w celu oznaczenia przeciwciała drugorzędowego, przepłukano bursztynianem polibutylenu przez 5 min, kroplę roztworu chromogennego kwasu 2,4-diaminomasłowego, ponownie wybarwiono hematoksyliną, odwodnienie alkoholowe w odwrotnym gradiencie, transparentne ksylenem i neutralnym uszczelnienie żywiczne. Mikroskopowo jądra były fioletowoniebieskie, a produktami wyniku pozytywnego były brązowawożółte lub żółte cząstki.

Wykrywanie ekspresji mRNA C-kit w tkance okrężnicy za pomocą ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (RT-qPCR):Zamrożoną tkankę okrężnicy szczura zmielono w homogenizatorze i dodano 1 ml RNAiso Plus. Całkowity RNA tkanki okrężnicy wyekstrahowano metodą chloroform/izopropanol, a jakość RNA wykryto metodą elektroforezy żelowej. Po zidentyfikowaniu przez urządzenie do obrazowania w żelu Bio-Rad, 1 ug RNA poddano odwrotnej transkrypcji do cDNA za pomocą zestawu Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. Zgodnie z bazą danych NCBI Gene ID: 64030, region CDS genu C-kit został znaleziony i połączony z NCBI Primer-Blast design Sekwencja startera zsyntetyzowana przez Sangon Biotech Co. Ltd, nić sensowna sekwencji startera C-kit 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', nić antysensowna 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - sensowna nić aktynowa 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', nić antysensowna 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. Amplifikację PCR przeprowadzono na aparacie Bio-RadCFX90 Real-Time PCR. Warunki testu PCR to początkowa denaturacja w 95 stopniach przez 5 min, 30 cykli 95 stopni przez 30 s, 60 stopni przez 30 s i 72 stopnie przez 1 min, a następnie końcowe wydłużenie w 72 stopniach przez 10 min. 2-ΔΔCt (ΔCt=wartość Ct - -wartość Ct aktyny) wzięto do analizy względnej ekspresji genów.

Wykrywanie poziomu ekspresji białka Cx43 i AQP3 w tkance okrężnicy metodą Western blotting:Zebrano około 1 cm zamrożonej tkanki okrężnicy i poddano lizie za pomocą silnej cieczy pirolitycznej RIPA (100 µl). Tkankę homogenizowano w szklanym homogenizatorze 20 razy i przeniesiono do 1,5 ml probówki wirówkowej. Supernatant ekstrahowano po odwirowaniu przy 12000 rpm w 4 stopniach przez 5 min, a stężenie białka całkowitego w supernatancie określano metodą BCA. Usunęliśmy 25 ug zdenaturowanego białka, aby przeprowadzić elektroforezę w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu, a następnie przenieśliśmy białka w żelu na membranę z polifluorku winylidenu przy stałym prądzie 200 mA, a następnie uszczelniliśmy 5-procentowym płynem zawierającym odtłuszczone mleko przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Odpowiednie przeciwciała pierwszorzędowe rozcieńczono płynem uszczelniającym, inkubowano w 4 stopniach przez noc, następnie przepłukano oporność błony i dodano drugie przeciwciała. Po dodaniu płynu ECL umieszczono je pod miernikiem naświetlenia do badania metodą analizy gęstości optycznej.

Transmisyjna mikroskopia elektronowa:Pobraliśmy około 1 cm proksymalnej tkanki okrężnicy, utrwaliliśmy ją w 2,5-procentowym aldehydzie glutarowym przez 24 godziny, odwodniliśmy acetonem o określonym stężeniu, osadziliśmy w Epon812 i wycięliśmy ultracienkie skrawki 50 nm na ultramikrotomie. Skrawki barwiono octanem ditlenku uranu i płynem barwiącym cytrynianem ołowiu w temperaturze pokojowej przez 10 min. Zaobserwowaliśmy kosmki okrężnicy, mitochondria komórek nabłonkowych i komórki kubkowe pod transmisyjnym mikroskopem elektronowym Philips Tecnai-10.

Analiza statystyczna

Do analizy danych użyto oprogramowania SPSS 19.0, a do wykreślenia wyników użyto oprogramowania GraphPad Prism8.4. Do badania normalności zastosowano test Shapiro-Wilka. Dane o rozkładzie normalnym reprezentowane były przez średnią ± SD. Pozycje błędu zostały użyte do przedstawienia średniej ± SD hemoglobiny po leczeniu. Do porównania dwóch grup zastosowano test t-Studenta. Do porównania między wieloma grupami zastosowano analizę wariancji. Do porównania wielu grup w parach zastosowano metodę Studenta-Newmana-Keulsa, a do pomiaru różnic między każdą grupą eksperymentalną a grupą kontrolną w kolejności zastosowano test Dunnetta. prowadzone. Jeżeli test sferyczności wykazał P > 0.{{10}}5, zastosowano powtarzaną analizę wariancji danych pomiarowych. Jeśli P < 0,05,="" przyjęto="" uogólnione="" równanie="" estymacji.="" dane,="" które="" nie="" odpowiadały="" rozkładowi="" normalnemu,="" były="" reprezentowane="" przez="" m="" (p25,="" p75),="" a="" do="" porównania="" między="" grupami="" zastosowano="" test="" sumy="" rang="" kruskala-wallisa="" h.="" test="" 2="" stosowano="" do="" porównania="" między="" grupami,="" gdy="" dane="" były="" danymi="" nieuporządkowanymi,="" a="" test="" χ2="" pearsona="" stosowano,="" gdy="" proporcja="" komórek="" o="" teoretycznej="" częstości="">< 5="" wynosiła="">< 20="" procent.="" jeśli="" proporcja="" komórek="" z="" teoretyczną="" częstością="">< 5="" była="" większa="" lub="" równa="" 20="" procent,="" stosowano="" dokładny="" test="" fishera.="" p="">< 0,05="" zastosowano="" do="" określenia,="" że="" ​​różnica="" była="" istotna="">

Rycina 1 Zmiany histopatologiczne okrężnicy.

WYNIKI

Ogólne warunki

Jeden dzień po zgłębniku loperamidu w porównaniu z normalną grupą, masa ciała i masa stolca w grupie modelowej były znacząco zmniejszone (P < {{0}}.05),="" ale="" nie="" było="" znaczącej="" różnicy="" w="" jakości="" stolca="" wynik="" (p=""> 0,05). Leczenie C. deserticola w grupie modelowej spowalniało spadek masy ciała i masy kału (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">

Histopatologia okrężnicy

Barwienie hematoksyliną i eozyną tkanki okrężnicy szczurów pokazano na rycinie 1. W normalnej grupie kosmki jelitowe były nienaruszone, błona śluzowa jelit była nienaruszona i była ciągła, komórki i gruczoły były rozmieszczone regularnie. Błona śluzowa i podśluzowa nie były naciekane przez komórki zapalne, a struktura tkanek była prawidłowa. W grupie modelowej kosmki jelitowe i błona śluzowa uległy znacznemu zniszczeniu, lokalne kosmki zostały złuszczone i luźno ułożone, a część struktury gruczołowej zanikła. W grupie C. deserticola barwienie histopatologiczne było mniejsze niż w grupie modelowej, ale w niektórych komórkach kubkowych występowała martwica. Po wstrzyknięciu dootrzewnowym w grupie z blokerem, w porównaniu z grupą C.deserticola, nadal występowała miejscowa utrata kosmków jelitowych oraz doszło do złamania i utraty błony śluzowej jelita.

Rycina 2 Ekspresja czynnika komórek macierzystych i względny stosunek gęstości optycznej w tkance okrężnicy przez detekcję immunohistochemiczną.

Wykrywanie ekspresji czynnika komórek macierzystych i białka C-kit metodą barwienia immunohistochemicznego

Barwienie immunohistochemiczne wykazało, że SCF i C-kit ulegały ekspresji w okrężnicy grupy kontrolnej. W porównaniu z grupą kontrolną ekspresja SCF i C-kit w grupie modelowej była znacząco obniżona (P < 0.05).="" w="" porównaniu="" z="" grupą="" modelową="" ekspresja="" scf="" i="" c-kit="" w="" grupie="" c.="" deserticola="" była="" istotnie="" zwiększona="" (p="">< 00,05).="" nie="" było="" różnicy="" w="" ekspresji="" scf="" i="" c-kit="" między="" grupami="" blokującymi="" i="" modelowymi="" (p="">< 0,05,="" ryciny="" 2="" i="">

RT-qPCR

RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Wyniki te wskazują, że ekspresja C-kit dostosowana przez C. deserticola uczestniczyła w łagodzeniu zaparć, a blokery hamowały skuteczność C. deserticola.

Korzyści z salsy cistanche

Western blotting

Analiza Western blot wykazała, że ​​białko AQP3 ulegało ekspresji na niskim poziomie w normalnej grupie kontrolnej, podczas gdy było ono znacznie zwiększone w grupie modelowej w porównaniu z grupą kontrolną (Rysunek 5) (P < 0.="" 05)="" .="" ekspresja="" białka="" aqp3="" zmniejszyła="" się="" po="" leczeniu="" c.="" deserticola,="" a="" hamujący="" wpływ="" c.deserticola="" na="" ekspresję="" aqp3="" został="" zahamowany="" przez="" leczenie="" blokerem=""><0,05). ekspresja="" cx43="" była="" odwrotna="" do="" ekspresji="" aqp3.="" wyniki="" te="" sugerują,="" że="" działanie="" farmakologiczne="" c.="" deserticola="" na="" szczury="" z="" sc="" osiągnięto="" przez="" promowanie="" ekspresji="" cx43="" i="" hamowanie="" ekspresji="" aqp3="" (figury="">

Transmisyjna mikroskopia elektronowa

Po indukcji loperamidu w niektórych komórkach nabłonka śluzówki okrężnicy w grupie modelowej wystąpił obrzęk mitochondrialny i autofagia. Zmniejszyła się liczba i długość mikrokosmków jelitowych i wystąpiła piknoza komórek kubkowych (ryc. 8). Po leczeniu C. deserticola wzrosła liczba mikrokosmków jelitowych. Themicrovilli zostały ułożone porządnie, a struktura była kompletna. Krótsze komórki kubkowe, nieregularna morfologia mitochondriów i ciężka piknoza komórek kubkowych.

Rycina 3 Ekspresja C-kit i względny stosunek gęstości optycznej w tkance okrężnicy przez detekcję immunohistochemiczną.

DYSKUSJA

Zaparcie jest powszechne w populacji osób starszych i jest jednym z najczęstszych objawów wpływających na stan zdrowia i jakość życia osób starszych [10,11]. Specjaliści tradycyjnej medycyny chińskiej, Bai i wsp. [12] uważali, że podstawową patogenezą SC jest dysfunkcja przewodnictwa jelita grubego, starcza niewydolność organizmu, stopniowa utrata funkcji wątroby i nerek, brak qi i krwi oraz utrata płynów ustrojowych ,co prowadziło do suchych stolców, powodując zaparcia[13]. SC wywiera presję na pacjentów i ich rodziny w wielu aspektach i ważne jest zbadanie jej patogenezy.

C. deserticola pełni funkcje tonizujące Yang nerek, poprawiające krew i regulujące odporność organizmu[14]. C. deserticola i chiński wywar z ziół zawierających C. Deserticola są szeroko stosowane w leczeniu zaparć, a ich efekt kliniczny jest niezwykły. Du i wsp. [15] stwierdzili na szczurzym modelu niedoboru Yang i zaparć, że C. deserticola poprawia amplitudę skurczu izolowanej okrężnicy, wzmacnia kurczliwość przewodu pokarmowego i przywraca normalny poziom hormonów żołądkowo-jelitowych. Ponadto błonnik pokarmowy C. deserticola, produkt uboczny przetwarzania C. deserticola, poprawia zdolność kału do zatrzymywania wody, a jego zaletą jest niska dawka i dobry wpływ na odżywianie jelit i poprawę wydalania[16]. Nasze badanie wykazało, że leczenie C. deserticola poprawiło wilgotność kału i histopatologię okrężnicy u szczurów z zaparciami.

ICC znajdują się w całym przewodzie pokarmowym i odgrywają istotną rolę w neuronalnej kontroli ruchu jelit jako rozruszniki i jelitowe przekaźnictwo nerwowe [17]. Zestaw C[18]. System SCF/C-kit ma kluczowe znaczenie w rozwoju ICC. Ścieżka sygnałowa SCF/C-kit została przeanalizowana podczas leczenia zaparć powolnego transferu u szczurów za pomocą akupunktury [19]. Elektroakupunktura w punkcie Tianshu zwiększyła liczbę ICC okrężnicy u myszy leczonych ACK2-, podwyższyła ekspresję białek SCF i C-kit oraz odwróciła fenotyp ICC. Recepta na ożywienie qi i śledziony może zwiększyć ekspresję ICC w tkance okrężnicy i zwiększyć ekspresję mRNA C-kit i SCF, łagodząc w ten sposób objawy zaparcia [20]. W naszym badaniu immunohistochemia wykazała, że ​​C. deserticola znacząco zwiększał ekspresję SCF i białka C-kit w szczurzym modelu SC, a RT-qPCR wykazała, że ​​C. deserticola znacząco zwiększał ekspresję C-kitmRNA. Bloker C-kit hamował regulację ekspresji SCF i C-kit indukowaną przez C. deserticola.

Zawartość wody w kale i transport wody w okrężnicy są ściśle związane z AQP, które odgrywają ważną rolę w metabolizmie wody jelitowej[21]. W badaniu na szczurach z zaparciami o powolnym transporcie, wywar z defekacji znacznie poprawił objawy zaparć poprzez regulację wchłaniania wody jelitowej poprzez regulację w dół AQP3 i AQP4 [22]. W szczurzym modelu funkcjonalnego zaparcia mechanizm leczenia doustnego płynu Xiaofu Tongjie w przypadku funkcjonalnego zaparcia można zrealizować poprzez regulację ekspresji wazoaktywnego polipeptydu jelitowego i AQP3 w okrężnicy [23]. Szczeliny odgrywają zasadniczą rolę w pośredniczeniu w synchronicznym skurczu komórek mięśni gładkich. Cx43 jest najważniejszym białkiem podczas tego procesu [24]. Utrata ekspresji Cx43 może być częściowo odpowiedzialna za dysfunkcję motoryczną mięśni gładkich [25]. Naprawa struktury sieci jelitowego układu nerwowego u szczurów z zaparciami o powolnym tranzycie może poprawić ekspresję Cx43 itp. oraz objawy zaparć [26]. Wyniki te wskazują, że zwiększona ekspresja AQP3 zmniejsza zawartość wody w kale, prowadząc do zaparć, które mogą być ważnym mechanizmem zaparć. Ekspresja Cx43 może być związana ze skurczem mięśni gładkich jelit i zmniejszać występowanie zaparć. W naszym badaniu Western blotting wykazał, że ekspresja Cx43 była zwiększona, a ekspresja AQP3 hamowana przez leczenie C.deserticola, co skutkowało zwiększonym skurczem mięśni gładkich i zmniejszeniem wchłaniania wody, a leczenie blokerem odwróciło te efekty.

Tabletki z ekstraktem z Cistanche tubulosapoprawiazaparciewywołane przezloperaminai zmniejszauszkodzenie tkanki okrężnicy.

Aby uzyskać więcej informacji, kliknij tutaj.

WNIOSEK

Podsumowując, C. deserticola może hamować ekspresję AQP3 i promować ekspresję Cx43 poprzez szlak SCF/C-kit, poprawiając w ten sposób zaparcia wywołane przez loperaminę i zmniejszając uszkodzenia tkanki okrężnicy u starszych szczurów. Badanie to dostarczyło dobrych podstaw teoretycznych do klinicznego zastosowania C. deserticola.