SLC37A2, cząsteczka związana z fosforem zwiększa się w komórkach mięśni gładkich w zwapnionej aorcie Ⅱ

Wyniki

Wyszukaj cząsteczki kandydujące wzwapnienie wywołane fosforanamiAoSMC. Aby wyszukać cząsteczki, których ekspresja wzrasta w zwapnionym AoSMC, przeprowadzono analizę mikromacierzy DNA około 26,000 genów przy użyciu zwapnionego mRNA AoSMC i niezwapnionego AoSMC. Figura 1 przedstawia mapę cieplną różnych genów ulegających ekspresji pomiędzy AoSMC niehodowanym w stężeniu 2,6 mM i tymi hodowanymi w stężeniu 2,6 mM P przez 12 dni. Ogółem liczba 3066 genów wzrosła ponad dwukrotnie w przypadku AoSMC hodowanego w porównaniu z niehodowanym. Geny o zwiększonej ekspresji to cząsteczki związane z tworzeniem osteoblastów, takie jak osteopontyna, periostyna, czynnik specyficzny dla osteoblastów (POSTN), Wnt3, interleukina-6 (IL-6) iczynnik wzrostu fibroblastów23 (FGF23), jak również kilka cząsteczek z nadrodziny SLC (Tabela 1). Wśród tych cząsteczek skupiliśmy się na SLC37A2, dla którego mRNA wzrosło około 3,1 razy na AoSMC hodowanym z 2,6 mM P przez 12 dni w porównaniu z AoSMCnot hodowanym z 2,6 mM P. Doniesiono, że SLC37A2 jest powiązany z regulacją P, ale jego szczegółowa funkcja jest nieznana. stanu zapalnego na ekspresji SLC37A2.Zwapnienie naczyńdonoszono, że jest promowany przez stan zapalny, dlatego sprawdziliśmy, czy odpowiedź zapalna wpływa na mRNA SLC37A2. 24 godziny po leczeniu LPS wartość IL-6 znacząco wzrosła w porównaniu z AoSMC nieleczonym LPS (ryc. 2A). Wyniki te zaobserwowano także 72 godziny po leczeniu LPS. Nie było znaczących różnic między grupami w ekspresji mRNA SLC37A2 (ryc. 2B).

KLIKNIJ TUTAJ, ABY POZYSKAĆ ​​NATURALNY ORGANICZNY WYCIĄG Z CISTANCHE Z 25% ECHINAKOZYDEM I 9% AKTEOZYDEM NA FUNKCJĘ NEREK

Wsparcie dla Wecistanche – największego eksportera Cistanche w Chinach:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/tel:+86 15292862950

Kup więcej szczegółów specyfikacji:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Ekspresja SLC37A2 w zwapnionym AoSMC indukowanym fosforanami. Aby ustalić, czy SLC37A2 bierze udział w zwapnieniu, zbadaliśmy ekspresję mRNA SLC37A2 na niezwapnionym i zwapnionym AoSMC (ryc. 3). Zwapnienie zaobserwowano w AoSMC hodowanym z 2,6 mM P przez 6 dni, a bardziej zaawansowane zwapnienie zaobserwowano w AoSMC hodowanym z 2,6 mM P przez 12 dni (ryc. 3A). mRNA Runx2 znacząco wzrosło na zwapnionym AoSMC w porównaniu z nieuwapnionym AoSMC (ryc. 3B). mRNA SLC37A2 znacząco zaczęło wzrastać 3 dnia w zwapnionym AoSMC, a 9 dnia zwapnione AoSMC znacząco wzrosło około dwukrotnie w porównaniu z nieuwapnionym AoSMC (ryc. 3C). Ekspresja białka SLC37A2 znacząco wzrosła około dwukrotnie w dniu 6 w zwapnionym AoSMC w porównaniu z nieuwapnionym AoSMC (ryc. 3D).

Ekspresja SLC37A2 u szczurów modelowych z CKD.

Aby odkryć, czy SLC37A2 bierze udział w zwapnieniu naczyń in vivo, zbadaliśmy ekspresję mRNA SLC37A2 na naczyniach szczurów z CKD indukowanych adeniną. Stworzono szczury z CKD indukowaną adeniną zgodnie z protokołem pokazanym na ryc. 4A. Tabela 2 przedstawia masę ciała i dane biochemiczne w dniu uśmiercenia. Masa ciałaPChN wywołana adeninąu szczurów była znacząco niższa w porównaniu ze szczurami bez PChN. W porównaniu z grupą bez PChN, grupy z PChN charakteryzowały się wyższymi poziomami P i Cr w osoczu oraz niższymi wartościami Calevel w osoczu i 24-godzinnym wydalaniem z moczem P, Ca i Cr. Co więcej, wyniki te były bardziej widoczne w grupie z CKD-HP, jak wykazano w poprzednich badaniach.37,39). Zatem czynność nerek uległa pogorszeniu w grupie z CKD, szczególnie w grupie CKD-HP. Zbadaliśmy ekspresję mRNA w naczyniach aortalnych szczurów z CKD (ryc. 4). Chociaż nie było znaczących różnic w ekspresji mRNA Runx2, czynnika transkrypcyjnego, który porusza się na wczesnym etapie mechanizmu zwapnienia naczyń, pomiędzy grupami (ryc. 4B) ekspresja mRNA osteopontyny znacząco wzrosła w grupie z CKD-HP w porównaniu z grupą nie- Grupa CKD iGrupa CKD-LP(ryc. 4C). Ekspresja mRNA SLC37A2 była również znacząco zwiększona w grupie CK D-HP w porównaniu z grupą bez CKD i grupą CKD-LP (ryc. 4D). Ponieważ u tych szczurów występowały duże różnice indywidualne, zbadaliśmy korelację między osteopontyną i mRNA SLC37A2 i stwierdziliśmy istotną korelację między tymi cząsteczkami (ryc. 4E). Badanie histologiczne aorty piersiowo-brzusznej ujawniło zwapnienie przyśrodkowej części aorty jedynie w grupie CKD-HP (ryc. 5A). Aby zbadać miejsce ekspresji SLC37A2 na aorcie, przeprowadziliśmy barwienie immunologiczne aorty szczurów z CKD-HPrats. SLC37A2 ulegał silnej ekspresji w obszarze, gdziezwapnienie naczyńnastąpiło (ryc. 5B).

Ryc. 1. Mapa cieplna genów o różnej ekspresji pomiędzy AoSMC niehodowanym z 2,6 mM P i AoSMC hodowanym z 2,6 mM P. Czerwony reprezentuje geny o wysokim poziomie sygnału, a zielony reprezentuje geny o niskim poziomie sygnału. Komórki mięśni gładkich aorty AOSMC. Zobacz rysunek w wersji online.

Dyskusja

Zbadaliśmy potencjalne cząsteczki związane z P zaangażowane w zwapnienie naczyń. Nasze wyniki pokazały, że SLC37A2 jest jedną z cząsteczek, które zwiększają się wraz zzwapnienie naczyńin vitro i in vivo.

Rodzina SLC37 należy do nadrodziny SLC i obejmuje białka: SLC37A 1-440) Rodzina SLC37 zawiera białka transbłonowe w błonie retikulum endoplazmatycznego i ma sekwencję homologiczną z bakteryjnym antyporterem fosforoorganicznym.(41) SLC37A4 jest lepiej znany jakotransporter glukozy6-fosforanu.(2-44 Jednakże istnieje niewiele doniesień na temat SLC37A2, a szczegóły dotyczące jego funkcji nie są w pełni poznane. SLC37A2, znany również jako SPX2, ulega obfitej ekspresji w mysich makrofagach, śledzionie, grasicy i białej tkance tłuszczowej (WAT ) genetycznie otyłych modeli myszy i komórek podobnych do osteoklastów pochodzących z komórek Raw264.7.(45.6) Białko SLC37A2 transportuje zarówno wymianę glukozo-6-fosforan/fosforan, jak i fosforan/fosforan.(4) Ostatnio doniesienia wykazały związek między SLC37A2 z chorobą zwierzęcą. (47-49) Przyczyną defektu SLC37A2osteopatia czaszkowo-żuchwowa(CMO), samoograniczająca się rozrostowa choroba kości u ras terierów. (47) U bydła mlecznego za śmierć embrionalną odpowiada homozygotyczna mutacja SLC37A2. (8.9) Dodatkowo. SLC37A2 uznano za cel dla genów docelowych witaminy D. (więc) Rozważono także potencjał docelowego genu receptora progesteronu fosforu-Ser294 w progresji raka piersi (1). Donoszono, że zapalenie może zarówno powodować, jak i zaostrzać zwapnienie naczyń. (2s26) Ponadto. SLC37A2 ulega obfitej ekspresji w makrofagach i WAT, na które wpływa infiltracja makrofagów. (s) Dlatego. uznaliśmy, że SLC37A2 może być cząsteczką ulegającą ekspresji podczas zapalenia. Jednakże nasze odkrycia nie wykazały wzrostu ekspresji SLC37A2 w AoSMC wystawionym na reakcję zapalną; wydaje się, że stymulacja zapalna nie wpływa bezpośrednio na tę cząsteczkę. SLC37A2 może brać udział w zwapnieniu naczyń poprzez mechanizm inny niż zapalenie.

Donoszono, że SLC37A2 działa jako związek Pantyporter. (41) Ponadto zgłoszono, że SLC37A2 jest genem docelowym dla witaminy D, a gen SLC37A2 zawiera główne miejsce wiązania witaminy Dreceptor (ss2). Systematycznie skorelowane zmiany w ekspresji genów SLC37A2 i krążących form witaminy D. zaobserwowano w ludzkich komórkach jednojądrzastych krwi obwodowej. (50)Receptory witaminy D wiążą się z 1a, 25-dihydroksywitaminą D, która jest metabolitem witaminy D, i regulują ekspresję genów. lo, 25dihydroksywitamina D, bierze udział w wchłanianiu Ca i P w jelicie, mobilizacji Ca w kościach i ponownym wchłanianiu Caina w nerkach. (3) Istnieje doniesienie, że u szczurów z przewlekłą chorobą nerek wywołaną adeniną stężenie la, 25-dihydroksywitaminy D w surowicy było znacząco wyższe u szczurów na diecie bogatej w p, z zaawansowanym zwapnieniem naczyń, w porównaniu ze szczurami o niskiej -p spożycie diety.39) SLC37A2 może być powiązany z regulacją P poprzez witaminę D. Konieczne są dalsze badania w celu wyjaśnienia, że ​​witamina D wpływa na ekspresję SLC37A2 in vitro i Vivo.

Wykazano, że mechanizm zwapnienia naczyń jest podobny do mechanizmu tworzenia kości. Niedobór SLC37A2 powodowany przez CMO jest klinicznie porównywalny z ludzką dziecięcą hiperostozą korową, znaną również jako choroba Caffeya.7 Ponadto istnieją doniesienia, że ​​SLC37A2 ulega ekspresji w szpiku kostnym i osteoklastach. Hytone i wsp.(7 postawili hipotezę, że dysfunkcja SLC37A2 powodowałby brak równowagi w funkcji osteoblastycznego i osteoklastycznego tworzenia kości, a w rezultacie prowadziłby do hiperostozy.

Runx2 jest niezbędnym czynnikiem transkrypcyjnym dla zwapnienia naczyń. Doniesiono również, że Runx2 jest czynnikiem transkrypcyjnym różnicowania osteoblastów ulegającym ekspresji w rozwijających się komórkach nabłonka sutka. (s435) Runx2 wydaje się być niezbędny do regulacji docelowych genów progesteronu fosfor-Ser294, które są związane z progresją raka piersi. Uważa się, że SLC37A2 jest potencjalnym genem docelowym receptora progesteronu fosfor-Ser294. (s1) Dlatego uważa się, że Runx2 może regulować SLC37A2. W niniejszym badaniu ekspresja mRNA SLC37A2 w aorcie szczurów CkD została skorelowana z mRNA osteopontyny, który jest ukierunkowany na gen Runx2.